印片细胞学和冰冻切片检查在甲状腺乳头状癌诊断中的应用分析

陈友权

[摘要] 目的 探讨印片细胞学和冰冻切片检查在甲状腺乳头状癌术中诊断的作用。 方法 对术中怀疑甲状腺恶性肿瘤的同时进行印片细胞学和冰冻切片组织学检查，并经石蜡切片诊断为乳头状癌的86例进行对照分析。 结果 甲状腺乳头状癌印片细胞学和冰冻切片检查无明显差异，但印片细胞学的细胞学特征更清晰，易于观察。 结论 印片细胞学是冰冻切片检查的很好补充，两者结合使诊断甲状腺乳头状癌的阳性率有所提高。

[关键词] 甲状腺乳头状癌；冰冻切片检查；印片细胞学

[中图分类号] R736.1[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2012）16-0111-02

Analysis of the application of inprint cytology examination and frozen section examination in the thyroid papillary carcinoma

CHENYouquan

Department of Pathology，the Second Peoples Hospital of Liuan City in Anhui Province，Liuan 237000，China

[Abstract] Objective To explore the practical value of imprint cytology examination and frozen section examination of the thyroid papillary carcinoma in rapid intra-operative pathological diagnosis. Methods Intra-operative imprint cytology examination and frozen section examination were performed and diagnosed rapidly. In 86 cases of fresh samples suspected thyroid malignant that submitted during operation. All of which were conformed the thyroid papillary carcinoma accurily in paraffin sections afterwards. Results Imprint cytology examination and frozen section examination of the thyroid papillary carcinoma in rapid intra-operative pathological diagnosis have no obvious difference, but the characteristics of cytology in imprint cytology examination are more clear and easy to observe than those in frozen section examination. Conclusion Imprint cytology examination is a good supplement to frozen section examination, so the diagnosis positive rate of papillary thyroid carcinoma was improved thorough combining imprint cytology examination and frozen section examination

[Key words] Thyroid papillary carcinoma；Frozen section examination；Imprint cytology examination 甲状腺乳头状癌是甲状腺最常见的恶性肿瘤，近年来发病率逐渐升高。冰冻切片作为有效的诊断手段，使甲状腺患者乳头状癌的诊断准确率明显提高，但仍有部分病例冰冻切片难以诊断。而细胞印片技术具有简单、快速的优点，使细胞结构显示清楚。 因此，我科对术中怀疑有癌变可能的病例，同时进行冷冻切片与细胞印片，提高诊断准确率，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料

2010年5月～2011年12月，我院普外科切除86例怀疑为恶性的甲状腺肿块术中行印片细胞学和冰冻切片检查诊断。术前均未行肿块活检或穿刺细胞学检查。

1.2方法

①印片细胞学手术取下的新鲜标本立刻送检， 取材刀多切几个切面， 肉眼观察标本， 在最典型的病灶上用载玻片在不同切面上轻轻触压， 制成2张印片， 同时做石蜡切片，诊断对照。印片制成后，95%乙醇湿固定3 min， 常规HE染色、中性树脂封片，二甲苯透明封固，镜下观察。②冰冻切片新鲜标本术中送检印片的同时，对典型病灶进行取材，OCT包埋，置于冷极板上-20℃冷冻2～3 min（Thermo Shandon Cryotome H-E型冰冻切片机），切片厚度为5～7 μm，粘贴载玻片上，95%乙醇湿固定1 min，常规HE染色、操作同上。

1.3 统计学方法

印片细胞学检查与冰冻切片检查方法的比较采用χ2检验，P ＜ 0.05为差异有统计学意义。

2结果

86例印片诊断结果与石蜡切片比较，明确诊断81例，可疑5例，与石蜡切片诊断符合率准确率达94.2%。冰冻切片诊断结果与石蜡切片比较，明确诊断83例，可疑3例，与石蜡切片诊断符合率准确率达96.5%。两者总的与石蜡切片诊断符合率准确率为98.8%。印片细胞学检查与冰冻切片检查方法比较差异无统计学意义（χ2 =0.524，P =0.469）。印片细胞学检查与冰冻切片检查的细胞学特征如乳头状结构阳性率分别为87.2%、93.0%；核内胞涵体阳性率分别为90.7%、82.6%；核沟阳性率分别为93.0%、89.5%；毛玻璃样核阳性率分别为41.9%、34.9%；砂粒体的阳性率分别为29.1%、37.2%。两者比较差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。见表1。

2.1大体标本观察

大体标本包膜完整者34例， 无包膜或不完整者52例。切开可见镜界不清肿物， 切面灰白或棕黄色，伴囊性变或钙化者19例。

2.2组织学观察

镜下呈典型的乳头状癌改变， 表现为真性乳头，即乳头中央为纤维血管轴心表面癌细胞被覆形成多级分支呈乳头状突起外观，在轴心处及纤维间质间并可见砂粒体及特殊形态表现的癌细胞核。86例石蜡切片组织学诊断均为甲状腺乳头状癌。其中微小乳头状癌9例，滤泡型乳头状癌3例，乳头状癌伴结节性甲状腺肿7例，乳头状癌伴桥本甲状腺炎2例。2.3 细胞学观察

细胞核出现特征性改变，包括核内胞涵体、核沟、毛玻璃样核。印片中可见癌细胞呈团块状聚集，界限不清，呈多层树枝状、乳头状片段。乳头结构清晰。印片中出现毛玻璃样核、核沟、 核内包涵体的比例比冰冻切片多。而出现印片中乳头状核和砂粒体的比例比冰冻切片少（图1、2）。

3讨论

术中快速病理诊断对进一步确定手术方案有决定性的意义，所用方法有冷冻切片、快速石蜡切片和细胞学诊断。近30多年的研究报告认为手术中细胞学诊断具有重要的应用价值[1]。而甲状腺乳头状癌的术中快速诊断主要为冰冻及细胞学诊断，本实验表明，冰冻切片及细胞学印片两者的确诊率差异无统计学意义（P > 0.05）。4例冰冻切片乳头状结构不明显，主要表现为细胞异型性，但细胞学印片乳头状结构清晰。我们认为主要为冰冻切片为新鲜组织，没有充分固定，间质较疏松水肿，但细胞学印片，表现为细胞和乳头的立体结构，表现更加形象。2例滤泡状乳头状癌细胞学涂片癌细胞学形态核沟、包涵体特征更明显。因此冰冻切片加细胞学印片对甲状腺乳头状癌诊断总的阳性率有所提高，说明两者起着很好的互补作用。

甲状腺乳头状癌的病理诊断组织学异型性表现为真性乳头状结构和砂粒体，真性乳头状结构具有纤维脉管轴心和三级分支，是诊断甲状腺乳头状癌的重要条件，冰冻切片表现为水肿的乳头和脑回状结构，在细胞涂片上可见癌细胞团块状聚集， 乳头状排列。本组病例冰冻出现乳头状结构比涂片多5例，经石蜡切片证实是微小癌的缘故。砂粒体在组织学切片上呈同心圆形、分层状嗜碱性的钙化球，其形成原因可能是癌细胞变性坏死经钙盐沉着导致的。它常位于乳头突起尖端部中央间质处，也可存在肿瘤邻近组织中。在细胞学涂片上， 典型的同心圆状砂粒体较少见， 而不规则形钙化球碎屑较多见。砂粒体的存在具有诊断意义。本组病例冰冻出现砂粒体结构比涂片中多7例，分析主要为冰冻切片组织材料更多的缘故。甲状腺乳头状癌的细胞学异型性表现为核内胞涵体、核沟和毛玻璃样核[2]。核内包涵体在组织学上又称假核仁， 是胞浆向核内陷入所致 ，被认为是甲状腺乳头状癌细胞学的特征性表现。本组病例冰冻出现核内包涵体比涂片中少7例，可能涂片上细胞学特征更典型的缘故。核沟在组织学切片上沿核长轴呈沟状，多见于卵圆形或梭形核， 细胞学涂片与组织学相似，本组病例冰冻出现核沟比涂片中少3例。毛玻璃样核在组织学切片中表现为核着色淡呈半透明模糊状， 染色质细致靠核膜，核仁靠核膜， 这些毛玻璃样核常重叠排列。在细胞学涂片不如石蜡包埋切片常见。冰冻切片上表现为核空、核畸形和核拥挤。在细胞学涂片上毛玻璃样核与组织学切片上相似， 但胞核着色稍深， 有模糊不清感。本组病例冰冻出现毛玻璃样核比涂片中少6例，分析为印片中细胞形态更典型。另外，涂片及切片中可见有多核巨细胞，有人认为是乳头状癌伴随特征之一[3]。

甲状腺乳头状癌需与甲状腺上皮乳头状增生类疾病加以鉴别，如结节性甲状腺肿、嗜酸细胞型滤泡状肿瘤、甲状腺弥漫性乳头状增生和未经治疗的甲亢，这些疾病可出现乳头状结构，但往往是假性乳头，且细胞无明显异型性改变，可通过细胞印片加以鉴别。

通过以上分析，我们认为冰冻切片对甲状腺乳头状癌的组织结构和细胞学特征有大体认识，而细胞学印片主要是观察细胞结构，特别是细胞核的增大、核的异型，如核沟、核拥挤，染色质的分布凝聚呈毛玻璃样以及核浆比增大等特征为冷冻切片诊断起着重要的辅诊作用。该方法简便、迅速、准确性高，值得临床推广应用。但毕竟细胞印片中没有组织结构，无法观察其排列特征及浸润情况，可同时采用细胞印片法、冷冻切片组织学诊断两种方法结合应用，取长补短，对甲状腺乳头状癌明确诊断提供了保障。

[参考文献]

[1]马正中，阙秀，刘树范． 诊断细胞病理学[M]. 郑州：河南科学技术出版社，2000：705.

[2]Baloch ZW，Livolsi VA，Asa SL，et al. Diagnostic terminology and morphologic criteria for cytologic diagnosis of thyroid lesions：A synopsis of the national cancer institute thyroid fine-needle aspiration state of the science conference[J]. Diagn Cytopathol，2008，36（2）：425-437.

[3] Leopold G.Koss，Myron R，Melamed. Koss'' diagnostic cytology and its histopathologic bases[M]. Philadephia，USA：Lippincott williams & Wilkins，2006：1162-1164.

（收稿日期：2012-03-16）