IL-6R mRNA水平与双相情感障碍主客观睡眠的相关性研究

[摘要]"目的"探讨双相情感障碍患者外周血中单核细胞白细胞介素-6受体mRNA（interleukin-6"receptor"mRNA，IL-6R"mRNA）水平与其主客观睡眠的相关性。方法"采用病例对照研究，选取绍兴市第七人民医院2022年6月至2023年6月精神科门诊确诊的25例双相情感障碍患者作为病例组，选取同期25名无精神疾病的门诊健康体检者作为对照组。采用匹兹堡睡眠质量指数量表（Pittsburgh"sleep"quality"index"scale，PSQI）、多导睡眠图（polysomnography，PSG）评估检测两组纳入者的睡眠质量，并分析与IL-6R"mRNA的相关性。结果"病例组患者的外周血IL-6R"mRNA与睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍、催眠药物使用情况、日间功能及PSQI总分均呈显著正相关（Plt;0.05），与睡眠总时间、睡眠效率、熟睡时间、快速动眼睡眠时间均呈负相关（Plt;0.01），与觉醒时间呈正相关关系（Plt;0.05）。结论"双相情感障碍患者外周血中单核细胞IL-6R"mRNA水平显著升高且与患者的主客观睡眠质量降低密切相关。

[关键词]"双相情感障碍；单核细胞；白细胞介素-6受体；睡眠质量；匹兹堡睡眠质量指数量表；多导睡眠图

[中图分类号]"R749.91""""""[文献标识码]"A""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.30.005

Correlation"study"of"IL-6R"mRNA"levels"and"subjective"and"objective"sleep"in"bipolar"disorder

PAN"Yourang，"FENG"Hong

Department"of"Psychiatry，"the"Seventh"People’s"Hospital"of"Shaoxing"City，"Shaoxing"312000，"Zhejiang，"China

[Abstract]"Objective"To"explore"the"correlation"between"the"levels"of"interleukin-6"receptor"mRNA"（IL-6R"mRNA）"in"peripheral"blood"of"patients"with"bipolar"disorder"and"their"subjective"and"objective"sleep"conditions."Methods"By"using"the"case-control"study，"25"cases"of"bipolar"disorder"patients"diagnosed"by"psychiatric"clinic"of"the"Seventh"People’s"Hospital"of"Shaoxing"City"from"June"2022"to"June"2023"were"selected"case"group，"25"volunteers"with"outpatient"health"examination"without"mental"illness"were"selected"as"control"group."Pittsburgh"sleep"quality"index"scale"（PSQI）"and"polysomnography"（PSG）"were"used"to"evaluate"the"sleep"quality"of"two"groups，"and"respectively"analyzed"the"correlation"with"the"IL-6R"mRNA"levels"of"case"group."Results"In"case"group，"the"peripheral"blood"IL-6R"mRNA"was"positively"correlated"with"sleep"quality，"time"to"fall"asleep，"sleep"time，"sleep"efficiency，"sleep"disorder，"use"of"hypnotic"drugs，"daytime"function"and"PSQI"total"score"（Plt;0.05），"and"total"sleep"time，"sleep"efficiency，"time"of"deep"sleep，"rapid"eye"movement"sleep"time"were"negatively"associated"（Plt;0.01），"and"the"peripheral"blood"IL-6R"mRNA"was"positively"associated"with"awakening"time"of"patients"（Plt;0.05）."Conclusion"The"level"of"IL-6R"mRNA"in"monocytes"in"peripheral"blood"of"patients"with"bipolar"disorder"significantly"increases，"and"is"closely"related"to"the"decrease"in"subjective"and"objective"sleep"quality"of"patients.

[Key"words]"Bipolar"disorder;"Monocytes;"Interleukin-6"receptor;"Sleep"quality;"Pittsburgh"sleep"quality"index"scale;"Polysomnography

双相情感障碍（bipolar"disorder，BPD）是一种以心境波动和活动水平紊乱为特征的复杂精神疾病，临床上常表现为抑郁和躁狂交替发作[1]。睡眠障碍不仅是BPD的常见症状，也是其病理生理机制的一部分，但其确切神经生物学机制尚不明确[2-3]。Ritter"等[4]研究指出BPD患者睡眠质量变化与外周单核细胞中编码白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）的mRNA表达升高有关。因此，IL-6"mRNA表达水平可作为BPD患者炎症状态和睡眠变化的潜在生物标志物。而IL-6受体（interleukin-6"receptor，IL-6R）通过结合IL-6发挥生物学效应，调节细胞的免疫反应和炎症过程。外周血中IL-6受体mRNA（interleukin-6"receptor"mRNA，IL-6R"mRNA）的表达量可能在精神障碍患者的炎症状态下发生变化，通过调节神经炎症影响睡眠质量。本研究旨在探讨BPD患者外周血中单核细胞IL-6R"mRNA水平与其主客观睡眠的相关性。

1""资料与方法

1.1""一般资料

采用病例对照研究，选取绍兴市第七人民医院2022年6月至2023年6月精神科门诊确诊的25例BPD患者作为病例组，选取同期25名无精神疾病的门诊健康体检者作为对照组。两组纳入者的一般资料比较，差异无统计学意义（Pgt;0.05），具有可比性，见表1。本研究经绍兴市第七人民医院医学伦理委员会审批通过（伦理审批号：2022-002-01）。

纳入标准：①BPD患者经绍兴市第七人民医院精神科主管医师依据简明国际神经精神访谈量表访谈后筛查，诊断标准参考《精神障碍诊断与统计手册》[5]中关于BPD标准。患者均为首次诊断或既往诊断但未接受相关药物治疗，如患者既往有相关治疗史则需经过至少１个月的药物清洗期，患者的抑郁病情评价参考汉密尔顿抑郁评定量表评分（Hamilton"depression"rating"scale，HDRS）-17[6]标准：HDRS-17评分≥20分，且临床总体印象量表严重性[7]评分≥４分；②年龄16～65岁；③首次发病，未用药；④本人及其家属于研究前均知情同意，并愿意接受研究方案中的检查。排除标准："①患者存在自杀倾向或行为；②处于哺乳期、妊娠或正在备孕期的妇女；③纳入研究前已接受相关药物治疗但不愿接受药物洗脱的患者；④同时伴有心、肝、肾疾病或其他严重疾病（如肿瘤、血液病、癫痫病史）患者；⑤言语及听力障碍者；⑥共病其他精神疾病，如精神分裂症；⑦患者存在吸毒、长期使用镇静镇痛药物、酗酒等。

1.2""指标检测

①标本采集：采集纳入者空腹静脉血5ml，在3500转/min的速度下离心15min，取其血浆，置于–80℃环境中待检。②提取外周血单个核细胞（peripheral"blood"mononuclear"cell，PBMC）mRNA：采用标准化的密度梯度离心法。首先将含有乙二胺四乙酸作为抗凝剂的血样与单核细胞缓冲液（含有0.5%牛血清白蛋白和2mmol/L乙二胺四乙酸的磷酸盐缓冲溶液）按1∶1的比例混合。然后从混合液中分离出约4×106个PBMC。随后使用Trizol试剂（赛默飞世尔科技公司）按说明书步骤从PBMC中提取总RNA。最后，将提取的RNA样品溶于75%乙醇中，并储存于–70℃的环境中备用。③合成cDNA：进行逆转录反应，使用Promega公司的逆转录试剂盒，按说明书步骤进行操作。首先，将1μg的RNA样本在70℃下加热10min；随后，依次向反应管中加入以下成分以达到20μl总反应体积：2μl"10×反应缓冲液、2μl"10mmol/L脱氧核糖核苷酸三磷酸（deoxynucleotide"triphosphate，dNTP）混合液、0.5μlRNA酶抑制剂、4μl"25mmol/L"MgCl2、0.6μl（15U）逆转录酶、1μg总RNA（2μl）、1μl"0.5μg寡聚核苷酸引物和7.9μl的无RNA酶水。之后的加热步骤：在95℃下加热5min，45℃下孵育60min，最后在4℃下冷却5min。完成的逆转录产物可直接用于聚合酶链式反应（polymerase"chain"reaction，PCR）扩增，或储存于–20℃环境中备用。④PCR扩增：进行PCR反应的25μl体系包括的成分：2.5U的Taq"DNA聚合酶（上海生物工程有限公司提供）、1μl"cDNA、0.5μl"10mmol/L的上游引物、0.5μl"10mmol/L的下游引物（上海生物工程有限公司合成）、2.5μl"10×PCR反应缓冲液、1.5μl"25mmol/L"MgCl2、0.5μl"dNTP（上海生物工程有限公司合成）和18.3μl"无RNA酶水。

β-肌动蛋白（β-actin）作为内部对照，各靶基因的PCR扩增反应条件及引物序列如下。①β-actin（180bp）：上游引物（正向引物）CAA"CTC"CAT"GAAG"TA"TAA"C，下游引物（反向引物）CCA"CAC"GGA"GTA"CTT"GCG"CTC。②IL-6R（309bp）：上游引物（正向引物）CAA"GCC"TCC"CAG"TGC"AAG"AT，下游引物（反向引物）ATT"GCT"GAT"GTC"ATA"AGG"GC。③TNFα受体（185bp）：上游引物（正向引物）CAA"GAG"CCT"GAG"TAG"GTG"GTT"TG，下游引物（反向引物）CTG"CTT"ATG"CAC"TAT"GAA"AAA"GG。

1.3""PSQI评估及多导睡眠图监测

匹兹堡睡眠质量指数量表（Pittsburgh"sleep"quality"index"scale，PSQI）[8]包含19个条目，涉及患者的睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍、催眠药物使用情况、日间功能7个评价因子，PSQI总分gt;7分为存在睡眠障碍。

多导睡眠图（polysomnography，PSG）监测[9]：将纳入者安置在安静舒适的病房环境中，室温维持在18～26℃。于检查当日下午安装电极，确保符合Rechtschaffen和Kales的睡眠记录标准。记录内容包括心电图、脑电图、肌电图、腿动、氧饱和度、口鼻气流、胸腹运动和体位等，从晚上睡觉前持续到次日早上8点。储存监测数据并采用Sandman"8.0睡眠分析软件进行回放和自动分析，随后进行人工核对。

1.4""统计学方法

采用SPSS"21.0统计学软件对数据进行处理分析。计量资料以均数±标准差（）表示，比较采用t检验；计数资料以例数（百分率）[n（%）]表示，比较采用c2检验；外周血IL-6R"mRNA与客观睡眠质量的相关性分析使用Pearson线性相关法。Plt;0.05为差异有统计学意义。

2""结果

2.1""两组纳入者的外周血中IL-6R"mRNA水平比较

研究结果显示病例组患者的外周血单核细胞中IL-6R"mRNA表达水平显著高于对照组（Plt;0.05），见图1。

2.2""两组纳入者的主观睡眠质量比较

经PSQI量表评价，病例组患者的睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍、催眠药物使用情况、日间功能7个评价因子及PSQI总分均高于对照组（Plt;0.001），见表2。

2.3nbsp;"两组纳入者的客观睡眠质量比较

经PSG检测，病例组患者的初入睡时间长于对照组，中途起床次数多于对照组（Plt;0.001）；病例组患者的睡眠总时间、睡眠效率、熟睡时间、快速动眼睡眠（rapid"eye"movement，REM）时间短于对照组（Plt;0.05），见表3。

2.4""病例组患者外周血IL-6R"mRNA与主观睡眠质量的相关性分析

线性相关分析显示病例组患者的IL-6R"mRNA水平与睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍、催眠药物使用情况、日间功能及PSQI总分均呈显著正相关（Plt;0.05），见表4。

2.5""病例组患者外周血IL-6R"mRNA与客观睡眠质量的相关性分析

相关性分析显示病例组患者外周血IL-6R"mRNA与睡眠总时间、睡眠效率、熟睡时间、REM睡眠时间均呈负相关（Plt;0.01）；外周血IL-6R"mRNA与患者的觉醒时间呈正相关（Plt;0.05），见表5。

3""讨论

睡眠问题在BPD的整个病程中普遍存在，无论是在抑郁发作、躁狂发作还是稳定期均可出现。这种睡眠障碍不仅给患者带来身体上的不适，还可影响心理健康，加重抑郁或焦虑症状，降低患者的生活质量[10]。因此，深入理解BPD患者睡眠障碍的病理机制对提高治疗效果和改善患者生活质量至关重要。孙莉等[11]研究通过对BPD患者的睡眠质量和IL-6"mRNA表达量的变化，间接证明BPD睡眠质量与IL-6R"mRNA水平之间的关系。

本研究通过PSQI量表和PSG监测发现，BPD患者的睡眠质量显著低于健康对照组。BPD患者的入睡时间更长，睡眠时间更短，且睡眠中断次数更多。BPD患者外周血单核细胞中IL-6R"mRNA的表达水平显著高于健康对照组，且与其睡眠质量呈显著正相关，即IL-6R"mRNA水平越高，睡眠质量越差。说明BPD患者的睡眠质量较差，而IL-6及其受体可能在BPD患者睡眠障碍的发生中发挥关键作用。由Manchanda等[12]和Zielinski等[13]进行的动物研究表明，长期缺乏睡眠可导致脑内微胶质细胞的活化，并增加炎症细胞因子的表达，提示慢性睡眠剥夺可能触发神经系统的炎症反应。具体来说，M1型小胶质细胞具备生成多种对神经具有毒性作用的细胞因子的能力，如IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α等，它们通过特定的受体和信号传递途径发挥炎症介质的作用。李华玉等[14]研究显示睡眠障碍的发生风险与促炎症细胞因子IL-1β和IL-6的表达水平升高有关联，这一发现与Tucker等[15]在宫颈癌患者中观察到的结果一致。宋利等[16]研究显示IL-1β和IL-6可激活下丘脑-垂体-肾上腺轴，进而改变动物和人类的睡眠-觉醒行为。Barreto等[17]研究发现，IL-6可影响5-羟色胺系统，刺激吲哚胺2，3-双加氧酶的活性，从而降低血清素的生成。血清素在大脑中发挥调节睡眠-觉醒节律的作用。因此，IL-6通过多种机制诱导生理性睡眠，有助于增加睡眠的持续时间和深度，从而巩固睡眠。然而，当BPD导致生理系统出现失衡时，睡眠和免疫系统的交互作用路径发生失调，导致睡眠模式的双向转变：低水平炎症可增加总睡眠时间和睡眠的连续性，而高水平的炎症则可能导致睡眠时间缩短，并引起睡眠碎片化。这可能是由于负反馈途径如促肾上腺皮质激素释放激素（corticotropin-releasing"hormone，CRH）-糖皮质激素轴上调导致：IL-6刺激CRH产生，而CRH有促进清醒的作用。此外，Bjurström等[18]在对类风湿关节炎患者的研究中观察到良好的睡眠维持和深度可中和夜间及早晨单核细胞产生的IL-6水平。这一发现揭示睡眠维持、慢波睡眠与炎症细胞因子之间存在的相互作用机制。炎症细胞因子在免疫反应中调控睡眠的同时，睡眠的深度和周期也对炎症细胞因子的分泌产生显著影响。

综上所述，BPD患者外周血中单核细胞IL-6R"mRNA水平显著升高且与患者的主客观睡眠质量降低密切相关。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。

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（收稿日期：2024–05–31）

（修回日期：2024–10–11）

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