龚英峰
(唐山市滦县人民医院,063700)
电泳技术是根据蛋白质的物理特性对蛋白质进行分离的方法。将血清或其他体液放在特殊的载体中,根据其所带电荷进行分离。根据蛋白质所带电荷的多少和蛋白质分子的大小及形状分离出不同的蛋白成分。血清蛋白电泳可以用于评价、诊断和检测不同的疾病。传统的电泳方法是以醋酸纤维素薄膜作为介质,但是由于醋酸纤维素薄膜杂质多,含有大量的纤维和金属离子,造成电泳速度慢,分离不良,并有严重的电渗现象,而琼脂糖凝胶则具有微细的多孔网状结构,所以随着电泳技术的不断发展,琼脂糖凝胶电泳已经逐步替代醋酸纤维素薄膜电泳并实现了自动化,且操作简单;另外它的最大优点是几乎不吸附蛋白质,因此电泳无拖尾现象,分离清晰、分辨率高,更适用于对大量标本的常规分析,易于在临床实验室普及,所以血清蛋白电泳技术已经在各个医院普遍开展用于疾病的诊断和预后的判断。我们利用法国Sebia公司生产的半自动琼脂糖凝胶电泳仪对本地区65例肾病患者和75例健康人的血清蛋白电泳图谱进行比较和分析,为临床诊治肾病提供一定的理论依据。
1.1 对象 选择2011-01—05在我院住院确诊为肾病的患者65例,年龄20~84岁,平均年龄(55.1±15.6)岁。选择同期门诊健康人(血常规、肝肾功正常,无黄疸,无高脂血症)75例作为健康组,年龄27~83岁,平均年龄 (49.9±16.5)岁。
1.2 仪器和试剂 法国Sebia公司HYDRASYS半自动电泳仪、扫描仪和配套试剂盒。
1.3 方法 收集肾病患者及健康组空腹血液标本进行蛋白电泳分析:取10 μL血清加样、电泳、干燥以及染色、脱色、干燥,最后取出凝胶板用扫描仪进行扫描定量。
1.4 统计学处理 采用SPSS 15.0软件包进行统计处理。计量资料比较采用分组样本资料t检验。
通过实验研究我们发现肾病患者电泳图谱中白蛋白百分比显著低于健康组,差异有高度统计学意义(P<0.001);肾病患者α1、α2、β球蛋白百分比显著高于健康组 (尤以α2球蛋白增高最显著),差异有高度统计学意义(P<0.001);肾病患者γ球蛋白百分比与健康组比较差异无统计学意义(P>0.05,表1)。
表1 肾病患者与健康组血清蛋白电泳结果比较(±s)
表1 肾病患者与健康组血清蛋白电泳结果比较(±s)
组别 例数 ALB(%) α1(%) α2(%) β(%) γ(%)肾病患者 6550.2±9.63.7±0.818.2±6.914.6±3.413.3±5.5健康组 7564.4±3.12.6±0.39.1±1.210.3±1.313.6±1.7
肾病患者由于感染、病毒、血管病变、免疫损伤等原因而使肾小球和肾小管都有一定程度的损害,所以肾脏对蛋白质的通透性增高而重吸收能力下降,导致血清蛋白质的丢失,特别是小分子量的蛋白质(如白蛋白)[1],而α2球蛋白主要含有α2巨球蛋白[2],不易丢失,导致肾病患者电泳图谱中α2球蛋白增高最显著;α2球蛋白增高的另一个原因是由于低密度脂蛋白相对增加所致。α1球蛋白增加主要是为了补偿由于白蛋白降低引起的低渗透压,而使体内的α1糖蛋白增加所致,虽然α1糖蛋白也大量丢失于尿中,但体内合成量超过排泄量,故仍可增加。由于小分子量的转铁蛋白也排泄于尿中,所以慢性肾炎患者有时β球蛋白可降低。分子量较小的IgG在肾病时可大量丢失于尿中从而导致γ球蛋白可以降低,但是在慢性肾炎、狼疮性肾炎时由于免疫刺激使IgG合成增加而致使γ球蛋白增加。
综合以上资料,血清蛋白电泳在肾脏疾病的诊断及疗效观察方面有重要的意义。虽然现在我们可以采用生化或免疫方法单独检测多种不同的蛋白质,但是血清蛋白电泳仍然是我们了解人体内蛋白质全貌的最有价值的方法,可为多种疾病的诊断特别是肾脏疾病的诊断提供较全面的信息。相信随着电泳技术的不断发展其必将越来越受到同道们的青睐[3]。
[1]周新,涂植光.临床生物化学和生物化学检验[M].3版.北京:人民卫生出版社,2004:272-273.
[2]叶应妩,莫培生.新编临床检验法:上册[M].泰安:山东省出版总社泰安分社,1986:99.
[3]沈霞.电泳技术的现状和发展[J].中华检验医学杂志,2001,25(5):263-265.