COULTER-LH750血液分析仪测定网织红细胞应用评价

丁利胜,徐瑞军,管灵奶,方丽娟,赵洪灿,童向民

(1.杭州市萧山区第四人民医院;2.杭州市第一人民医院;3.浙江大学医学院附属第一医院,浙江 杭州 310000)

网织红细胞(reticulocyte,Ret)是计数是观察人体骨髓红系细胞造血功能重要指标也是临床贫血及有关疾病治疗疗效的重要观察指标[1]。人工显微镜镜检法受到技术人员形态学水平、责任性等多种因素影响,所以稳定性和重复性差[2]。近年来,随着全自动血液分析仪检测技术的不断发展,为RET检测提供了科学的方法,COULTER LH750全自动血液分析仪利用激光和核酸染色技术同时对上万个红细胞进行分析自动得出RET结果,但其结果与性能究竟如何?需要进一步分析与评价

一、材料和方法

1.病例来源。随机抽取门诊、病房EDTA-K2抗凝的血常规标本80份,每份标本均进行手工网织红细胞计数和LH750仪器RET检测。

2.实验方法。取溶血性贫血患者标本(RET>5.0%)、健康体检者标本、再生障碍性贫血患者标本(RET<0.5%)各一份EDTA-K2抗凝血备用。用于仪器高、中、低值RET检测精密度及线性范围评价。批内精密度:取患者高、中、低值RET标本各一份,每份仪器连续测定10次,计算±s及变异系数(CV);批间精密度:每天同一时间用配套原装质控品检测RET,连续测定22天,计算±s及CV。仪器稳定性检测:用1 份抗凝血样本,分别于即时,1、2、4、8、24、48、72h 测定 RET,要求每个时间段测三次求均值。携带污染率检测:选取高值样本(6.51%)连续测定3次,再检测低值样本(0.52%)连续测定3次,按照公式计算携带污染率(%)=[(L1-L3)/(H3-L3)×100%]。线性范围检测:用生理盐水将RET高值样本分别作100%、80%、60%、50%、40%、20%、10%、5%稀释,每个稀释度平行测3次结果,取均值。每一稀释度测得的RET绝对值与理论值比较,以理论值为X轴,实测值为Y轴,得出线性回归方程。

1.精密度。(1)批内精密度。LH750测定高、中、低 Ret值抗凝血样本,每份标本连续测定10次,其批内精密度结果见表1。(2)批间精密度。用原装高值质控品检测RET,连续测定22天,计算±s及CV。其批间精密度结果见表2。(3)

二、结 果

表1 三分标本测定10次结果及CV值

表2 批间精密度测定结果(CV%)

仪器结果稳定性和携带污染率。在2-8℃条件下,48h内Ret测定值无明显变化,CV<1%,72h略有降低。携带污染率:选取高值样本(6.51%)连续测定3次,再检测低值样本(0.52%)连续测定3次,携带污染率为0.33%。(4)线性范围。以理论值为X轴,以实测值为Y轴,得出回归方程为Y=0.993X+7.26。(5)与手工结果比较及相关性。LH750测定Ret的结果与人工显微镜计数法的结果比较(t=1.739,P>0.05),结果无统计学差异,两种结果的相关性良好(r=0.98,P<0.01)。

三、讨 论

全自动COULTERLH750血细胞分析仪是采用单个流式通道进行细胞及网织红细胞检测,将网织红细胞内残存的RNA着色,并结合仪器VCS(容量、电导、激光散射)等技术,自动分析30000个红细胞,大大提高了网织红细胞分析结果的准确性。有报道提示,全自动法及显微镜法(均抗凝标本)Ret检测间差异有统计学意义[3],但也有相反报道[4]。从我们的实验结果表明,LH750自动检测与人工显微镜法计数Ret比较,相关性良好。批间重复性实验显示准确可靠,其变异系数和携带污染率小。

人工显微镜法不适合大标本量开展,LH750全自动分析仪是在封闭的系统中进行,受外来因素影响少且分析的细胞数量多,其结果精密度、准确度较高,更能满足现代医院的批量检测。不仅如此,LH750血液分析仪还提供了不成熟网织红细胞分数,平均网织红细胞体积,高、中、低荧光网织红细胞百分比等多项新型参数,为临床骨髓造血恢复、贫血治疗疗效等提供有效指标。

综上所述,对COULTERLH750全自动血液分析仪与传统人工显微镜法相比优越性明显,能取代人工显微镜检查。

[1]罗春丽.临床检验基础[M].第二版.北京:人民卫生出版社,2007.32.

[2]张采芬,李鉴峰.网织红细胞计数、绝对值、网织红细胞指数的临床意义[J].中国实用内科杂志,2002,22(1):31-33.

[3]赵燕田.仪器法与目测法网织红细胞计数的比较[J].现代检验医学杂志,2005,20(5):38.

[4]王沈馨,郑胜香.两种网织红细胞计数方法的比较[J].宁夏医学杂志,2006,28(1):71-72.