氟苯尼考固体分散体的研制

李艳玲,郭永刚,李佳禧,赵建平

(河南牧业经济学院 动物医药学院,河南 郑州 450046)

氟苯尼考是甲砜霉素的单氟衍生物,易溶于有机溶剂,难溶于水。临床应用于水产养殖、牛、猪及鸡的细菌性疾病的防治,主要的剂型有注射剂、粉剂等。在当前市场上广泛应用的氟苯尼考制剂主要包括10%氟苯尼考注射液、10%和20%含量的氟苯尼考粉[1]、含2%氟苯尼考的溶液剂和预混剂等剂型。氟苯尼考的水难溶性使其在临床应用中的利用率较低。因此,急需研发一种能够提高氟苯尼考溶解度和吸收利用度的氟苯尼考新剂型[2]。

固体分散技术是近年来兴起的一种能够改变一些难溶性药物溶解性的新技术[2]。它通过物理或者化学方法将原料药和辅料高度混合在一起,能使药物改变原来的单一存在形态,以更多样的物质结构分散于合适的载体之中。固体分散体具有提高难溶性药物的生物利用度、提升药物的稳定性等特点,具有广泛的应用前景[3-5]。本试验采用熔融法和溶剂法制备氟苯尼考固体分散体,筛选其最佳制备方法和药辅比,提高氟苯尼考的溶解度和生物利用度,扩大其临床应用范围。

1 材料与仪器

1.1 试剂与药品

氟苯尼考标准品(批号:A11A8L33686,上海源叶生物科技有限公司),氟苯尼考原料药(郑州后羿制药有限公司),聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000(天津市光复精细化工研究所),乙腈(一级色谱纯,默克股份有限公司)。

1.2 仪器设备

Waters高效液相色谱仪(上海沃特世科技有限公司),BSA224S型分析天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司),RE-2000型旋转蒸发仪(上海贤德实验仪器有限公司),Purelab F1型纯水机(威立雅水处理技术上海有限公司),85-2型磁力加热搅拌器(江苏正基仪器有限公司),油浴锅(上海树立仪器仪表有限公司),ZRS-6G型智能溶出实验仪(天津市天大发科技有限公司)。

2 方法

2.1 氟苯尼考固体分散体的制备

按1∶4、1∶5、1∶7精密称取一定量的氟苯尼考原料药和聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000,使用熔融法、溶剂法制备氟苯尼考固体分散体[6,7]。

熔融法制备:先将按比例称取的聚乙二醇2000放入小瓷缸中,置于油浴锅中加热熔融(油浴锅的温度为160 ℃),再分次加入处方比例的氟苯尼考原粉,混合熔融。待熔融完全后,利用打蛋器高速搅拌3 min,将熔融物倒在烧杯中,置于磁力加热搅拌器上充分搅拌,将其取出倒在冷冻的玻璃板上,使其迅速冷却凝固。干燥箱中30℃干燥12小时,待干燥完全后用镊子将其刮下,粉碎过80目筛,即得氟苯尼考-聚乙二醇2000不同比例的氟苯尼考固体分散体,放于密封袋中保存,备用。同理,不同比例的氟苯尼考聚乙二醇4000、聚乙二醇6000固体分散体也按上述方法制备。

溶剂法制备:按比例称取聚乙二醇2000、氟苯尼考原粉,先将氟苯尼考原粉放置于带有适量甲醇的烧杯中使其溶解,然后向烧杯中加入比例量的聚乙二醇2000,在60 ℃的磁力加热搅拌器上加热搅拌溶解、混匀,再将其旋蒸除去甲醇,使药物和载体析出,置于冷冻的玻璃板上冷却凝固,室内放置干燥约24 h,干燥过后用镊子将其刮下,粉碎过80目筛,密封保存。同样,不同比例的氟苯尼考聚乙二醇4000、聚乙二醇6000固体分散体也按照此步骤制备。

2.2 氟苯尼考固体分散体溶出度的测定

精密量取氟苯尼考原粉100 mg及不同比例的氟苯尼考-聚乙二醇2000固体分散体适量(含氟苯尼考100 mg)包在称量纸中做好标记备用。配置0.1%的盐酸(超声脱气30 min处理)作为溶出介质,设定溶出仪温度为37 ℃,转速为100 r/min。待所有准备工作完毕后,开始投放称量好的氟苯尼考原粉及氟苯尼考-聚乙二醇2000(1∶4、1∶5、1∶7)固体分散体(含氟苯尼考100 mg),在药物和溶出液开始接触时,转动搅拌釜并按下计时装置,分别在5 min、8 min、20 min、40 min、60 min时间点取样5 mL,同时补充相同体积相同温度的溶出液,取出的样液经滤膜过滤后置于5 mL EP管中;每个样品都按照上述的方法做两次平行的溶出试验,保存所取样液[8,9]。

配制氟苯尼考标准品:精密称定氟苯尼考标准品1 mg,倒入10 mL的容量瓶中,加入0.1%的盐酸溶液并超声溶解,待其溶解完全后,加入上述溶液定容,于常温下保存。

高效液相测定氟苯尼考含量:流动相为乙腈∶水=35∶65,将样品溶出液经0.22 μm的微孔滤膜过滤后,取续滤液置于高效液相进样瓶中,进样量为10 μL,柱温为25 ℃,在224 nm波长处测定样品中氟苯尼考含量,记录数据,计算溶出度。

3 结果

3.1 高效液相测定氟苯尼考含量

由图1可知,检测波长为224 nm时氟苯尼考吸收度较好,且无干扰,可以做为测定氟苯尼考含量的测定条件(图2)。

图1 氟苯尼考标准品溶液

图2 氟苯尼考固体分散体

3.2 氟苯尼考固体分散体溶出率的测定

从表1结果可得,以聚乙二醇2000、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000为载体,用熔融法制备氟苯尼考固体分散体,在不同药辅比下增溶效果均较为明显,与原料药的溶出率(27%)相比,最高能增加到50%,特别是聚乙二醇4000(药辅比1∶5)累积溶出率最高,在5 min时即可达到最大溶出率50%。

表1 氟苯尼考固体分散体溶出率(熔融法)

从表2结果可以看出,用溶剂法制备的固体分散体和原料药相比增溶效果明显,且溶出速率明显加快,原料药需要60 min才能达到最大溶出率27%,而氟苯尼考固体分散体20～40 min即可达到最大溶出率,且溶出率明显增加,不同药辅比下,溶出率均可提高40%以上。

表2 氟苯尼考固体分散体溶出率(溶剂法)

4 讨论

试验采用熔融法和溶剂法分别对氟苯尼考固体分散体进行溶出率测定,结果显示,对于两种方法、不同辅料制成的不同比例的氟苯尼考固体分散体,其溶出率均明显高于氟苯尼考原粉,表明聚乙二醇2000、4000、6000能够增加氟苯尼考的溶解度。对于相同方法、相同辅料、不同比例的氟苯尼考固体分散体来看,氟苯尼考的溶出速率在一定范围内会随着辅料比例的增大而增加。一旦超出这个比例范围,虽然会对氟苯尼考产生助溶作用,但助溶能力与比例将不再呈现正相关的关系。相同辅料、相同比例、不同方法制备氟苯尼考固体分散体,可以得出熔融法则更适合氟苯尼考固体分散体的制备。比较相同时间段氟苯尼考溶出量以及所能达到的最大溶出量所需时间,可以得出,不论是熔融法还是溶剂法,氟苯尼考-聚乙二醇 4000(1∶5)制备出的固体分散体的溶出能力要强于其它类型的氟苯尼考固体分散体。

试验操作中为了确保药物的稳定性和可靠性,采用熔融法制备固体分散体时,需注意辅料的熔融时间。如果用于熔融辅料的容器导热性差,辅料长时间处于高温下,辅料的分子结构极有可能被破坏,从而导致其增溶能力的下降。采用溶剂法制备固体分散体时,需注意除去有机溶剂试验的操作安全。此外,在倒至玻璃板时,两种制备方法均需药物迅速冷却结晶,确保固体分散体的高度分散状态。

5 结论

采用熔融法和溶剂法成功制备了稳定性较好的氟苯尼考固体分散体。在氟苯尼考-聚乙二醇4000(1∶5)时熔融法制备的固体分散体溶出率最高,该制备方法操作简便,易于质量控制,可有效提高了氟苯尼考的溶出度。