镇宁小黄姜脱毒原原种繁育技术

吴家丽，牛力立，谭体琼，鲍菊

（安顺市农业科学院，贵州，561000）

小黄姜（Globba racemosaSmith），姜科姜属植物，辛辣味浓，肉细嫩，味香，纤维较细[1]，具有多种药理活性，具有抗氧化、抗炎、抗癌、降血糖和保护心血管功效性[2]，是安顺市农业产业结构调整中药食兼用的重要经济作物之一。镇宁小黄姜作为安顺地方特色品种，根茎黄色或浅黄色，具有强烈辛辣味，味美品质佳，2020年获得国家地理标志农产品认证[3]，2021年种植规模达11 053.33 hm2。但由于采用块茎无性繁殖、反复重茬生产等原因，小黄姜主产区姜瘟病、茎基腐病等病害盛行，病毒积累多，导致近年来品质降低、产量和种植面减少的现象逐步显现，同时大量外地品种占据部分种植面积，使地方特色品种市场受到严重威胁。采用热处理结合茎尖分生组织培养，可脱除生姜病菌，进而建立种苗、种姜快繁体系，是防止病害和提高繁殖系数的有效技术措施[4]。我国山东、浙江、江苏、山西、广西、云南、安徽等省份的科研人员针对生姜茎尖脱毒、组培快繁体系建立、高产栽培技术、增产、抗病性等开展了大量的试验研究，在山东、云南等地进行了大面积推广应用，增产效果明显[5～15]，但在贵州省针对小黄姜原原种繁育技术研究详细报道少。笔者自2019年开始针对镇宁小黄姜组培脱毒及原原种繁育技术进行系统研究，旨在恢复和提高镇宁小黄姜优良种性，建立镇宁小黄姜脱毒种姜繁育技术体系，发展安顺市特色优势产业，助力乡村振兴。

1 培育脱毒试管苗

1.1 姜块催芽及热处理

选取皮色光亮、肉黄饱满、无病虫害的镇宁小黄姜健康块茎，冲洗干净，用0.5%代森锰锌浸泡30 min捞出晾干，放在高压灭菌后的无土栽培基质中，置于光照培养箱内进行恒温（28℃）催芽，保持无土栽培基质湿润。姜芽萌动后，于40～45℃（8 h/d）高温下热处理1 个月。

1.2 再生试管苗离体诱导

①外植体消毒灭菌 选取光照箱中催芽热处理后长2 cm 左右的壮芽，用自来水冲洗30 min 左右，在超净工作台上用75%酒精擦拭或浸泡30 s，再用10%次氯酸钠（NaClO）灭菌15 min，无菌水冲洗4～5 次后用无菌滤纸吸干水分。

②外植体接种 将消毒灭菌后吸干水分的壮芽，在体视镜下切取0.1～0.3 mm 的小黄姜茎尖分生组织，接种于以MS 为基本培养基，添加6-BA 2.0 mg/L 和NAA 0.1 mg/L 的培养基中诱导小黄姜再生植株。

③病毒检测 将茎尖分生组织诱导的再生植株送至专业检测机构对黄瓜花叶病毒（TMV）和烟草花叶病毒（CMV）进行检测。

④脱毒试管苗增殖生根同步培养 将检测无黄瓜花叶病毒（TMV）和烟草花叶病毒（CMV）、叶绿、无黄化的壮苗接种于MS+6-BA 2.5～3.0 mg/L+NAA 0.03 mg/L 的培养基中进行增殖和生根同步培养，可有效简化培养程序，减少接种工作量，缩短培养时间，降低培养成本。此方法与雷开荣[16]的研究一致。

脱毒试管苗培育各阶段培养要求均一致。即培养室温度为25～30℃，光照2 000 lx，12～16 h/d，培养基pH 值5.8～6.0。

图1 微茎尖分化诱导培养

2 原原种繁育

2.1 脱毒试管苗炼苗

移栽前1 周将生根良好、达到入土条件的脱毒试管苗放在培养室外、散射光下封瓶炼苗1 d、开瓶炼苗3 d 或封瓶炼苗3 d、开瓶炼苗1 d，使试管苗适应外部环境，提高移栽成活率。

2.2 基质选择与苗床制作

选用自配营养基质（无土栽培基质∶营养土=2∶1）进行移栽。移栽苗床采用厢床栽培，厢面宽1.8 m。移栽前30 d，在厢床底部铺细土+1 000 kg/667 m2腐熟兔粪或牛粪，将其混匀后再平铺40 cm 厚的自配营养基质（用1%甲醛、威百亩或棉隆消毒后使用）。

2.3 适期移栽

脱毒试管苗于3月下旬地温回升后至6月中旬移栽。移栽前1 d 将厢面浇透水，清洗干净试管苗根部的培养基，按照（12～15）cm×（40～50）cm 的株行距单株栽植于网室大棚中，栽后浇足定根水，加盖塑料拱棚、遮阳网进行保温、保湿、遮荫。

2.4 成活期管理

试管苗移栽后15～20 d 新根开始生长，要求白天温度不高于30℃，夜晚温度不低于15℃。晴天强光照射或阴天中午时，应及时揭开网室和拱棚膜两头进行通风透气，中午温度过高时，利用喷灌淋水1 min 左右。移栽后7～10 d 内保持拱棚湿度在85%～90%，以后逐渐降低，适时浇水，经常保持基质相对湿度65%左右。30 d 以后根据试管苗长势情况逐渐撤除拱棚膜，晴天强光照天气加盖遮阳网遮荫，避免中午强光直射，分枝开始发生后即可逐步撤除遮阳网。

2.5 肥水管理

①追肥管理 小黄姜以地下块茎为产品器官，试管苗根系较弱，忌偏施氮肥，注重氮磷钾肥配合施用。试管苗新根开始发生时，以叶面喷施0.3%～0.5%磷酸二氢钾+尿素水溶液+2%腐熟油饼对水淋施为主，7～10 d 1 次，连施3 次；试管苗分枝发生2个以上至立秋（8月7日左右）前，分枝发生较少，根系开始大量发生，以10%～15%的一桶天下有机水溶肥（高钾型）或钾富贵水溶肥+4%腐熟饼肥+1%腐植酸液肥淋施为主，7～10 d 1 次，连施3 次；立秋后分枝开始大量发生，姜块迅速膨大，对钾肥需求量增加，以10%氮磷钾三元复合肥+5%硫酸钾水溶液+4%腐熟饼肥+1%腐殖酸液肥淋施为主，连施3次；姜块膨大后期看苗施肥，以5%硫酸钾水溶液+4%腐熟饼肥淋施为主，长势弱的追施2～3 次，长势好的追施1～2 次，7～10 d 1 次。

②水分管理 小黄姜喜温怕寒怕旱不耐涝，原原种生产中及时喷水，保证基质湿润，避免长期干旱影响姜块膨大。雨天须注意网室周围排水防涝，忌阴雨天湿度过大，引起烂姜现象发生。

2.6 中耕培土

生姜属浅根系作物，在封行前须适时结合追肥、中耕除草培土2～3 次，保护块茎不露出地面，正常膨大。

2.7 病虫害预防与防治

图2 脱毒试管苗分化诱导培养

原原种繁育中，采取“以防为主，综合防治”原则进行病虫害预防与防治。脱毒试管苗抗病性强，在原原种繁育过程中无病害产生，在网室纱网被破坏的情况下会有姜螟虫、地老虎、斜纹夜蛾等虫害发生，可用1.5%精高效氯氟氰菊酯微囊悬浮剂1 000～1 500 倍液、15%辛硫磷乳液800～1 000 倍液等进行喷雾防治。

图3 脱毒试管苗增殖和生根同步培养

2.8 适时收获与贮藏

于霜降（10月23日左右）后立冬（11月7日）前选晴天收获，晾半天后做好标记打包运输至地窖贮藏，后熟完成后及时销售，或作下一年脱毒原种生产用。

图4 脱毒原原种繁育