血清MG53 水平与急性心肌梗死患者PCI 后发生心肌缺血再灌注损伤的相关性分析

姚家芳 李小旺

经皮冠状动脉（下称冠脉）介入治疗（percutaneous coronary intervention，PCI）是目前救治急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）较有效的方法之一，通过开通冠脉相关梗死部位，进而恢复血流灌注，改善心肌缺血症状，达到挽救患者生命的目的[1]。但部分患者缺血心肌恢复血流灌注后，可能出现心肌细胞能量代谢障碍、心肌细胞结构变化、心律失常、微血管内皮细胞损伤及功能障碍等现象，即心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury，MIRI），导致AMI 患者预后不良[2]。因此，如何早期预测和治疗MIRI 是临床关注和研究的焦点。目前临床主要根据心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I，cTnI）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isozymes，CK-MB）等生化指标等评估患者心肌功能状态，但各项生化指标主要应用于疾病的早期辅助诊断，受治疗及患者体内其他抗体影响，检测结果准确性不高。血清MG53 是多功能三结构域家族成员之一，主要表达于心脏和骨骼肌中，可维持细胞完整性、保持细胞正常功能形态[3]。孙叶海等[4]研究发现，缺血性心脏损伤可导致血中内缘性MG53 水平升高，血清MG53 水平预测急性ST 段抬高型心肌梗死患者预后不良具有较高的价值。可见，MG53 参与心脏的缺血预适应/后适应保护机制，但其在AMI 患者中的具体机制仍少见报道。为此，本研究通过分析AMI 患者PCI 治疗后血清MG53 水平，探讨其对MIRI 的检测价值，现将结果报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选择2021 年2 月至2023 年2 月湖州市第一人民医院收治的行PCI 治疗的AMI 患者142 例，其中男80 例，女62 例，年龄43～68（59.38±7.42）岁；体重指数（body mass index，BMI）20.8～26.5（23.1±2.3）kg/m2；梗死部位：前壁84 例，下壁58例；糖尿病53 例，高血压69 例；吸烟史75 例，饮酒史63 例。纳入标准：AMI 符合《急性冠脉综合征急诊快速诊疗指南（2019）》相关诊断标准[5]；符合PCI指征并拟行PCI；发病至入院治疗时间＜12 h。排除标准：陈旧性心肌梗死；既往行PCI；原发性心力衰竭、心肌炎、心脏瓣膜疾病、先天性心脏病等其他器质性心脏病；近期有手术史或创伤史；合并恶性肿瘤；合并自身免疫性、血液系统或传染性疾病；合并严重肝肾功能障碍。本研究经本院医学伦理委员会审查通过，患者或家属均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 药物治疗 两组患者入院后均行PCI，术前予患者口服负荷剂量的阿司匹林（规格：100 mg，批号：HJ20160684，德国拜耳医药保健公司）300 mg，负荷剂量的替格瑞洛（规格：90 mg，批号：H20193160，石药集团欧意药业有限公司）180 mg 或氯吡格雷（规格：75 mg，批号：H20193160，石药集团欧意药业有限公司）300 mg，阿托伐他汀钙片[规格：20 mg，批号：H20193144，齐鲁制药（海南）有限公司]口服20 mg，静脉注射肝素钠注射液（规格：2 mL/12 500 U，批号：H20033326，国药集团容生制药有限公司）100 U/kg。

1.2.2 PCI 治疗 采用桡动脉途径（若无法经桡动脉造影穿刺，则改为大腿根部股动脉进行），切口2～3 mm，从患者手腕桡动脉处插入导管，指引导管至待扩张冠脉口，在X 线下注射少量造影剂，直接观察冠脉狭窄情况，将相应大小球囊沿导引钢丝至狭窄部位予以适当压力进行扩张，扩张直至撑开血管腔，保持长时间血管通畅，放入支架，保持支架撑开状态。回撤器械，将支架留在病变血管内，以增加血供。

1.2.3 MIRI 诊断标准 患者PCI 后行心电图、超声心动图、冠脉造影等检查，MIRI 的诊断根据美国心脏病学会制定的相关标准[6]：（1）闭塞的冠脉血管再通后出现严重低血压、心动过缓或频发室性期前收缩；（2）经过药物治疗甚至电复律或电除颤治疗后，严重的室性心律失常仍存在；（3）冠脉造影显示术后冠脉前向血流分级（thrombolysis in myocardial infarction，TIMI）分级≤2 级，同时不合并血栓、痉挛或夹层等现象。对出现上述症状的患者则判定为MIRI患者，并纳入MIRI 组，其余患者纳入非MIRI 组。

1.2.4 血清MG53 及其他实验室指标检测 抽取患者PCI 后第1 天空腹静脉血3 mL，室温下3 000 r/min离心10 min，取上清液，置于-80 ℃冰箱保存。采用中国安图全自动化学发光免疫分析仪（AutoLumo6200）及美国LifeSpan BioScience Inc 公司生产的试剂盒，采用酶联免疫吸附法检测血清MG53 水平。采集患者PCI 后第1 天空腹静脉血6 mL，分装于装入带分离胶的促凝管和枸橼酸钠抗凝采血管中，取带分离胶的促凝管，3 000 r/min 离心10 min，取上清液，采用ARCHITECTi2000SR 全自动免疫分析仪及配套试剂盒检测cTnI 水平，采用免疫荧光法检测CK-MB 水平。另取枸橼酸钠抗凝采血管，1 500 r/min离心15 min，取血浆，采用酶联免疫吸附法检测D-二聚体（D-dimer，DD）水平。

1.3 统计学处理 采用SPSS 25.0 统计软件。符合正态分布的计量资料以表示，组间比较采用两独立样本t检验；计数资料以百分率表示，组间比较采用χ2检验；采用点二列相关性分析PCI 后血清MG53水平与AMI 患者PCI 后发生MIRI 的关系；绘制ROC 曲线，并计算AUC，评估血清MG53 水平对AMI 患者PCI 后发生MIRI 的检测价值，AUC 值＞0.9表示检测性能较高，0.7＜AUC≤0.9 表示有一定检测性能，0.5＜AUC≤0.7 表示检测性能较低，AUC≤0.5表示无检测性能。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 AMI 患者PCI 后MIRI 发生情况 142 例AMI患者PCI 后出现MIRI 61 例（MIRI 组），发生率为42.96%。

2.2 两组患者临床资料及血清指标比较 MIRI 组患者血清MG53 水平高于非MIRI 组，差异有统计学意义（P＜0.05）；两组其他指标比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。见表1。

表1 两组患者临床资料及血清指标比较

2.3 血清MG53 水平与AMI 患者PCI 后发生MIRI的相关性分析 经相关性分析，血清MG53 水平与AMI 患者PCI 后发生MIRI 呈正相关（r=0.386，P＜0.001）。

2.4 血清MG53 水平对AMI 患者PCI 后发生MIRI的检测价值 将AMI 患者PCI 后MIRI 发生情况作为因变量（发生MIRI=1，未发生MIRI 组=0），将血清MG53 水平作为自变量，绘制ROC 曲线，结果显示，血清MG53 水平对AMI 患者PCI 后发生MIRI的AUC＞0.7，具有一定检测价值，见表2、图1。

表2 血清MG53 水平对AMI 患者PCI 后发生MIRI 的检测价值

3 讨论

AMI 患者心肌缺血后，严重缺血部分心肌会相对休息，类似冬眠的状态[7]，此部分心肌细胞的代谢率较低，而在PCI 治疗后心肌重新恢复血供，冬眠状态的心肌细胞得到氧供，进入工作状态。而积蓄的代谢产物在短时间内产生大量的氧自由基，对其他正常细胞产生氧化损伤，进而发生MIRI，严重的可使患者出现心律失常，甚至猝死[8-9]。本研究中，142 例AMI 患者PCI 后有61 例患者出现MIRI，发生率为42.96%，略低于韩婷婷等[10]的研究结果，可能与样本量、个体差异等因素有关。但与此同时，本研究结果进一步证实了AMI 患者PCI 后MIRI 的发生风险较高，临床需予以重视。

细胞膜的自我修复是细胞膜破损后的一个重要生理过程，而研究证实，MG53 蛋白对损伤细胞膜具有修复作用，其对细胞膜的保护作用在心肌修复、心肌缺血预适应等生理和病理过程中得到证实[11]。本研究观察血清MG53 在AMI 患者PCI 后的表达情况，结果显示，PCI 后发生MIRI 的患者血清MG53水平明显高于未发生MIRI 的患者；经相关性分析，血清MG53 水平与AMI 患者PCI 后发生MIRI 呈正相关。研究发现，MG53 在心肌组织中存在两种内生机制，是心脏缺血预适应和缺血后适应保护所必需的，小鼠实验发现，重组人MG53 可减轻失血性休克引起的缺血再灌注细胞死亡和损伤，证实MG53 在机体中具有心肌保护作用[12]。同时MIRI 最常见的并发症是心律失常，而心律失常的主要表现为离子通道和电传导的异常[13-14]。MG53 介导维持心肌细胞的钾离子电流稳定，确保心肌细胞内动作电位图形的完整性，MG53 水平异常升高提示心肌细胞的钾离子电流功能失衡，提示心律失常的发生[15]。此外，MIRI 发生的一个重要途径是开放线粒体转换通道通透性增高，导致通道开放，进而促进凋亡蛋白从线粒体释放至胞浆中，最终导致细胞凋亡或坏死。而经研究证实，血清MG53 可与微囊蛋白3 形成复合物，形成的复合物与PI3K 的p85 亚基结合进而激活RISK 信号通路；此外，MG53 蛋白可提高Akt 磷酸化水平，血清MG53 水平升高，Akt 磷酸化水平升高，RISK 信号通路磷酸化修饰之后失去开放线粒体通透性转换通道功能，进而减少线粒体膜电位崩解和线粒体途径的细胞凋亡，发挥心肌保护作用[16-17]。提示MG53 蛋白可成为MIRI 的一个重要靶点，对MIRI 的防治具有重要意义。

本研究ROC 曲线分析结果显示，血清MG53 评估AMI 患者PCI 后发生MIRI 的AUC＞0.7，具有一定的检测价值。临床可通过检测血清MG53 水平评估AMI 患者PCI 后MIRI 发生风险，并及时采取措施降低患者PCI 后MIRI 发生率。

综上所述，AMI 患者PCI 后MIRI 发生率较高，血清MG53 水平与AMI 患者PCI 后发生MIRI 存在弱相关，且其对AMI 患者PCI 后发生MIRI 具有一定检测价值。但考虑到AMI 病因复杂，个体差异较大，用药剂量难以统一，可能影响血清检验结果；同时MIRI 发生机制复杂，包括缺血期引起的心肌超微结构、能量代谢、心功能和电生理等一系列损伤性变化，在血管再通后细胞内氧自由基的大量产生、钙离子超负荷、白细胞的炎症作用及高能磷酸化合物缺乏等诸多因素。故而后续还需积累样本量，分析血清MG53 与上述因素是否存在关系，以及控制上述因素进一步验证血清MG53 对AMI 患者PCI 后发生MIRI 的检测价值。