抑睾调经汤对多囊卵巢综合征模型大鼠高雄激素血症的影响

张艳慧，王丽娜

(1.黄河科技学院医学院，郑州 450063； 2.河南中医学院第一附属医院妇产科，郑州 450003)

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄妇女常见的一种极为复杂的内分泌及糖代谢异常所致的病理状态，以雄激素过多以及长期无排卵为特征[1]。其临床表现为高雄激素血症、胰岛素抵抗及高胰岛素血症、促性腺激素水平异常、月经异常、闭经、无排卵、多毛、肥胖、不孕、卵巢多囊性改变，高雄激素血症是其突出的特征。本研究采用PCOS模型大鼠为研究对象，旨在探讨抑睾调经汤对PCOS模型大鼠高雄激素血症的影响及其机制。

1 材料与方法

1.1实验材料 SD大鼠(河南省实验动物中心提供，动物合格证号：510216)60只,均为雌性，体质量为(180±10)g。将60只SD大鼠依据随机数字表法分为5组：正常对照组(A组)、模型对照组(B组)、达英-35对照药组(C组)、抑睾调经汤高剂量治疗组(D组)、抑睾调经汤低剂量治疗组(E组)，各12只。

1.2主要药品、试剂 抑睾调经汤(党参15 g、白术12 g、姜半夏10 g、云苓 25 g、香附12 g、木香9 g、制大黄9 g、焦楂 20 g、鸡血藤20 g、车前子15 g、石菖蒲15 g)(河南中医学院第一附属医院制剂室生产，批号：200810)；中性胰岛素注射液(江苏徐州万邦生化制药有限公司生产，批号0106225)；人绒毛膜促性腺激素粉针剂(上海第一生化药业有限公司提供，批号:H31020520)；达英-35片(德国Shering GmbH Und Co.Produktions KG 生产，批号：174A)；血清黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、放免试剂盒(深圳拉尔文生物工程技术有限公司提供，批号:200704)；血清胰岛素放免试剂盒(北京原子高科技术有限公司提供，批号：200703)；血清雄激素放免试剂盒(深圳拉尔文生物工程技术有限公司提供，批号:200704)。

1.3模型制备 正常对照组每日皮下注射等量生理盐水，其余大鼠按照Poresky L法皮下注射人绒毛膜促性腺激素 15 U，每日2次，共22 d；胰岛素于第1～11日内自0.5 U/d开始，逐渐递增至6.0 U/d，按此剂量维持至第22日。以5%葡萄糖溶液替代日常饮水。造模最后1 d禁食过夜，大鼠每周称体质量1次，连续进行阴道上皮细胞涂片检查两个性周期(每个性周期4 d)。以大鼠阴道角化细胞持续出现，涂片失去完整动情周期及血清胰岛素、雄激素升高者，提示PCOS大鼠模型制作成功。

1.4给药方法 各组动物等容灌胃，正常对照组、模型对照组给予生理盐水20 mL/(kg·d) 灌胃；达英-35对照药组、给予达英-35 0.435 g/(kg·d)；抑睾调经汤高剂量组、抑睾调经汤低剂量组分别给予抑睾调经汤48.6 g/(kg·d)、32.4 g/(kg·d)。测定大鼠体质量变化以及血清LH、胰岛素、雄激素的水平。

2 结 果

2.15组大鼠用药前后体质量的变化 用药前A组体质量显著低于B、C、D、E组，差异有统计学意义(t=-21.90、-26.20、-20.03、-25.50，P<0.05)；用药后C、D、E组体质量显著低于B组(t=27.73、31.83、34.13，P<0.05)与正常对照的A组相近；B、C、D、E组治疗前后体质量比较差异有统计学意义(P<0.05)(表1)。

表1 抑睾调经汤对大鼠体质量的影响 (g)

A组：正常对照组；B组：模型对照组；C组：达英-35组;D组:抑睾调经汤高剂量组；E组:抑睾调经汤低剂量组；a与A组比较，P<0.05；b与B组比较，P<0.05

2.25组大鼠用药前后黄体生成素的变化 用药前A组血黄体生成素水平显著低于B、C、 D、 E组，差异有统计学意义(t=-0.18、-0.18、-0.30、-0.29，P<0.05)；用药后C、D、E组血黄体生成素水平显著降低,与B组比较差异有统计学意义(t=0.31，0.19、0.11，P<0.05)，C组黄体生成素下降水平较D组显著(t=-0.12，P<0.05)，D组黄体生成素下降水平较E组显著(t=-0.08，P<0.05)；C、D、E组大鼠治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05)(表2)。

2.35组大鼠用药前后胰岛素的变化 用药前B、C、D、E组血胰岛素水平显著高于A组,差异有统计学意义(t=-10.35、-9.35、-9.96、-9.51，P<0.05)，用药后B、C组胰岛素水平高于与D、E组，差异有统计学意义(t=10.61、7.26，P<0.05)，D组胰岛素下降水平较E组显著(t=-3.35，P<0.05)；D、E组大鼠治疗前后胰岛素水平比较差异有统计学意义(P<0.05)(表3)。

表2 抑睾调经汤对大鼠血清LH的影响 (mIU/mL)

A组：正常对照组；B组：模型对照组；C组：达英-35组;D组:抑睾调经汤高剂量组；E组:抑睾调经汤低剂量组;a与A组比较，P<0.05；与B组比较，bP<0.01,cP<0.05，；c与D组比较，P<0.01

2.45组大鼠用药前后雄激素水平的变化 用药前A组血雄激素水平显著低于B、 C、 D、E组差异有统计学意(t=-18.29、-16.70、-17.51、-17.46，P<0.05),用药后B组雄激素水平显著高于C、D、E组(t=19.47、14.29、9.70，P<0.05)，且C组雄激素下降水平较D组显著(t=-5.18，P<0.05)，D组雄激素下降水平较E组显著(t=-4.59，P<0.05)；C、D、E组大鼠治疗前后雄激素水平比较差异有统计学意义(P<0.05)(表4)。

表3 抑睾调经汤对大鼠血清胰岛素的影响 (mIU/mL)

A组：正常对照组；B组：模型对照组；C组：达英-35组;D组:抑睾调经汤高剂量组；E组:抑睾调经汤低剂量组;a与A组比较，P<0.05；b与B组比较；P<0.05；c与D组比较，P<0.05

表4 抑睾调经汤对大鼠血清雄激素的影响 (mIU/mL)

A组：正常对照组；B组：模型对照组；C组：达英-35组;D组:抑睾调经汤高剂量组；E组:抑睾调经汤低剂量组;a与A组比较，P<0.05；b与B组比较；P<0.05；c与D组比较，P<0.05;a与A组比较，P<0.05；b与B组比较，P<0.01；c与C组比较，P<0.05；d与D组比较，P<0.05

3 讨 论

PCOS发病原因很多，临床主要表现为雄性激素过多、持续无排卵，导致生育期妇女月经紊乱、不孕。高LH促使卵巢卵泡内膜细胞及间质细胞合成过多雄激素，并抑制性激素结合蛋白的合成，使游离的雄激素增多。PCOS伴有明显的胰岛素抵抗与高胰岛素血症，高胰岛素血症又可引起高雄激素血症[2]。其机制有：①直接作用。体外培养发现，胰岛素可通过胰岛素受体或胰岛素样生长因子受体刺激卵巢雄激素的合成[1]，在体内胰岛素可能影响17α-羟化酶、17，20-碳链酶系统(P450c17)的作用[3]。②间接作用。胰岛素可提高性腺细胞对促性腺激素释放激素的敏感性而影响促性腺激素的分泌，抑制性激素结合蛋白的合成，从而导致游离睾酮水平的升高，促进卵巢与胰岛素样生长因子1的结合并抑制肝脏合成胰岛素样生长因子结合球蛋白1，而胰岛素样生长因子1可促进卵巢雄激素的分泌并可同时增强LH促卵巢雄激素合成的作用[4]。PCOS的高雄激素血症治疗多采用减轻体质量、降低胰岛素水平、抗雄激素。由于药物的疗效维持时间短，多数患者不能接受，因而探索中医药治疗PCOS具有重要意义。中医学认为，本病属本虚标实证，肾虚为本，病位在冲任，脾虚、痰湿与瘀血内阻。中医治疗多采用“补肾舒肝，活血化痰”等治疗，对恢复月经、促进排卵取得较好疗效。

目前，对PCOS的研究偏重于肾脏,对它脏的研究较少,研究角度比较单一；研究偏重临床,基础研究开展较少；中医发病机制研究不够深入，对痰、瘀、虚、郁等主要病机因素的实质及其在PCOS形成和进展中的作用和相互联系缺乏深入研究，对不同治法的疗效的比较研究较少[5]。经过长期临床实践，得出“脾阳虚”为本病一重要症型，“痰、瘀”为本病之标，认为健脾化痰、调经助孕可作为PCOS的主要治疗方法之一。本实验结果说明，抑睾调经汤可降低PCOS大鼠体质量，降低大鼠血清LH、胰岛素、雄激素水平，促使卵巢恢复排卵的作用。

本方以党参、白术为君药，功于健脾燥湿；以半夏、茯苓、石菖蒲、木香、香附为臣药，共凑化痰理气调经之功。以大黄、焦山楂、车前子、鸡血藤为佐药，有利湿活血调经的功效。纵观全方标本兼治、攻补兼施，具有健脾化痰、活血化瘀、调经助孕的功效。本方应在临床应用方面进行更多的实践和研究，并且在中西医结合方面进行探索。

[1] Barbieri RL,Makris A,Ryan KJ.Effects of insulin on steroidogenesis in cultured porcine ovarian theca[J].Fertil Steril,1983,40(2):237-241.

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[3] Ehrmann DA,Barnes RB,Rosenfield RL.Polycystic ovary syndrome as a form of functional ovarian hyperandrogenism due to dysregulation of androgen secretion[J].Endocr Rev,1995,16(3):322-353.

[4] Cara JF,Rosenfield RL.Insulin-like growth factor I and insulin potentiate luteinizing hormone-induced androgen synthesis by rat ovarian thecal-interstitial cells[J].Endocrinology,1988,123(2):733-739.

[5] 周丽容，俞瑾.补肾阴药治疗高胰岛素高雄激素血症无排卵症的临床观察[J].中国中西医结合杂志,1996,16(9):515-518.