地黄下脚料提取物对鸭生长性能和免疫活性的影响

程茂高,乔卿梅

(河南牧业经济学院 动物医药学院,河南 郑州 450046)

随着人们对动物性食品安全的重视,采用绿色健康的养殖方式已经成为养殖业的必然选择,中兽药和中药饲料添加剂的合理使用受到人们越来越多的关注。但当前兽用中药资源匮乏,大部分企业利用人用中药进行生产,造成人兽中药资源抢夺,抬高企业生产成本,养殖企业失去使用动力,解决兽用中药资源问题已成为养殖业急需解决的问题[1,2]。中药在加工、炮制过程中产生的破碎组织、根须、残渣等下脚料中含有丰富的营养成分,将其直接或加工后用于饲喂畜禽,既可减少环境污染、节约中药资源,又可提高畜禽机体免疫能力、降低养殖业成本,是协同中药资源综合开发利用、减少人兽中药资源争夺的有效途径之一[3,4]。地黄为常用大宗中药,在兽医临床中广泛应用,《中国兽药典(2020版)》二部收录了含地黄的15个成方制剂[5]。目前,对地黄的非药用部位的应用价值有少量研究[6-8],但人们对地黄下脚料与动物免疫力、应激反应、疾病防治的关系还缺乏系统研究。本试验研究了地黄下脚料提取物对鸭生长性能和免疫活性的影响,为中药下脚料兽用化利用和健康养殖提供参考。

1 材料与方法

1.1 主要耗材与仪器

地黄下脚料购自安徽亳州周边中药加工企业(15批次地黄边角碎料及破碎组织,按质量等比例混合,粉碎,过筛后得粉末样品);鸭免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫试剂盒(批号为ED-61022)、鸭免疫球蛋白M(IgM)酶联免疫试剂盒(批号为ED-61087)、鸭白细胞介素2(IL-2)酶联免疫试剂盒(批号为ED-61008)均购自厦门仑昌硕生物科技有限公司;台式高速冷冻离心机(H1850R型,湖南湘仪实验室仪器开发有限公司);全自动酶标仪(Read Max 500F型,上海闪谱生物科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 地黄下脚料煎煮液制备

取混合地黄下脚料粗粉100 g,600 mL水浸泡0.5 h,大火煎沸后改用小火煎煮20 min,过滤;残渣中加入400 mL水煎煮20 min,过滤,合并两次滤液,浓缩至100 mL,即得地黄下脚料煎煮液。

1.2.2 试验动物及分组

选取10日龄健康金定鸭120只,静养4 d后开始正式试验,15～35日龄为试验期,试验期21 d。鸭随机分为5组,每组设3个重复,每个重复8只。对照组饲喂基础日粮,试验I～IV组分别在基础日粮中添加1 g/kg、2 g/kg、3 g/kg、4 g/kg地黄下脚料煎煮液进行饲喂。试验鸭采取单层笼养方式,常规饲养管理。各阶段基础饲粮营养水平参考《GB/T 41189-2021蛋鸭营养需要量》,其组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平

1.2.3 生长性能测定

试验所用鸭以每个重复为单位,分别于13、27、34日龄断水断料,统计各重复笼鸭的剩料量,分别于14、28、35日龄空腹称重,计算鸭平均体重和日均增重、日均采食量、料重比。

1.2.4 免疫活性测定

28日龄和35日龄时,分别从各组重复中随机挑选2只鸭进行颈静脉采血,血液样本在室温静置2 h后2000 r/min离心20 min,取上清,按试剂盒说明测定吸光度(OD值),计算各组血清中IgG、IgM、IL-2的质量浓度。分别采集上述鸭的胸腺、脾脏、法氏囊,除净表面结缔组织、脂肪,准确称重,计算免疫器官指数。免疫器官指数=脏器鲜重(g)/体重(kg)。

1.2.5 数据统计与分析

采用SPSS 20软件中的一般线性模型对试验数据进行单变量方差分析,选用LSD进行两两比较检验,试验数据均以“平均值±标准偏差”表示,P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 地黄下脚料提取物对鸭生长性能的影响

由表2可知,与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组鸭在28日龄(饲喂14 d)、35日龄(饲喂21 d)后其平均体重、日均增重、日均采食量差异均不显著;试验Ⅱ组料重比显著降低。

表2 鸭生长性能测定结果

2.2 地黄下脚料提取物对鸭免疫活性的影响

由表3可知,与对照组相比,基础日粮中添加地黄下脚料煎煮液,在28日龄(饲喂14d)时,鸭血清IgG变化不显著;试验Ⅱ、Ⅲ组IgM含量分别升高22.70%、15.60%;试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组IL-2含量比对照组升高44.39%、129.63%、224.07%。35日龄(饲喂21d)时,各试验组IgG、IgM、IL-2含量虽比28日龄(饲喂14d)时有明显甚至极显著增长(P<0.01),但增速明显低于对照组,其中IgM含量低于对照组的50 %、IL-2含量低于对照组的60%。

从表4可以看出,基础日粮中添加地黄下脚料煎煮液时,鸭的胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数均比对照组有所提高。与对照组相比,添加不同剂量地黄下脚料煎煮液,鸭胸腺指数在28日龄(饲喂14 d)和35日龄(饲喂21d)均无显著性变化;试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组胸腺指数在28日龄分别提高5.75%、11.37%、21.90%,35日龄分别提高12.32%、13.96%、18.82%;脾脏指数在28日龄时分别提高14.80%、20.74%、19.36%,35日龄时分别提高12.81%、23.45%、23.45%;法氏囊指数在28日龄时分别提高26.23%、31.48%、34.69%,35日龄时分别提高19.06%、24.39%、29.27%。

表4 鸭免疫器官指数测定结果 g/kg

3 讨论

3.1 地黄下脚料提取物对鸭生长性能的影响

研究表明,饲料中添加适量中药可提高家禽的生长性能[9-13]。本研究团队前期对15批次地黄下脚料的测试结果表明,地黄下脚料中既有较高含量的浸出物和梓醇,又有丰富的粗蛋白、粗脂肪、多糖和矿质元素[14]。本试验中,基础日粮中添加地黄下脚料提取物虽然对鸭的平均体重、日均增重、日均采食量无显著性影响,但添加剂量为2 g/kg时可显著降低28日龄和35日龄鸭的料重比,表明添加适量的地黄下脚料提取物可节约饲料使用量。

3.2 地黄下脚料提取物对鸭免疫活性的影响

胸腺、脾脏和法氏囊是家禽重要的免疫器官,免疫器官指数在一定程度上能够体现出家禽的免疫状态。IgG和IgM等免疫球蛋白在血液中的含量是评价机体免疫应答反应的一项重要指标。IL-2是引起T细胞增殖的主要细胞因子,也是评价机体细胞免疫水平的重要指标。大量研究表明,饲料中添加适量的中药成分可提高家禽的免疫器官指数[9-13]和血清免疫指标[15-16]。地黄煎剂、地黄多糖等均可不同程度地提高动物的免疫功能[17-19],但尚少见地黄对禽类免疫活性影响的研究报道。本研究表明,基础日粮中添加地黄下脚料煎煮液,可提高鸭的胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数,添加2 g/kg地黄下脚料煎煮液饲喂14 d时可以提高28日龄鸭血清中IgG、IgM、IL-2的含量。赵歆昀等[20]研究表明,低聚糖可促进家禽胸腺、法氏囊等免疫器官的发育。地黄下脚料中较高的水苏糖和蔗糖等低聚糖含量可能是导致鸭免疫器官指数升高的原因[19]。

4 结论

鸭基础日粮中添加2 g/kg地黄下脚料煎煮液,可显著降低料重比,显著提高鸭脾脏指数、法氏囊指数以及血清中IgM、IL-2的含量,提高鸭的免疫活性。