硼替佐米对多发性骨髓瘤合并前列腺癌患者T淋巴细胞亚群分布、骨代谢及DU145和PC-3表达的影响

钱杭丹 方国华 娄漓江

前列腺癌是老年常见疾病，是男性最常见肿瘤之一。前列腺癌晚期多可转移至淋巴结、骨和肺。多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是一种常见的血液肿瘤，多认为与免疫系统问题、病毒感染等原因有关[1～3]。患者主要临床症状为免疫功能降低、骨髓破坏等症状[4,5]。目前针对MM 合并前列腺癌尚无特效治疗药物，主要治疗是造血干细胞移植治疗和化疗等。据临床统计显示，MM 的完全缓解率仅3%～10%[6～8]，严重影响患者的生存质量和生命安全。寻求更为有效的药物治疗对临床具有重要指导意义。本次研究探讨硼替佐米对MM 合并前列腺癌患者T 淋巴细胞亚群分布、骨代谢及DU145 和PC-3 表达的影响，为临床提供借鉴参考。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年9 月至2020年9 月萧山区中医医院收治的MM合并前列腺癌患者110 例为本次研究对象，纳入标准为：符合《中国多发性骨髓瘤诊治指南（2015 年修订）》对MM 的诊断标准[9]，预计生存周期＞3 个月，卡氏评分＞70 分。排除标准差：①精神异常或无法正常沟通、不能配合完成本次研究的患者；②合并严重的肝肾功能异常、凝血功能障碍的患者；③合并有严重感染、免疫系统其他疾病的患者；④妊娠期或哺乳期、伴有糖尿病、肾功能损伤、肾炎等疾病的患者；⑤对本研究涉及到的药物不耐受、使用禁忌证或存在过敏史的患者。剔除临床病历资料不全、中途转院或退出研究、随访失联、治疗期间死亡、不愿接受本研究的脱落病例。本次研究经本院伦理委员会审核批准。所有患者及家属均知情本研究并签署同意书。按照患者采用的治疗方式分为观察组和对照组，每组55 例。对照组年龄50～68 岁，平均年龄（57.67±4.43）岁，国际ISS 分期：Ⅰ期8 例、Ⅱ期21 例、Ⅲ期34 例；免疫分型：IgA 型14 例、IgG 型21 例、IgD 型4 例、轻链型13 例、非分泌型3 例；观察组年龄50～68 岁，平均年龄（58.25±4.38）岁，国际ISS分期：Ⅰ期10 例、Ⅱ期22 例、Ⅲ期33 例；免疫分型：IgA 型13 例、IgG 型22 例、IgD 型3 例、轻链型14 例、非分泌型3 例。两组患者一般资料比较，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。

1.2 方法 两组患者均给予常规对症治疗。对照组患者在每个治疗周期的前3 d 内给予静脉滴注300 mg/m2的环磷酰胺（由山西普德药业股份有限公司生产）；治疗周期内每天给予沙利度胺（由常州制药厂有限公司生产）100 mg/d，晚饭后口服；第1 天、2 天、4 天、5 天、8 天、9 天、11 天、12 天给予地塞米松（由上海北杰集团关东药业有限公司生产）40 mg，静脉滴注。观察组患者环磷酰胺及地塞米松使用同对照组，并于治疗的第1 天、4 天、8 天、11 天给予硼替佐米（由西安杨森制药有限公司生产）1.3 mg/m2，若患者出现3 级以上非血液学毒性反应时治疗推迟；症状缓解后硼替佐米剂量减少25%，重新开始治疗；当患者出现2 级周围神经病变或1 级病变伴疼痛时，硼替佐米用量减至1.0 mg/m2，重新开始治疗[10]。两组患者均以21 d 为一个治疗周期。治疗4～8个疗程，随访6个月。

1.3 观察指标

1.3.1 参照《血液病诊断及治疗标准》[11]进行疗效评价。完全缓解/接近完全缓解（complete remission，CR）：临床症状完全或几乎消失、骨髓中浆细胞＜5%；部分缓解（partial respond，PR）：患者临床症状有效改善，血清M 蛋白降低程度≥50%；疾病稳定（stable disease，SD）：临床症状有所好转，血清M 蛋白降低程度≥25%；病情进展（progressive disease，PD）：患者临床症状无变化，血清M 蛋白降低程度＜25%。治疗有效率=（CR＋PR）/总患者数×100%。

1.3.2 采用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群分布情况，包括CD4+、CD8+、CD4+/CD8+。

1.3.3 观察两组患者的不良反应发生情况。

1.3.4 于治疗前和治疗后进行生化指标检测，指标包括：检测M蛋白含量、骨髓细胞含量、β2微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）和血红蛋白（hemoglobin，Hb）水平。

1.3.5 采用视觉模拟评分法（visual analogue scale，VAS）[12]评估疼痛评分，评分越高则疼痛越严重。

1.3.6 采用超声骨密度检测仪测量腰椎、股骨颈、全肩宽骨密度（bone mineral density，BMD）。

1.3.7 用含10%胎牛血清的RPMI 1640 培养基培养DU145细胞，用含10%胎牛血清的F-12K培养基培养PC-3 细胞，培养基中均含100 U/ml 青霉素和链霉素，于37 ℃、5% CO2饱和湿度的培养箱中培养。采用CCK-8 法检测前列腺癌细胞的存活率。

1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0数据处理软件进行统计学分析。计量资料以均数±标准差（）表示，采用t检验；计数资料采用例（%）表示，采用χ2检验。设P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗有效率比较见表1

表1 两组患者治疗有效率比较

由表1 可见，观察组治疗有效率明显高于对照组，差异有统计学意义（χ2=4.29，P＜0.05）。

2.2 两组患者T淋巴细胞亚群分布比较见表2

表2 两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群分布比较

由表2可见，治疗前两组CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比较，差异均无统计学意义（t分别=0.68、0.61、0.25，P均＞0.05），治疗后观察组的CD4+、CD4+/CD8+值高于对照组，CD8+表达水平低于对照组（t分别=3.94、4.29、3.99，P均＜0.05）。

2.3 两组患者不良反应情况比较见表3

表3 两组患者不良反应情况比较

由表3 可见，两组患者均未发生严重的不良反应事件，对症治疗后均解决。两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（χ2=1.00，P＞0.05）。

2.4 两组治疗前后生化指标比较见表4

表4 两组治疗前后M蛋白含量、骨髓细胞含量、β2-MG及Hb水平比较

由表4可见，两组患者治疗前M蛋白含量、骨髓细胞含量、β2-MG、Hb比较，差异均无统计学意义（t分别=0.06、0.38、0.00、0.42，P均＞0.05）；治疗后，观察组M 蛋白含量、骨髓细胞含量、β2-MG 均低于对照组，Hb高于对照组，差异均有统计学意义（t分别=5.02、9.73、11.73、7.46，P均＜0.05）。

2.5 两组骨痛评分比较 治疗前观察组骨痛评分（8.02±1.31）分，对照组（8.00±1.37）分，两组比较，差异无统计学意义（t=0.08，P＞0.05）；治疗后观察组骨痛评分（3.13±0.88）分，明显低于对照组（5.35±1.04）分，差异有统计学意义（t=12.08，P＜0.05）。

2.6 两组腰椎、股骨颈、全髋BMD比较见表5

表5 两组腰椎、股骨颈、全髋BMD比较/g/cm3

由表5 可见，治疗前两组腰椎、股骨颈、全髋BMD比较，差异均无统计学意义（t分别=0.47、0.53、0.49，P均＞0.05）；治疗后，观察组腰椎、股骨颈、全髋BMD 高于对照组，差异均有统计学意义（t分别=6.29、6.65、6.79，P均＜0.05）。

2.7 DU145 和PC-3 细胞增殖 硼替佐米对DU145和PC-3 细胞增殖均有显著效果。观察组DU145 细胞（29.10 μmol/L）和PC-3 细胞（28.91 μmol/L）均高于对照组（12.53 μmol/L、13.88 μmol/L），差异均有统计学意义（t分别=3.98、7.10，P均＜0.05）。

3 讨论

前列腺癌最常见的就是骨转移，如果前列腺癌并发多处骨转移，这可能就是晚期前列腺癌。MM是目前临床中难治愈的浆细胞恶性增殖性疾病，多数患者伴有单克隆免疫球蛋白分泌，临床常见IgA型、IgG 型、IgD 型、轻链型、IgM 型、IgE 形、双克隆型及非分泌型等[13]。患者预后情况个体差异性较大，与机体免疫功能等有关。病情进展至此，患者可能失去了手术治疗的机会，这种情况建议可以用内分泌治疗、放疗、化疗等方法治疗，结合自身病情选择治疗措施[14,15]。

硼替佐米是人工合成的可逆性蛋白酶体抑制剂，通过结合泛素蛋白酶体系统点的方式抑制泛素-蛋白酶体途径上目标蛋白发挥作用；还可通过抑制核因子κB 的活化，加速骨髓瘤细胞的凋亡，调节细胞正常周期；并可通过降低癌细胞DNA修复能力的方式降低骨髓瘤细胞对化疗药的耐药性等作用[12,16]。相关研究发现硼替佐米联合其他抗骨髓瘤药物能够将一定的协同作用发挥出来，并且不会增加不良反应情况[17,18]，本研究结果也验证了这一点，对照组患者治疗有效率明显低于观察组（P＜0.05）。由于MM 的特殊发病机制，患者骨功能和免疫功能常遭到严重的破坏，且患者的不良预后情况多由免疫因子的异常表达和免疫功能的失常导致[19]。环磷酰胺是一种细胞周期非特异性药物和功能烷化剂，可有效对MM 细胞进行杀伤，还可以通过抑制特异性抗原刺激淋巴细胞的母细胞转化和调控补体活性，改变机体免疫耐受或免疫低下的状态[20]。结合本研究结果来看，两组患者的免疫功能均不同程度提高，且观察组治疗后M 蛋白含量、骨髓细胞含量、β2-MG明显低于对照组，Hb水平明显高于对照组（P＜0.05），说明联合治疗方案可明显改善患者的免疫功能，这是因为将环磷酰胺、地塞米松与硼替佐米联合，可进一步抑制肿瘤细胞介导的免疫反应，阻碍免疫球蛋白与肿瘤细胞表面抗体结合，从而改善患者机体免疫指标，提高机体免疫力。治疗后，观察组骨痛评分明显低于对照组，腰椎、股骨颈、全髋BMD高于同期对照组（P＜0.05），说明出现骨转移后首先要对原发病进行有效的治疗，硼替佐米可以抑制MM 合并前列腺癌的进展，从而减少骨痛的发生，避免病理性骨折。观察组DU145细胞和PC-3 细胞均高于对照组（P＜0.05），说明硼替佐米对DU145 和PC-3 细胞增殖均有显著效果，这可能是由于硼替佐米可隔绝泛素蛋白酶体，阻碍多种调节蛋白降解，从而阻碍肿瘤细胞增殖，促进肿瘤细胞凋亡。同时，硼替佐米对血管内皮细胞、肿瘤血管具有抑制作用，能够阻碍肿瘤细胞转移及黏附，影响肿瘤细胞血液供应，诱导肿瘤细胞凋亡。

综上所述，环磷酰胺联合硼替佐米及地塞米松对MM 合并前列腺癌患者临床疗效更好，抑制前列腺癌细胞DU145和PC-3增殖，副作用可控，能有效改善患者免疫功能。