妇科联检试剂卡临床应用评价

计仁华 丁士标 李召东 杭州市红十字会医院检验科 杭州 310003

阴道分泌物检查是妇科患者的必检项目，常用于判断女性生殖系统炎症，如细菌性阴道病（BV）、念珠菌性阴道炎和滴虫性阴道炎。准确、及时的阴道分泌物病原学检查对临床进行阴道炎病因确诊具有十分的重要意义。近年来，随着检验医学的发展，检测病原体的特有代谢活性及其代谢产物进行阴道炎的病因分类已应用于临床。笔者采用过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶阴道炎五联检测技术对临床送检的804 份阴道分泌物样本进行阴道炎病因学分析，通过与常规显微镜下检查对比，评价该项技术在阴道炎筛查、鉴别诊断的意义。

1 材料与方法

1.1 标本来源 本院妇产科门诊2012 年1 月—2012 年2 月送检的阴道分泌物标本共804 例，患者年龄19～60 岁。所有标本用无菌女性拭子收集患者阴道后穹窿分泌物2 份并立即送检。

1.2 研究方法

1.2.1 常规镜检 直接将阴道分泌物涂湿片在显微镜下观察，严格按照全国临床检验操作规程（第3版）要求进行乳酸杆菌、白细胞、线索细胞（＞20%）、滴虫、真菌检查，并对涂片进行革兰染色确认。阴道分泌物pH 值测定采用上海试剂三厂生产的精密pH试纸进行测定。

1.2.2 妇科联检 过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶、乙酰氨基葡萄糖苷酶检测，采用北京中生金域诊断技术有限公司的阴道炎五联检测试剂盒，操作步骤严格按说明书进行，结果判断按相应软件进行。

1.3 其他试剂 法国梅里埃公司细菌革兰染色液试剂盒。郑州博赛生物技术有限公司科玛嘉念珠菌显色培养基。

1.4 统计学方法 应用SPSS13.0 统计软件进行数据处理，采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

联检法通过氧化氢和白细胞酯酶检测阴道分泌物乳酸杆菌、白细胞与常规镜检法比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；联检法通过唾液酸苷酶和脯氨酸氨基肽酶联合检测BV 与常规镜检结果比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；联检法通过pH 值和乙酰氨基葡萄糖苷酶联合检测念珠菌性阴道炎和滴虫性阴道炎阳性率高于常规镜检法，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 阴道分泌物镜检法和联检法结果比较 例（%）

3 讨论

正常阴道分泌物中乳酸杆菌占95%以上，其产生的过氧化氢（H2O2）不仅可以维持阴道内酸性环境，而且可以阻止某些病原微生物和抑制寄居的条件致病菌，如阴道加德纳菌、动弯杆菌、消化链球菌、普里沃菌、支原体、真菌等的生长[1]。阴道感染时阴道内正常菌群平衡失调，乳酸杆菌减少，导致H2O2含量降低。白细胞酯酶是白细胞膜上的一种蛋白质，阴道黏膜炎症时大量白细胞特别是多形核白细胞浸润并渗透到分泌物中。因此，通过对H2O2浓度及白细胞酯酶的检测可直观地判断患者的阴道微生态是否异常，有效评估阴道壁黏膜有否受损和炎症情况。本研究表明，联检试验盒通过检测H2O2浓度和白细胞酯酶的含量，间接指示乳酸杆菌和白细胞的数量，与常规镜检法比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

细菌性阴道病（BV）是指阴道内乳酸杆菌大量减少，厌氧菌群（阴道加德纳菌、拟杆菌属、动弯杆属、普里沃菌属等）大量增生导致的临床症候群[2]。研究表明，阴道环境中唾液酸苷酶活性与BV 密切相关，但在阴道微生态群中，普里沃菌属和拟杆菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌，部分阴道加德纳菌有此酶活性，动弯杆菌、消化球菌以及人型支原体中此酶活性不能检出[3-4]。因此，单纯检测分泌物中唾液酸苷酶活性必然会漏检此酶活性低的厌氧菌增多引起的BV。已有研究表明，脯氨酸氨基肽酶是阴道加德纳菌和动弯杆菌所分泌的特异性标志物[5]。因此，联合检测唾液酸苷酶和脯氨酸氨基肽酶活性可以最大限度地减少BV 的漏检。本研究也表明，联检试剂利用唾液酸苷酶和脯氨酸氨基肽酶检测BV 与常规检查结果无显著性差异（P＞0.05）。需要指出的是，唾液酸苷酶在肿瘤细胞中活性增强，生殖道肿瘤可导致假阳性；而一些念珠菌如白色念珠菌能产生脯氨酸氨基肽酶导致假阳性，但念珠菌可同时产生乙酰氨基葡萄糖苷酶，可由此加以鉴别[6]。

常规镜检在检查念球菌和滴虫时对技术、经验要求高且主观性强，特别是气温低可直接影响滴虫活动性而可能漏检。研究表明，乙酰氨基葡萄糖苷酶是白色念珠菌和滴虫分泌的特异性酶。因此，可通过此酶检测念珠菌和滴虫[7]。同时，也可以通过检测阴道分泌物pH 值正确区分念珠菌和滴虫：正常阴道分泌物pH 值为3.8～4.5，滴虫感染时pH 值升高，可＞5.0～6.0，霉菌感染pH4.0～4.7，念球菌感染pH≤4.6，而滴虫感染pH 值＞4.8；故可通过滴虫和念球菌在阴道分泌物pH 值上的不同区分两者[8]。

综上所述，通过妇科联检试剂卡五个指标同时检测阴道炎症情况，并通过指标间的配合去除临床的一些干扰，可提高准确性和检出率。该试剂卡操作简单、快速、客观，而且六项指标的判断可以包含白带常规镜检的所有项目。因此，该试剂卡能满足临床检测和诊断需要，有一定的推广价值。

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