一种有助于缓解干眼症固体饮料的研究开发

◎ 尹融昕，游 燕，李桦军，罗 玉，于雅静，余汪平

（1.云南省药物研究所，云南 昆明 650111；2.云南白药集团创新研发中心，云南 昆明 650111；3.云南省中药和民族药新药创制企业重点实验室，云南 昆明 650111）

角结膜干燥症，又称干眼症，是生活中比较常见的一类眼表疾病，影响人们的视觉，降低生活质量[1]。引发干眼症的因素大不相同，如上班族长期使用电子用品、近视者长期佩戴隐形眼镜、受过眼部损伤和做过眼部手术等[2-4]。全球干眼症发病率为13%～33%，我国发病率为21%～30%，其中糖尿病患者患干眼症的概率远高于正常人，一般发病率为47%～64%[5-7]。

眼部护理功能食品开发中主要添加的天然成分有叶黄素、胡萝卜素、玉米黄质以及药食同源原料，如枸杞子、菊花[8-10]，部分产品添加具有抗氧化作用的天然提取物，如沙棘、越橘等[11-12]。药智网查询结果显示，有319 条具有缓解视疲劳功能的保健食品的注册信息，主要由植物提取物、保健食品原料、维生素等组成，如越橘提取物、蓝莓提取物、葡萄籽提取物、枸杞子、菊花、决明子、叶黄素、β-胡萝卜素、维生素A、牛磺酸和鱼油等。

根据中医药材功能和辨证施治原则，干眼症固体饮料主要功效为养阴生津、滋补肝肾，以解决干眼问题[13-15]。治疗干眼症的药物可划归为补阴药类，此类药物药性甘、寒，归肝、肾经[16-17]。按中医理论组方，通过调节阴虚、肝肾不足的体质，达到缓解视疲劳和干眼症、润养与保护眼睛的作用，适用于长时间使用电子产品的人群[18-19]。本产品配方为覆盆子、枸杞子、决明子、菊花、石斛、茯苓、山药和玫瑰花，此方由古方石斛夜光丸化裁而来，配方中药均为药食同源药材，安全有效[20-21]。根据石斛夜光丸各组分的功效作用，化裁本方组方及用量，详见表1[22]。人们对美好生活的需要日益增长，对眼健康的关注度也在加速增长，研发针对干眼症的功能食品意义重大，产品具有较广阔的市场前景[23]。

表1 方解及各药味归经功能、用量表

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

覆盆子，亳州市肥猫药业有限公司；枸杞子、决明子、山药、石斛（干）、茯苓、菊花和玫瑰花，云南白药集团中药资源有限公司；赤藓糖醇，保龄宝生物股份有限公司；罗汉果甜苷、甜菊糖苷，诸城市浩天药业有限公司；维生素C，浙江一诺生物科技有限公司；果粉（百香果果粉、猕猴桃果粉、芒果果粉、菠萝果粉、葡萄果粉、草莓果粉、蓝莓果粉和蔓越莓果粉），拓丰粉体技术（昆山）有限公司；纯化水。

1.2 仪器与设备

JJ1000 双杰电子称，常熟市双杰测试仪器厂；药材提取锅，潮汕市湖安区金石镇钢龙五金制品厂；JY-009-C 低速大容量多管离心机，上海安亭科学仪器厂；JY-027-C 旋转蒸发仪，上海爱郎仪器有限公司；JY-008-B 真空干燥箱，上海一恒科学仪器有限公司；JY-048-C 电磁炉，中山市真捷电器有限公司；MB-FD30H 电饭煲，广东美的生活电器制造有限公司；JY-006-B 电热鼓风干燥箱，上海一恒科学仪器有限公司；电DM-300S 子密度计，厦门市弗布斯检测设备有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 提取方法的优化和提取液固含量测定

（1）不同提取条件对药材提取率的影响。使用控制变量法探究不同提取时间、提取次数、液料比对提取率的影响，选取提取时间为1 h、2 h、3 h、4 h 和5 h，液料比（v∶m）选取4 倍、6 倍、8 倍、10 倍、12 倍5 个梯度，提取次数为1 次、2 次、3 次，分别考察不同条件下配方药材的提取率，得到最佳提取方法。

（2）干眼症提取液固含量的测定。在1.3.1（1）的最佳提取条件下，采用煎煮法提取，按照基础配方的10 倍量称取原料，将原料置于容器中，加入原料总重8 倍的纯化水浸泡20 ～30 min，加盖放电磁炉上加热煎煮，沸腾后计时2 h，重复以上操作，二次操作煮沸1 h，合并滤液。将滤液浓缩至比重为1.20 g·g-1，加入95%乙醇，醇沉时长＞8 h，离心、除醇，将滤液浓缩至比重为1.20 g·g-1，得到干眼症提取液。使用干燥法计算干燥物固含量，取平行测定的算数平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对值差不大于0.30%。

1.3.2 口感优化

（1）甜味剂、提取物使用量、矫味剂的选择。选取赤藓糖醇、罗汉果糖苷、甜菊糖苷、木糖醇、三氯蔗糖以及复配甜味剂（赤藓糖醇、罗汉果糖苷、甜菊糖苷）作为本产品的甜味剂，产品单个包装净含量为6 g，以白砂糖为100%甜度，按照各原料的甜度添加赤藓糖醇3 g、罗汉果甜苷0.02 g、甜菊糖苷0.02 g、木糖醇2 g、三氯蔗糖0.01 g 和复配甜味剂（赤藓糖醇1.28 g、罗汉果甜苷0.01 g、甜菊糖苷0.01 g），200 mL 温水冲泡，考虑到甜度及口感1 ～10 分盲评打分。优化药方提取物使用量，分别称取0.5 g、1.0 g、1.5 g 和2.0 g 的提取物，配制样品，200 mL 温水冲泡，对口感1 ～10 分评分。提取物具有明显的中药味，为改善口味，用水果粉作为矫味剂调整口感，在最优甜味剂的基础上，称取百香果果粉、猕猴桃果粉、芒果果粉、菠萝果粉、葡萄果粉、草莓果粉、蓝莓果粉和蔓越莓果粉各3.5 g，制成小样，200 mL 温水冲泡，志愿者对口感1 ～10 分评分。评分标准见表2。

表2 有助于缓解干眼症固体饮料口感及甜度评价表

（2）冲泡方式的选择。在单因素优化完成后，优化最优配方冲泡方式，分别取50 mL、100 mL、200 mL、300 mL 和400 mL 温水冲泡，对口感评分。

1.3.3 药效实验

通过人体试吃测试干眼症食品的药效。从本单位各部门成员中选取自愿试吃者作为志愿者，共93 例。筛选项目为佩戴隐形眼镜时长或已行角膜屈光手术时长；每天平均用眼药次数及时间；晚上睡眠质量情况；鼻子、嘴巴、喉咙、皮肤和生殖器等部位是否觉得干燥；在抽烟环境、油烟环境、空气污染环境、粉尘环境、空调环境和暖气下眼睛是否敏感；是否长期服用抗过敏药、利尿药、降压药、安眠药、精神病类用药、避孕药和更年期治疗用药。

入组90 例干眼症受试者，男性41 人，女性49 人，平均年龄34.8 岁，随机分成实验组低剂量组（30 人）、实验组高剂量组（30 人）、阳性对照组（30 人），实验组为干眼症食品，对照组为仁和蓝莓叶黄素压片糖果。低剂量组受试者一次1 袋，一天1 次，热水冲泡，服用14 d；高剂量组受试者一次2 袋，一天1 次，热水冲泡，服用14 d；阳性对照组受试者一次2 片，一天1 次，咀嚼或含服，服用14 d。对眼部症状、全身症状、中医症状进行功效评价。

2 结果与分析

2.1 提取方法的优化和提取液固含量测定

随着提取时间、提取次数、液料比的增加，提取率逐渐增加。在不考虑生产成本、能源损耗的情况下，提取次数越多、液料比越大、提取时间越久，提取效果越好。根据实际生产需要，对比不同条件下的提取率，最大提取率偏差小于1%。考虑到减少工艺复杂程度和减少能源、物料损耗等实际生产成本，综合3 项参数，维持提取率18%～20%，工艺条件确定为提取次数为2次，总提取时间为3 h，提取液料比为8倍，结果见图1。

图1 不同提取时间、提取次数、液料比对提取率的影响图

2.2 口感的优化

2.2.1 甜味剂、提取物使用量、矫味剂的选择。

由图2（a）可知，中药材配方提取物在较低添加量时，口感较好。随着提取物添加量的增加，超过1.0 g/袋时，口感评分呈快速降低趋势，提取物添加量的增加会使其在产品配方体系中占比越来越大，在冲泡过程中会出现提取物口感遮蔽其他原料口味的现象，导致整体口感层次感降低。因此，选取1.0 g作为最佳提取物添加量。

图2 不同配比提取物比例、甜味剂、矫味剂的优化图

由图2（b）可知，在甜味剂的实验中，三氯蔗糖甜度最高，其次是复配甜味剂，木糖醇排第3。在口感评分中，最佳甜味剂为复配甜味剂，其次为三氯蔗糖。复配甜味剂和三氯蔗糖甜度高，口味更接近白砂糖，因此口感和甜度的评分更高。在实验中木糖醇和赤藓糖醇的甜度低导致酸甜失调，因此口感和甜度评分不高，赤藓糖醇和木糖醇甜度分别为蔗糖的60%～80%、90%～110%，在6 g/袋的产品中，中药提取物味道过于浓郁，赤藓糖醇和木糖醇不能遮蔽提取物带入的味道，且整体用量约是其他代糖的200 倍，用量过大，影响其他成分的添加。甜菊糖苷和罗汉果糖苷天然风味较大，有后苦味和特殊腥味等异味，不被接受，导致评分较低。综合口感和甜度评分，最终选取复配甜味剂作为最佳甜味剂。

由图2（c）可知，在添加果粉调整口味的实验中，芒果果粉、菠萝果粉评价较差，这2 种果粉在本实验条件下冲泡后出现浑浊的现象，口感的层次感不明显，可能是果粉制备工艺与其他果粉差异较大。百香果、猕猴桃、葡萄、蓝莓、草莓和蔓越莓果粉，整体口感相差不大，果味浓郁，冲泡后液体澄清，均可作为本产品的调味剂使用。考虑到本产品的适应人群和其工作场景，选定百香果果粉作为矫味剂，能缓解眼干、眼涩，风味独特，口感刺激，香气突出，有提神醒脑功效。

2.2.2 不同冲泡方式对口感的影响

由图3 可知，随着冲泡体积的增大，产品口感评分先增加后降低，200 mL 达到最佳。低冲泡体积的产品浓度较大，百香果果粉在低溶剂条件下酸度呈几何倍数增加，消费者很难接受。冲泡体积超过200 mL 后，体系增大，酸度降低，甜味、果汁风味同步降低，冲泡后口感寡淡。综合实验数据，冲泡体积选取200 mL。

图3 不同冲泡方式对口感的影响图

2.3 药效实验结果

2.3.1 人体试吃实验统计学分析

通过人体试吃实验，对志愿者眼部症状、全身症状、中医症状进行打分评价，运用统计学方法进行分析。

（1）全身症状改善情况分析结果。表3 显示全身症状改善情况组内对照中，高剂量组显著改善了全身症状；表4 显示组间改善情况对比无差异，但与对照组和低剂量组相比，高剂量组对全身症状具有一定的改善作用。

表4 全身症状改善情况组间对照表

（2）眼部症状改善情况分析结果。表5 显示眼部症状改善情况组内对照中，3 个组均对眼部症状具有显著改善效果；表6 显示组间改善情况对比均无显著差异，但与对照组和低剂量组相比，高剂量组对眼部症状具有一定的改善作用。

表5 眼部症状改善情况组内对照表

表6 眼部症状改善情况组间对照表

（3）中医症状改善情况分析结果。表7 显示中医症状改善情况组内对照中，3 个组均对中医症状具有显著改善效果；表8 显示组间改善情况对比均无显著差异，但与低剂量组相比，高剂量组对中医症状具有一定的改善作用。

表7 中医症状改善情况组内对照表

表8 中医症状改善情况组间对照表

2.3.2 志愿者对产品功效的评价

由表9 可知，受试者对干眼症食品的功效评价整体有效率为40%，低剂量比高剂量效果较好。对照组缓解干眼症有疗效的反馈例数为6 例；低剂量组对缓解干眼症有疗效的反馈例数为14 例；高剂量组对缓解干眼症有疗效的反馈例数为10 例。

表9 本产品功效评价表

3 结论与讨论

综上所述，全身症状、眼部症状、中医症状组内对照3 个组均具有显著改善效果，组间改善情况对比均无显著差异，但与低剂量组相比，高剂量组具有一定的改善作用。40%的志愿者受试结果显示本产品对干眼症具有较好的缓解作用。

人体试吃实验中受试者对干眼症食品的功效评价整体有效率为40%，本品的药食同源提取物使用量为1 g，提取率约为18%，服用量未满足整体人群的需求，存在人体差异，导致功效评价整体上有效率为40%。其他研究[24-25]表明中药制剂对干眼症有较好的治疗作用；魏界城[26]的研究表明使用滋阴补肾汤治疗干眼症，可有效改善患者的临床状态，口服组的有效率为54.84%；马芬俞等[27]的研究表明滋阴补肾方可有效治疗干眼症；赵卫娜[28]研究表明玻璃酸钠滴眼液辅以加味沙参麦冬汤治疗干眼症，治疗有效率为89.06%；罗丹等[29]在采用人工泪液治疗的基础上，根据情况施以养阴清肺汤、丹栀逍遥散、杞菊地黄丸和生脉散合杞菊地黄丸等中药制剂治疗干眼症，有效率为71.43%，远高于仅用人工泪液组；武丹蕾等[30]以滋阴养血法治疗血虚型干眼症，有效率达89.4%。虽然本研究的有效率仅为40%，但考虑到其为食品干预，需要兼顾口感，该有效率可接受。在本研究中，低剂量相对于高剂量效果较好，可能因为计量梯度差较大，未能有效体现有效剂量，其次因为本品的口味为百香果味，酸味较高，高剂量组服用浓度较大，受试者难以接受，从而影响整体评价。此外，考虑到该产品为普通食品，需要按工厂实际情况落地，不需要精细的数据，故该实验没有进行正交实验或响应面实验。

随着社会的发展，干眼症已经成为困扰人们生活的重要不良因素。本品对古方石斛夜光丸进行创新性改良，使用其中的药食同源药材重新组方，可调节阴虚、肝肾不足的体质，具有缓解视疲劳和干眼症、润养和保护眼睛的作用，适用于长时间接触电子产品的人群，属于中医药的创新性使用。