牛奶中一株产酸克雷伯菌的检出

孟静 王锐

（1山东省产品质量监督检验研究院，济南250100）（2泰山医学院化工学院，泰安271016）

·食品分析·

牛奶中一株产酸克雷伯菌的检出

孟静1*王锐2

（1山东省产品质量监督检验研究院，济南250100）（2泰山医学院化工学院，泰安271016）

在市场销售的乳制品中检出一株产酸克雷伯菌，经试验该菌对青霉素有抗性。在已报道的产酸克雷伯菌中，大部分是在医院的临床病例，成品液态奶中检出该菌尚属首次。这一菌株的检出给乳制品中内酰胺酶的检测带来新的问题。

乳制品；产酸克雷伯菌；β-内酰胺酶

AbstractKlebsiella oxytoca were detected in diary products,and are resistant to penicillin.In the reported of Klebsiella example,the majority are clinical cases in the hospital,this is the first time that the bacteria was detected in liquid milk product.This brought new problems in the detection ofenzymes in diary.

KeywordsDairyproducts；klebsiella oxytoca；betalactamase

克雷伯菌属是革兰氏阴性杆菌，无芽胞、有荚膜，为机会致病菌，包括很多种，如肺炎克雷伯杆菌，产酸克雷伯菌，植物生克雷伯菌和土生克雷伯菌。克雷伯菌为呼吸道常居菌群，在人及动物肠道中亦常见，其中产酸克雷伯菌已被确认为病原菌，由该菌引起腹泻的报导甚少。目前对产酸克雷伯菌的研究主要集中于对抗生素的抗性研究上，我们在对市售牛奶进行检测的过程中，分离到了1株产酸克雷伯菌。

1 材料和方法

1.1 材料来源

液态奶均为市场随机购买，总计61个样品，其中包括酸牛乳11个，巴氏灭菌乳30个，高温灭菌乳10个，奶粉10个。

1.2 培养基及试剂

营养肉汤增菌液、肠杆菌增菌肉汤、营养琼脂平板及青霉素药敏纸片，购自北京陆桥技术有限责任公司；生化鉴定使用VITEK2C。

1.3 方法

称取液态奶25 g至在营养肉汤中，振荡混匀后36℃增菌18 h，无菌取1 mL转接于肠杆菌增菌肉汤中36℃18 h培养，用接种环分离划线于营养琼脂平板，倒置于培养箱中培养24 h。进行菌落形态和细胞形态观察。

2 结果和讨论

2.1 VITEK2C全自动致病菌鉴定仪对菌株的鉴定

将菌株在平板上纯化后，经革兰氏染色确定为G-杆菌，确定使用GN鉴定卡。经营养琼脂37℃，24 h富集后，用一次性接种环刮取菌苔，研磨于灭菌质量分数0.85%的生理盐水中，使菌液的OD为0.5左右，于VITEK 2C全自动致病菌鉴定仪上鉴定，观察56个生化反应，仪器数据库自动对结果进行分析，给出结果。共分离菌株21株，其中在巴氏灭菌乳中检出一例产酸克雷伯菌。

可见回收率在90.4%～109.5%之间，说明方法准确度较高。

表4 回收率测定结果

3 结论

实验表明，在上述实验条件下，用火焰原子吸收分光光度法测定大豆豆渣中镁的含量，所用方法简便、快速，准确，为进一步开发利用豆渣资源提供了依据。

［1］ANNERMARIE WAGNER，JOHAN M.D.SILVESTRE，M. J.et al.Copper，iron and zinc determinations in human milk usingFAAS with microwave digestion［J］.Food Chemistry，2000，68（1）：95-99.

［2］LAURENT NOEL，MICHAEL CARL，CHRISTELLE VASTEL，et al.Determination of sodium，potassium，calcium and magnesium content in milk products by FAAS［J］. International DairyJournal，2008，18（9）：899-904.

［3］黄晓东.火焰原子吸收法测定大豆渣中铁铜锰锌［J］.粮油食品科技，2004，12（3）：40-41.

［4］毛红，马腾蛟.火焰原子吸收法测定食品中镁分析方法的改进［J］.中国食品卫生杂志，2001，13（1）：23-25.

［5］黄晓东，颜玉琼.火焰原子吸收分光光度法测定大豆豆渣中锌的含量［J］.山西食品工业，2003（3）：36-38.

The detection ofklebsiella oxytoca in the milk products

MENGJing1*WANGRui21（Shandongsupervision and inspection institute for product quality，Jinan 250100，China）
2(School ofchemistryand chemical engineering，taishan medical university，Taian 271016，China)

*孟静，女，1979年出生，2006年毕业于山东大学，微生物专业，工程师。

2010-07-15