老年鼻咽癌组织增殖细胞核抗原、血管内皮细胞表达与PET/CT显像FDG摄取的相关性

郭立兵 石卫民 宋维舒 范义湘 胡伟汉 金 厅

(广东省第二人民医院肿瘤一科，广东 广州 510317)

近十年来脱氧葡萄糖(FDG)正电子发射体层显像CT(PET/CT)已经广泛地应用于恶性肿瘤的诊断，分期，疗效评估等，临床研究发现18氟FDG(18F-FDG)/PET显像对鼻咽癌的诊断也具有重要的价值，肿瘤组织较正常组织18F-FDG的摄取显著增加〔1〕，但其机制并不清楚。可能其与肿瘤组织快速增殖有关〔2，3〕，也可能与肿瘤细胞微环境乏氧有关〔4，5〕。因此，本文探讨老年鼻咽癌组织增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)过度表达与18F-FDG PET显像摄取的相关性。

1 资料与方法

1.1 资料 选择2008年6月至2010年8月我院和中山大学肿瘤防治中心收治的38例老年鼻咽癌患者。病例纳入标准:年龄≥60岁、首程治疗、无远处转移的早期鼻咽癌患者;卡氏功能状况评分(KPS)＞70分;自然生存期＞2年;能进行语言及文字沟通。其中男34例，女6例，年龄60～78(平均65.7±5.2)岁;按鼻咽癌UICC 2002分期，Ⅰ期9例，Ⅱ期31例;T分期:T1 17例;T2 23例;全部采用6 MV加速器先行面颈联合野照射，后缩野改耳前野照射，鼻咽部总剂量为68～72 Gy，颈部组织预防量为46～50 Gy，阳性淋巴结推量18～20 Gy;患者均于放疗前行PET/CT检查。

1.2 方法

1.2.1 PET检查 采用德国西门子公司产Biograph PET/CT扫描仪。检查前禁食6 h以上，按150 μCi/kg静脉给予FDG，给药1 h后开始采集。采用三维采集模式与全身PET采集程序，取5～6个床位，每个床位发射采集与透射扫描时间比较为7∶3。以迭代法重建图像，层厚5 mm，测量肿瘤的最大标准摄取值(SUVmax)，用感兴趣区(ROI)工具测量同一层面的平均摄取值(WUVmean)。

1.2.2 PCNA，VEGF表达检测 采用免疫组化方法。肿瘤标本经过4%甲醛固定，石蜡包埋，应用标准链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶亲和(SP)免疫组化法染色。SP染色试剂盒为福州迈新生物试剂公司产品。染色阳性细胞率:由有经验的病理医生分别在显微镜上随机选择3个低倍视野(100倍)，计数每张切片上至少100个细胞中VEGF、PCNA染色阳性的细胞数，计算其阳性细胞的百分率;计数3次，取其平均值为染色阳性细胞率。分为5级记录:1级0～20%，2级21% ～40%，3级41% ～60%，4级61% ～80%，5级81% ～100%。

1.3 统计学方法 应用SPSS14.0统计软件进行分析，数据资料以±s表示，计量资料比较采用t检验，阳性率比较采用χ2检验，不同指标之间的关系比较采用Pearson相关分析。

2 结果

2.1 PET检查结果 40例患者的鼻咽癌原发灶在PET检查中均显影，见图1。原发灶的 SUVmax与 SUVmean分别为9.45±1.87和6.04±1.09。T1期肿瘤原发灶的 SUVmax为8.95±1.91，T2期原发灶的 SUVmax为11.55±1.70，T1期原发灶SUVmax低于T2期(t=4.46，P＜0.001);非角化分化型肿瘤原发灶SUVmax为 9.64±1.72，非角化未分化型肿瘤原发灶SUVmax为9.74±1.82，非角化未分化型肿瘤原发灶SUVmax为10.44±2.16，两者比较无显著差异(t=1.230，P ＞0.05)。

2.2 肿瘤细胞PCNA及VEGF表达 40例鼻咽癌患者肿瘤组织的PCNA染色均为阳性，阳性细胞率为36.18%，其中1级8例，2级19例，3级6例，4级2例，5级1例。鼻咽癌组织PCNA染色阳性细胞呈散在分布，无明显区域性。PCNA阳性信号为棕黄色，定位于细胞核，见图2。40例鼻咽癌患者肿瘤组织VEGF染色均为阳性，阳性细胞率为60.8%，其中1级4例，2级6例，3级10例，4级16例，5级4例。VEGF阳性表达部位在细胞质，胞膜也有轻度染色，在坏死组织周围和癌巢边缘的表达明显增强，并且在癌细胞向间质浸润最明显处表达最强。见图2。

2.3 肿瘤原发灶的FDG摄取与PCNA、VEGF表达的关系鼻咽癌组织FDG摄取(SUV max)与PCNA表达阳性率无相关(r=0.135，P=0.407)，与 VEGF 表达阳性率相关(r=0.460，P=0.03)。见图3，图4。

图1 鼻咽癌PET显像

图2 鼻咽癌的PCNA、VEGF表达

图3 鼻咽癌组织FDG表达(SP法，×100)

图4 鼻咽癌组织FDG摄取(SUVmax)与PCNA、VEGF表达阳性率的相关性

3 讨论

临床研究表明，18F-FDG-PET显像对鼻咽癌的诊断、鉴别诊断、分期均具有重要的价值，本研究发现，老年早期鼻咽癌患者癌组织的SUV值较高，高于其他部颈部恶性肿瘤〔6～9〕，说明其高代谢和生长增殖旺盛，肿瘤原发灶的FDG摄取与T分期相关，与肿瘤分化程度无明显相关，与报道相似。

LEGF在肿瘤血管生成中处于核心地位，在多种实体瘤表达异常升高。缺氧诱导VEGF合成，促进新生血管的形成，增加血管的通透性，进而促进了肿瘤的浸润发展和转移〔10〕。本研究显示，40例老年鼻咽癌患者的肿瘤组织VEGF染色均为阳性，且染色阳性细胞率集中于2～3级，与文献报道一致〔11〕。有研究发现，小细胞肺癌和乳腺癌组织FDG-PET显像的SUV值与肿瘤组织的微血管密度相关，与VEGF的表达相关，而与肿瘤分化、细胞增殖情况等与无关〔4，5〕。本研究显示，鼻咽癌组织FDG摄取(SUVmax)与VEGF表达的阳性率相关。

PCNA是DNA聚合酶δ的辅助蛋白，与细胞周期的增殖周期密切相关，其表达情况反映了细胞的增殖状态。PCNA在鼻咽癌组织中常过表达，并且与肿瘤的临床分期、颈淋巴结转移呈负相关〔12〕。本研究中40例老年鼻咽癌组织标本全部都有PCNA表达，阳性细胞率为36.18%，与以往报道相似〔13〕。理论上肿瘤细胞的增殖会影响肿瘤18F-FDG的摄取，但既往的研究中二者的关系则存在争议。在一些研究中，18F-FDG与肿瘤组织增殖相关〔2，3〕，而另外一些研究中发现 FDG摄取与增殖无关〔14〕。本研究显示，老年鼻咽癌组织18F-FDG摄取与肿瘤细胞的PCNA蛋白表达无相关。

1 Yao M，Smith RB，Graham MM，et al.The role of FDG PET in management of neck metastasis from head and neck cancer after definitive radiation treatment〔J〕.Int J Radiot Oncol Biol Phys，2005;63(4):991-9.

2 Okada J，Yoshikawa K，Itami M，et al.Positron emission tomography using fluorine-18-fluorodeoxyglucose in malignant lymphoma:a comparison with proliferative activity〔J〕.J Nucl Med，1992;33(3):325-9.

3 Vesselle H，Schmidt RA，Pugsley JM，et al.Lung cancer proliferation correlates with〔18F〕fluorodeoxyglucose uptake by positron emission tomography〔J〕.Clin Cancer Res，2000;6(10):3837-44.

4 Pedersen MW，Holm S，Lund EL，et al.Coregulation of glucose uptake and vascular endothelial growth factor(VEGF)in two small-cell lung cancer(SCLC)sublines in vivo and in vitro〔J〕.Neolpasia，2001;3(1):80-7.

5 Kaira K，Oriuchi N，Shimizu K.Correlation of angiogenesis with18F-FMT and18F-FDG uptake in non-small cell lung cancer〔J〕.Cancer Sci，2009;100(4):753-8.

6 Schoder H，Carlson DL，Kraus DH，et al.18F-FDG PET/CT for detecting nodal metastasis in patients with oral cancer staged N0 by clinical examination and CT/MRI〔J〕.J Nucl Med，2006;47(5):755-62.

7 Goshen E，Davidson T，Yakalom R，et al.PET/CT in the evaluation of patients with squamous cell cancer of the head and neck〔J〕.Int J Oral Maxillofac Surg，2006;35(4):332-6.

8 Blodgett TM，Fukui MB，Snyderman CH，et al.Combined PET/CT in the head and neck:part 1，Physiologic，altered physiologic，and artifactual FDG uptake〔J〕.Radiographics，2005;25(4):897-912.

9 Ha PK，Hdeib A，Goldenberg D，et al.The role of positron emission tomography and computed tomography fusion in the management of early-stage and advanced-stage primary head and neck squamous cell carcinoma〔J〕.Arch Otolaryngol Head Neck Surg，2006;132(1):12-6.

10 宋冬梅，张丽莎，王宝山，等.低氧条件下人参皂甙Rg3诱导人喉鳞癌细胞凋亡及对HIF-1α和VEGF表达的影响〔J〕.肿瘤防治研究，2008;35(8):533-7.

11 姜武忠，廖遇平，赵素萍，等.鼻咽癌组织中转移抑制基因和血管内皮生长因子蛋白表达及其临床意义〔J〕.中华耳鼻咽喉头颈外科杂志，2006;41(3):200-4.

12 莫浩元，张昌卿，冯凯涛，等.鼻咽癌组织中P53和PCNA表达与临床分期、VCA/IgA、EA/IgA、放射敏感性和预后的关系〔J〕.癌症，2004;23(21):1551-4.

13 刘文其，王绍丰.凋亡、PCNA及c-myc表达水平与鼻咽癌放射敏感性的相关性研究〔J〕.中国肿瘤临床，2005;32(5):256-8.

14 Buck AC，Schirrmeister HH，Guhlman CA，et al.Ki-67 immunostaining in pancreatic cancer and chronic active pancreatitis:dose in vivo FDG uptake correlate with proliferative activity〔J〕?J Nucl Med，2001;42(6):721-5.