邓老冠心胶囊对动脉粥样硬化斑块影响的实验研究

李新梅，毛 炜，吴焕林，陈秋雄

随着社会发展及生活方式的改变，动脉粥样硬化性心脏病已严重威胁人类健康。早期的动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)为脂质条纹，逐渐发展形成成熟的粥样斑块。粥样斑块的溃疡、破裂是临床心血管病事件发生的关键病理生理学基础。急性心血管病事件主要取决于AS斑块的不稳定性，即易损性，而斑块中的薄纤维帽与易损性紧密相关。因此，有关斑块稳定性的研究已成为近年来AS领域中的研究热点。ApoE基因敲除小鼠 (Apolipoprotein E knockout mice，ApoE-/-mice)所致的高脂血症和动脉粥样硬化(AS)模型是缘于遗传因素损伤，其病变特点更接近人类［l-2］。

本研究拟从形态学角度及对血脂的影响，探讨邓老冠心胶囊对ApoE小鼠动脉粥样硬化斑块及血脂的影响，以期为临床应用中药防治高脂血症和动脉粥样硬化提供科学依据，为进一步探讨其作用机制奠定基础。

1 资料与方法

1.1 研究对象及分组 5周龄雄性ApoE小鼠30只(购于北京大学医学部动物实验中心)，饲以含脂肪21%(wt/wt)胆固醇0.15%的饲料，喂养13周后，将小鼠随机分为2组:实验组及对照组各15只。给以同样高脂饲料喂养的同时，实验组给以0.25 g冠心胶囊(拌于饲料，主要组成为党参、田七、茯苓、法半夏、五爪龙、丹参、枳壳、陈皮等，广东省中医院院内制剂，每粒含生药4.5 g)，每日1次，连续喂13周。眼球取血后处死，无菌条件下取出心脏及主动脉。取主动脉根部，甲醛固定，常规石蜡包埋。

1.2 检测项目及观察指标 (1)病理形态学观察:组织常规脱水，石蜡包埋、石蜡连续切片，染色。普通光镜观察并进行图像分析，计算斑块占管腔比例，观察薄纤维帽的形成情况。切片用CIMAX病理分析软件进行形态测量分析。测量粥样斑块面积(PA)与管腔面积(LA)的比例(PA/LA)。(2)血脂水平变化:ApoE小鼠处死前，眼球取血，将血静置。离心制备血清，-20℃冰箱保存。稀释血清，氧化酶法测定血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平。

2 结果

两组ApoE小鼠在实验过程中均有死亡，开始给药时给以灌胃治疗，死亡小鼠较多，后拌于饲料中，无小鼠死亡。最后实验组处死8只小鼠，分别行病理及血脂检查，对照组处死14只小鼠，全部行血脂检查，其中1例病理取材不理想，故成功提取病理标本13例。

2.1 病理形态学观察 染色显示，对照组小鼠主动脉斑块内胆固醇酯及胆固醇结晶增多，纤维帽菲薄，表面有大量的泡沫细胞覆盖，呈现易损斑块特征。而实验组亦可见到动脉粥样硬化斑块，但纤维帽较厚。同时，实验组小鼠粥样斑块面积(PA)与管腔面积(LA)的比例明显低于对照组(P＜0.05)，见表1。

表1 两组ApoE小鼠粥样斑块面积(PA)与管腔面积(LA)的比例

2.2 血脂水平变化 对两组ApoE小鼠眼球取血，检验血脂各项指标进行统计学分析，两者差异无统计学意义(P＞0.05)。实验组ApoE小鼠血脂水平与对照组小鼠比较，差异无统计学意义(P ＞0.05)。见表2。

表2 两组小鼠血脂水平情况(mmol/L)

3 讨论

邓老冠心胶囊由我国名中医邓铁涛教授经验方—冠心方制成。邓老认为，冠心病为本虚标实之证，其病机关键点为气虚痰瘀。邓老选用具有益气除痰、行瘀通络的药物组成冠心方(党参、田七、茯苓、法夏等)，在临床运用已30余年，具有很好的临床疗效，能显著改善心绞痛症状，改善心电图及血液流变学指标［3］。近年来，笔者应用由冠心方制成的邓氏冠心胶囊治疗心绞痛(广东省中医药管理局课题)，发现其能改善心肌缺血，减少心绞痛的发作频率及时间［4］，并能提高患者的生活质量［5］。

吴卫平等证明，丹参具有抗氧化功能，减少氧化低密度脂蛋白形成［6］。穿心莲等有保护内皮功能［7］。还有研究表明，活血化瘀的中药可改善血液理化性质，调整凝血系统功能，抑制血小板聚集，防治心肌缺血［8］。制首乌、桑寄生对血管平滑肌细胞增生有抑制作用［9］。文川等［10］研究发现，具有活血化瘀作用的芎芍胶囊可抑制平滑肌细胞增殖和表型转变(影响平滑肌细胞增殖相关基因蛋白表达和细胞跨膜信号转导)。现代药理研究表明，黄芪［11］、党参能增强心肌收缩力，改善左心功能，增加心排血量，丹参［12-13］、三七等具有抑制血小板聚集、降低血液粘稠度以及扩张冠状动脉、减轻微血管阻力的作用。

目前，可制作动脉粥样硬化动物模型的动物有猪、兔、鼠等，比较公认的较稳定的模型当属ApoE基因敲除小鼠模型。本项目采用严谨的实验设计，采用科学的动物模型，观察对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样斑块的影响，从而分析中医药稳定斑块的作用，具有先进性及科学性。

本研究结果初步表明，邓老冠心胶囊在减少动脉粥样硬化斑块形成、稳定动脉粥样硬化斑块方面有一定疗效，为中医药在防治冠心病中的作用机制进行了初步、有益的探讨。其具体机理尚待进一步探讨和研究。

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