桂利嗪片的溶出行为研究及溶出曲线绘制

敦 康，付 莉，王若琳

（1.河北省药品审评中心，河北 石家庄 050091 ；2.河北科技大学材料科学与工程学院，河北 石家庄 050018）

桂利嗪的化学分子式为C26H28N2，其分子结构式如图1 所示。桂利嗪片与许多药物联合使用时，其药效会根据联合用药的不同而发生变化。例如，与催眠药或镇静药联合使用时会增加镇静的作用；与苯妥英钠、卡马西平联合使用时会降低桂利嗪片的血药浓度；接受放射治疗的患者联合使用桂利嗪片会提高放射线对肿瘤细胞的杀伤力；与抗癫痫药物联合使用可以提高抗癫痫效果。桂利嗪片可治疗多种疾病。此药是一种钙通道阻滞剂，可通过阻止血管平滑肌钙内流促使血管扩张，从而改善脑部供血，属于周围血管扩张药。桂利嗪片能缓解血管痉挛，其解痉作用比罂粟碱强，但镇静作用不明显。此药还能改善前庭微循环，保护心肌，减轻心肌缺血性损伤。目前，临床上多使用桂利嗪片治疗脑血管疾病，如脑血栓、脑动脉硬化、血管性偏头痛等[1-7]。最新的研究表明，桂利嗪片在抗曼氏血吸虫[8]、治疗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）相关冻疮样病变[9]等领域也能取得一定的疗效，发挥“旧药治新病”的作用。溶出度是指片剂等口服固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度，该数据可以准确体现口服固体制剂的生物吸收性能。体外溶出试验中通常选择三、四种溶出介质，并绘制溶出曲线进行考察，以评价口服固体制剂的内在质量。本文按照2020 年版《中华人民共和国药典》四部通则中的溶出度测定方法[10]进行桂利嗪片仿制药的溶出试验，采用紫外- 可见分光光度法测定溶出度，并绘制溶出曲线，以期为完善该制剂的质量标准提供参考。

图1 桂利嗪结构式

1 仪器与试药

1.1 仪器

TU-1901 型紫外- 可见分光光度仪（北京普析通用仪器公司）；SOTAX AT 7 smart 溶出试验仪（美国SOTAX 公司）；XS105 型电子天平（瑞士Mettler-Toledo 公司）。

1.2 试药

桂利嗪片仿制药（三个厂家）；磷酸二氢钾、氢氧化钠、醋酸钠、盐酸、醋酸、乙酸铵、冰醋酸均为分析纯，乙腈为色谱纯，水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 溶出和测定方法的选择

参照《中华人民共和国药典》2020 版（通则0931 溶出度与释放度测定法 第一法）和桂利嗪片剂项下的溶出度测定方法，选择篮法，转速为100 r/min，介质体积为900 mL。取不同介质条件下的溶出液10 mL，滤过，精密量取续滤液5 mL，置于10 mL 量瓶中，用溶出介质稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。按照紫外-可见分光光度法（通则0401），在253 nm的波长处测定吸光度，以吸收系数法计算溶出量。桂利嗪为碱性化合物，而盐酸溶液（pH 1.0）、醋酸盐缓冲液（pH 4.0）、磷酸盐缓冲液（pH 6.8）、水这四种溶出介质为碱性化合物考察溶出曲线时常规采用的溶出介质，同时参照仿制药质量一致性评价- 普通固体口服制剂溶出度试验技术指导原则，桂利嗪片溶出度的测定选择这四种溶出介质。在取样时间上，考虑到制剂在上述四种不同介质中的溶出速率不同，我们将这四种介质的溶出时间均做了相同的延长以方便比对，溶出时间定为5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min。

2.2 溶出介质的制备

盐酸溶液（pH 1.0）的制备：取盐酸9 mL，加水稀释至1000 mL，即得。醋酸盐缓冲液（pH 4.0）的制备：取醋酸钠1.22 g，加2 mol/L 醋酸溶液20.5 mL，加水稀释至1000 mL，即得。磷酸盐缓冲液（pH 6.8）的制备：取0.2 mol/L 磷酸二氢钾溶液250 mL 和0.2 mol/L 氢氧化钠溶液112 mL，加水至1000 mL，即得。水为纯化水。

2.3 供试品溶液

取样品适量，按2.1 项下的溶出测定方法，分别以pH 1.0 盐酸溶液、pH 4.0 醋酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液和水作为溶出介质，体积为900 mL，转速为100 r/min，温度为37.0 ℃，分别于不同时间点各取样10 mL，不进行补液操作，以0.45 μm 滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.4 四条溶出曲线的测定

按照2.2 中的方法分别配置pH 1.0 的盐酸溶液、pH 4.0 的醋酸盐缓冲液、pH 6.8 的磷酸盐缓冲液和水作为溶出介质，按照2.1 中的试验方法，取3 个厂家的样品各12 片，依照上述方法进行操作，分别经5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60 min、90 min、120 min 取样，按照2.1 中的检测方法进行检测。

2.5 滤膜吸附试验

分别取“2.3”项下的四种溶出介质制备的供试品溶液适量，不滤过直接测定；再经过0.45 μm 滤膜滤过，弃去3 mL 滤液，取续滤液，在253 nm 波长处分别测定吸光度。结果表明，四种供试品溶液经滤膜滤过后，与滤过前测定结果相比无差异，说明0.45 μm 滤膜对桂利嗪基本没有吸附作用。

2.6 溶出曲线的绘制

取三批桂利嗪片剂样品，每批12 片，按“2.3”项下的方法制备供试品溶液，在253 nm 波长处测定吸光度，分别绘制溶出曲线，结果见图2 和图3。桂利嗪在碱性条件和水中无溶出行为。

图2 桂利嗪片在pH 1.0 盐酸溶液中的溶出曲线

图3 桂利嗪片在pH 4.0 醋酸盐缓冲液中的溶出曲线

3 讨论

桂利嗪片是一种钙通道阻滞剂，能显著增加脑血流量，改善脑循环及冠状动脉循环，抑制血管活性物质，对脑动脉硬化、高血压导致的脑循环障碍、蛛网膜下腔出血等均有较好的治疗作用。此外，桂利嗪片还能改善晕动症患者的头晕、耳鸣等症状，并在不影响心率和耗氧量的情况下增加冠状动脉血流量和心输出量。溶出度是指片剂等口服固体制剂的溶出速度和程度，它是口服固体制剂质量控制的一个重要指标。分析桂利嗪片在本研究中四种溶出介质中的溶出行为，发现其以水为介质时为难溶片剂。桂利嗪片属于pH 依赖型药物，其溶出量会随着pH 的升高而减少，甚至完全不溶出。本研究尝试延长溶出时间，结果也未改变桂利嗪片的溶出行为。在醋酸盐缓冲液中，桂利嗪片随着溶出时间的延长，溶出量逐渐增加，但随着时间的延长增加逐渐缓慢。

对桂利嗪溶出效果有影响的因素包括制剂的包衣成分、片剂本身的硬度、脆碎度、崩解时限、联合用药情况及其他辅料的影响等。辅料有时会明显影响桂利嗪的吸收效果，如临床上使用桂利嗪的同时联合使用分子结构较大的表面活性剂，就会加快桂利嗪的溶解速度。本研究中采用四种不同pH 值的溶出介质及三批不同厂家的桂利嗪片样品进行溶出试验，并分别绘制溶出曲线，试验数据表明，三批桂利嗪片样品在四种不同pH 值溶出介质中的溶出曲线走形相似，说明三批样品的生产工艺对质量的控制基本无差异，三批桂利嗪片剂的制备工艺较为成熟稳定。桂利嗪片属于pH 依赖型片剂，在水中难溶，pH 值升高可导致桂利嗪片的溶出效率降低，即使延长溶出时间也不能改变溶出效率低的行为。本研究中，桂利嗪片在磷酸盐缓冲液和水两种溶出介质中均无溶出，而在醋酸盐缓冲液中很快达到了80% 的溶出量。但根据文献报道的原研药的溶出曲线，在醋酸盐缓冲液中，桂利嗪片原研药在溶出时间达到6 h 时仍未溶出到80%，这说明国产桂利嗪片与原研制剂在制备工艺上仍有一定的差异。在盐酸溶液中，此三批桂利嗪片的溶出行为与原研药差异同样明显，这提示我们国产制剂可能在体内血药浓度上与原研制剂会存在差异，因此国产桂利嗪片的制备工艺还有提升的空间。

综上所述，桂利嗪片在强酸溶液中溶出更完全，溶出曲线更趋近于水平，在碱性和水介质中无溶出。本试验方法能够有效测出桂利嗪片的体外溶出度，通过绘制溶出曲线能够直观体现桂利嗪片的溶出行为，为桂利嗪片厂家改进生产工艺提供参考。