桂花多糖的提取工艺、测定及药理活性研究进展

◎ 李 泳，姚 春，廖 娜

（咸宁市公共检验检测中心，湖北 咸宁 437000）

桂花，又称木犀、九里香、岩桂、月桂等，是木犀科（Oleaceae）木犀属（Osmanthus）植物，多分布于我国的湖北、广西、贵州、江苏、浙江、安徽等地[1-3]。桂花的花、根、果均有药用价值[4-6]。《本草纲目》称桂花为本经上品，“化痰、生津、辟臭，可治风虫牙痛”，而《陆川本草》亦称桂花“治痰饮喘咳”[7-9]。现代药理研究表明，桂花具有降血糖、抑菌抗炎、体内外抗氧化、抗癌、抗高血糖、护肝以及保护神经等多种作用[10-12]。多糖是桂花的主要活性成分之一，从桂花、桂花叶和桂花果实中均可提取得到多糖[13-15]。植物多糖作为天然生物体大分子物质，经研究证实具有多种多样的生物活性，如抗病毒、抗氧化、抗凝、抗癌、降血糖和增强免疫等，近年来成为天然药物研究的热点[7,16-18]。本文综述了近年来国内外对桂花多糖的提取工艺、含量和组成的测定及药理活性的研究进展，以期为桂花多糖的进一步研究和应用提供一定的思路及依据。

1 桂花多糖的提取工艺

近些年从桂花、桂叶和桂花果实中提取多糖的方法主要有溶剂提取法（又分为水溶醇析法[13,15,19-21]和内部沸腾法[18,22]）、微波辅助提取法[23]、超声波辅助提取法[14,17]、酶法提取[24-25]等，相关工艺流程、最优提取条件及其提取率详见表1。表1 中的数据表明，不同原料的桂花多糖提取率为干桂花＞干桂叶＞桂花果实（种子）。

表1 桂花多糖的不同提取工艺汇总表

2 桂花多糖的测定

2.1 桂花多糖含量的测定

目前测定植物多糖含量的方法有化学滴定法、色谱法、光谱法和酶法等。其中，化学滴定法步骤烦琐、重复性和准确度差，而色谱法和酶法仪器设备昂贵，均不易推广[23,26]。近些年应用于多糖含量测定最广的方法是紫外-可见分光光度法[26]。此法测定多糖含量的方式主要分为两类，一类是利用糖的还原性，如3,5-二硝基水杨酸比色法和Somogyi-Nelson 法，另一类是糠醛缩合显色法[26-27]。糠醛缩合显色法根据显色剂的不同又可分为地衣酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法等[23,26-27]。冯程程等[20]用苯酚-硫酸法测得桂花中多糖含量的均值为34%，王升匀等[28]用此法测得桂花种子中多糖的含量为4.32%。林志銮等[23]用荧光光谱法测得桂花多糖的含量为12.17%，黄玲艳[8]用改良的苯酚-硫酸法测得每克桂花提取物中总多糖的含量为（307.98 8.90）mg。上述结果表明桂花中多糖含量适中，方便用来提取植物多糖。

2.2 桂花多糖组成的测定

除了测定桂花多糖的含量，分析桂花多糖单糖成分的分布规律也有助于桂花相关产品的开发和利用。目前植物多糖的单糖组成分析方法主要有毛细管电泳技术、气相色谱技术、高效液相色谱技术和质谱技术等[29]。李婷婷等[21]、范宝磊等[30]分别采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生高效液相色谱（PMP-HPLC）法和PMP-HPLC-MS-MS 法[31]分离检测桂花多糖中单糖组成的结果详见表2。

表2 桂花中单糖组成的测定表

3 桂花多糖的药理活性

3.1 抗氧化作用

李昊[24]发现桂花多糖对DPPH 自由基和O2-·有一定的清除作用，当其质量浓度为10 g·L-1时，对DPPH 自由基的清除率为85.38%，对O2-·的清除率为85.03%；桂花多糖对DPPH 自由基和O2-·的半数抑制浓度分别为0.812 g·L-1和1.364 g·L-1。蒋德旗等[25]发现桂花多糖的质量浓度为10 mg·mL-1时，对DPPH 自由基的清除率为88.76%，对O2-·的清除率为87.63%；桂花多糖对DPPH 自由基和O2-·的半数抑制浓度分别为0.846 mg·mL-1和1.256 mg·mL-1。赵丛丛等[32]抗氧化活性试验结果表明桂花子多糖对羟自由基、DPPH自由基和ABTS+自由基最高清除率分别为48.5%、55.8%和77.9%。多项研究结果表明，桂花多糖具有清除自由基的能力，在一定范围内清除自由基的能力与浓度变化呈正相关[18,28,33-34]。

3.2 抑菌活性

黄国文等[15]研究发现金桂果实多糖在pH 值为4 ～8 时对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌均有抑制作用，且抑制作用由强变弱，在pH=6 时抑菌作用最强，过酸或过碱时则无抑菌作用。同时，随着处理时间的增加，金桂果实多糖对这3 种菌的抑制作用先增强后减弱，且最佳处理时间为10 ～20 h，抑菌率可达100%。此外，金桂果实多糖对这3 种细菌的抑制作用随其浓度的增加逐渐增强，且对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度分别约为3.2%、3.2%和7.5%。该研究证实金桂果实多糖有一定的抑菌作用，可进一步研究其能否用于食品的防腐保鲜。

3.3 免疫活性

尹伟等[33]研究发现桂花多糖对鼠脾淋巴细胞诱导的增殖转化效果明显且无显著的细胞毒性。此外，桂花多糖对IL-2、IFN-γ、TNF-α 的分泌有很强的促进作用，并在一定程度上，其效果随剂量的增大而增强。由该研究可推断桂花多糖有一定的免疫调节作用，这也为其抗癌作用的研究提供了一定的依据。

3.4 抗癌活性

亚硝酸盐是生成亚硝胺的前体[34]，在一定条件下，可与食物中的仲胺、叔胺等生成亚硝胺[28]。亚硝胺被世界卫生组织列为1 类致癌物，对人和动物有强致癌性。王升匀等[28]通过体外实验研究表明，桂花种子多糖在2.4 g·L-1浓度下对亚硝基具有一定清除作用。该研究说明桂花种子多糖是一种良好的亚硝基清除剂，可阻断亚硝胺在体内的合成，因而这种物质可能具有防癌作用[28,34]。

4 结语

综上所述，桂花多糖具有抗氧化、抑菌、增强免疫、抗癌等作用。桂花多糖的抑菌作用为其进一步用于食品的防腐保鲜提供了新的思路；桂花多糖的抗氧化作用、增强免疫和抗癌活性使其在保健食品领域有很大的潜力和广阔的前景。但目前市面上的桂花产品大多为粗放式的民间工艺所制造，较少有深加工的研究，缺乏高端产品。通过研究桂花活性成分，如桂花多糖，有利于开发桂花的精、深加工产品，提高其附加值。目前，对桂花多糖的研究还不够深入，仍需进一步研究其在生物体内的作用机制。此外，由于不同品种的桂花及桂花的不同部位的多糖含量和单糖组成存在差异，后续在研究桂花多糖的提取时应筛选品质优良的桂花品种及其重要部位。咸宁市作为“桂花之乡”，桂花资源丰富，我国应大力研究和开发桂花的精、深加工产品，以带动地方经济发展。