血清lncRNA MIAT、HMGB1水平变化与急性心源性脑梗死病情及预后的关系

江涛，许昕炜，姜加宏

兴化市中医院心内科，江苏兴化 225700

急性脑梗死又称急性缺血性脑卒中，其致死率和致残率极高，起病较急，患者常伴有语言和肢体障碍，严重时会导致昏迷不醒，甚至死亡［1］。与其他类型的脑梗死相比，心源性脑梗死起病更急，起病时间一般在数分钟内，患者既往多合并房颤等疾病，长期房颤会造成心房内附壁血栓形成，脱落后进入大脑大动脉，进而引起脑梗死［2］。早期寻找敏感度高的血清生物学指标，对于评估急性心源性脑梗死患者的病情程度及预后有重要参考价值，是早期治疗的关键和前提。长链非编码RNA 心肌梗死相关转录基因（lncRNA MIAT）可调控血管动脉粥样硬化过程，在心血管疾病的发生发展中发挥重要作用［3］。高迁移率族蛋白B1（HMGB1）通过与其受体的相互作用参与炎症反应，与心脑血管疾病的发生密切相关［4-5］。但lncRNA MIAT、HMGB1 与急性心源性脑梗死的关系鲜见报道。本研究观察了急性心源性脑梗死患者血清lncRNA MIAT、HMGB1水平变化，探讨其与病情严重程度及预后的关系。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 纳入标准：①符合急性脑梗死诊断标准［6］，均接受头颅磁共振检查证实存在梗死病灶；②急性起病，发病时间＜12 h；③有栓塞来源的心脏病病史，经磁共振、超声或CT 等检查证实且无大动脉病变；④入院后给予溶栓药物、抗凝药物、脑细胞活化剂等治疗。排除标准：①合并自身免疫系统疾病或恶性肿瘤；②哺乳期或妊娠期发生脑梗死；③既往有脑出血、脑外伤、脑梗死或其他严重心脑血管疾病病史。选择2020 年5 月—2022 年11 月我院收治并符合上述标准的急性心源性脑梗死患者122 例作为观察组，同期体检健康志愿者118 例作为对照组。观察组男54 例、女68 例，年龄（46.25 ± 7.56）岁，BMI（23.01 ± 3.08）kg/m2，吸烟史49 例、糖尿病史27 例、高血压史60 例，左心房增大（左心房横径＞35 mm）17 例，左心室射血分数（LVEF）＜50% 13 例，梗死面积：小/中面积梗死（梗死病灶直径≤4 cm）76 例、大面积梗死（梗死病灶直径＞4 cm）46 例，美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分［7］＜16 分81 例、≥16 分41 例。对照组男46 例、女72 例，年龄（45.56 ± 8.46）岁。两组性别、年龄均具有可比性（P均＞0.05）。本研究通过医院伦理委员会审核（2022-026），患者及家属均签署知情同意书。

1.2 血清HMGB1检测方法 采用ELISA法。两组入组后抽取肘静脉血3 mL，于室温静置30 min，以3 000 r/min 离心10 min，分离血清，-80 ℃超低温冰箱保存备用。采用ELISA 试剂盒检测血清HMGB1水平，严格按照试剂盒说明书操作。

1.3 血清lncRNA MIAT 检测方法 采用实时荧光定量PCR 法。取两组血清，提取总RNA，使用反转录试剂盒合成模板cDNA。lncRNA MIAT 引物序列：上游引物5'-CGATGCCTCGCAATGACGAC-3'、下游引物5'-CTCAGTACTGCGATACGCGTCG-3'，内参GAPDH 引物序列：上游引物5'-GCCTCGTGAGCGAGCGCGCA-3'、下游引物5'-CAGTAGACTACCGTCTGACAC-3'。PCR 反应体系：模板cDNA 2 µL，SYBR Green qPCR Master Mix 10 µL，上、下游引物各1 µL，ddH2O 补足至20 µL。循环结束后获取Ct 值，采用2-ΔΔCt法计算lncRNA MIAT 相对表达量。

1.4 预后评估方法 观察组出院后90 d 进行门诊复诊，根据mRS 量表［8］对预后进行评估，mRS 评分≥3 分定义为预后不良、mRS 评分＜3 分定义为预后良好。

1.5 统计学方法 采用SPSS25.0 统计软件。计量资料采用S-W正态性检验，呈正态分布以表示，两组间比较采用t检验；非正态分布以M（P25，P75）表示，两组间比较采用秩和检验。计数资料以n（%）表示，两组间比较采用χ2检验。急性心源性脑梗死患者血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平与病情程度的关系采用Spearman等级相关分析法。采用多元逐步回归分析患者预后不良的独立影响因素。绘制血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平预测急性心源性脑梗死患者预后不良的受试者工作特征（ROC）曲线，计算曲线下面积（AUC），分析其预测价值。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平比较观察组血清lncRNA MIAT、HMGB1水平均高于对照组（P均＜0.05）。见表1。

表1 两组血清lncRNA MIAT、HMGB1水平比较（）

表1 两组血清lncRNA MIAT、HMGB1水平比较（）

注：与对照组比较，*P＜0.05。

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2.2 不同梗死面积及NIHSS 评分的急性心源性脑梗死患者血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平比较 梗死面积为小/中面积、大面积的急性心源性脑梗死患者血清lncRNA MIAT 分别为1.62 ± 0.25、2.57 ±0.48，血清HMGB1水平分别为（6.78 ± 1.29）、（7.97 ±1.64）µg/L，二者比较P均＜0.05。NIHSS评分为＜16分、≥16 分的患者血清lncRNA MIAT 分别为1.78 ±0.34、2.38 ± 0.52，血清HMGB1 水平分别为（6.60 ±1.26）、（8.47 ± 1.50）µg/L，二者比较P均＜0.05。

2.3 急性心源性脑梗死患者血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平与梗死面积及NIHSS 评分的关系急性心源性脑梗死患者血清lncRNA MIAT 水平与梗死面积、NIHSS 评分均呈正相关关系（r分别为0.640、0.631，P均＜0.05），血清HMGB1 水平与梗死面积、NIHSS 评分均呈正相关关系（r分别为0.568、0.575，P均＜0.05）。见OSID码图1、2。

2.4 血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平对急性心源性脑梗死患者预后不良的影响 急性心源性脑梗死患者中预后良好90 例、预后不良32 例，其年龄分别为（55.42 ± 10.16）、（55.87 ± 11.03）岁，BMI分别为（23.08 ± 3.10）、（22.92 ± 3.07）kg/m2，二者比较P均＞0.05；其血清lncRNA MIAT 分别为（1.80 ±0.36）、（2.49 ± 0.56），血清HMGB1 分别为（6.68 ±1.24）、（8.77 ± 1.69）µg/L，二者比较P均＜0.05。二者男性、吸烟史、糖尿病史、高血压史、NIHSS评分构成比例比较差异均无统计学意义（P均＞0.05），预后不良者血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平及左心房增大、LVEF＜50%、大面积梗死的比例均高于预后良好者（P均＜0.05）；见表2。以急性心源性脑梗死患者是否预后不良（是 = 1；否 = 0）为因变量，以lncRNA MIAT（连续变量）、HMGB1（连续变量）、左心房增大（是 = 1；否 = 0）、LVEF＜50%（是 = 1；否 = 0）、梗死面积（大面积 = 1；小/中面积 = 0）为自变量行多元逐步回归分析，结果显示血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平升高及大面积梗死均是急性心源性脑梗死患者预后不良的独立危险因素（P均＜0.05）。见表3。

表2 不同预后的急性心源性脑梗死患者临床特征比较［例（%）］

表3 急性心源性脑梗死患者预后不良影响因素的多元逐步回归分析结果

2.5 血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平对急性心源性脑梗死患者预后不良的预测价值 血清lncRNA MIAT、HMGB1 单独及联合预测急性心源性脑梗死患者预后不良的AUC 分别为0.847、0.779、0.937，联合预测的AUC高于二者单独预测（P均＜0.05），见表4及OSID码图3。

表4 血清lncRNA MIAT、HMGB1单独及联合预测急性心源性脑梗死患者预后不良的ROC曲线分析结果

3 讨论

2019 年全球疾病负担研究表明，脑卒中是全球仅次于缺血性心脏病的第二大死亡原因，是致死和致残的第三大原因（占总残疾调整寿命的5.7%），其中脑梗死占脑卒中的62.4%［9］。心源性脑梗死也称为心源性栓塞性脑梗死，占所有脑梗死的20%～30%。心源性脑梗死是一种临床综合征，病因是来自心脏的栓塞通过循环系统，导致脑动脉栓塞和相应的脑功能障碍［10］。

lncRNA 被定义为长度超过200 个核苷酸的非蛋白编码转录物，其中lncRNA MIAT 是一种与心脏肥大、糖尿病心肌病和心脏纤维化等心脏疾病相关的lncRNA［11-13］。lncRNA MIAT 不仅在微血管疾病中发挥关键作用，还在颈动脉狭窄和脑梗死等大血管疾病发病中具有关键作用［14-15］。HMGB1 是一种非组蛋白和高迁移率DNA 结合蛋白，其作为核因子发挥作用，增强基因转录并调节DNA 修复和染色质重塑［16-17］。既往研究表明，HMGB1 参与了血管炎症、血栓形成等病理过程［18］。本研究结果显示，观察组血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平均高于对照组，大面积梗死、NIHSS 评分为≥16 分的患者血清lncRNA MIAT、HMGB1 均低于小/中面积梗死、NIHSS 评分＜16 分者，预后不良患者的血清lncRNA MIAT、HMGB1水平高于预后良好者；这提示急性心源性脑梗死患者血清lncRNA MIAT、HMGB1 均升高，且与病情严重程度及不良预后有关。本研究多元逐步回归分析结果显示，血清lncRNA MIAT、HMGB1 升高及大面积梗死是急性心源性脑梗死预后不良的独立危险因素。因此，以上因素需引起临床医护人员的重视。ROC 曲线分析结果进一步显示，血清lncRNA MIAT、HMGB1 联合检测对急性心源性脑梗死预后的预测效能更高，其敏感度和特异度分别为86.7%、80.0%，可作为预后评估的重要参考指标。

基于既往研究，推测在急性心源性脑梗死的发病初期，患者体内炎症因子水平急剧升高，炎症及其他病理因素使得血清lncRNA MIAT 水平升高，心脏斑块失去稳定性而出现血栓栓塞，血栓栓塞经过循环系统造成脑功能障碍，从而促进疾病进展，推动预后不良结局发生。此外，GUO 等［19］研究显示，lncRNA MIAT 可通过上调下游基因表达，促进脑梗死中神经细胞自噬和凋亡，推测其可能是lncRNA MIAT 推动急性心源性脑梗死病情进展及不良预后的另一机制。此外，ZHU 等［20］研究显示，lncRNA MIAT/HMGB1 轴通过激活相关通路参与鼻咽癌的顺铂耐药性，该过程中升高的lncRNA MIAT 水平调控HMGB1 表达上调。DENG 等［21］研究证实，lncRNA MIAT 通过调节HMGB1、海绵状微小RNA-204-5p等，参与脑缺血后的脑微血管内皮细胞损伤。基于既往研究中lncRNA MIAT、HMGB1间的调控关系推测，血清lncRNA MIAT 水平升高后，HMGB1 表达上调，使得急性心源性脑梗死患者炎症刺激时间延长，血管炎症加重，从而促进疾病进展。

综上所述，急性心源性脑梗死患者血清lncRNA MIAT、HMGB1 水平均升高，且与患者的病情严重程度有关，二者联合检测有助于预测患者预后，有望成为评估急性心源性脑梗死患者病情严重程度及预后的分子标志物。但本研究病例数不多，统计结果可能存在一定偏倚，有待今后大样本研究进行验证。