野菊花质量标志物（Q-marker）预测及其一测多评研究＊

王 旭，胡 鑫，胡志刚，刘义飞，刘 迪，陈士林，张景景＊＊

（1. 湖北中医药大学药学院 武汉 430065；2. 中国中医科学院中药研究所 北京 100700）

野菊花为常用中药材，应用历史悠久，2020 年版《中国药典》收载的野菊花药材为菊科植物野菊Chrysanthemum indicumL.的干燥头状花序，具有清热解毒、泻火平肝的功效，临床常用于疔疮痈肿，目赤肿痛，头痛眩晕等症[1]。野菊花用途广泛，临床和民间应用均较多，其水提物和挥发油是多种医药产品、日化产品、保健产品等的原料，具良好开发及应用前景。野菊资源丰富，在全国多个省份均广泛分布，其生长环境差异显著[2]，导致野菊花药材品质参差不齐。中药品质的优劣直接影响其临床疗效及用药安全，而中药具有成分复杂、功效多样、临床应用配伍灵活等特点，构建其质量评价体系成为制约中药现代化发展的一大难题[3-4]。各版《中国药典》仅将蒙花苷这一单成分作为野菊花药材的评价指标，基于测定单一化学成分的量来进行野菊花药材的质量评价，较难全面、真实反映其品质，难以解决野菊花药材质量“良莠不齐”的问题，也将进一步阻碍优良野菊新品种选育工作。

中药质量标志物（quality marker，Q-marker）是中药产品质量控制的新概念，具有“存在性”“传递与溯源性”“特有性”“可测性”和中医药理论“物质功效关联性”等“五原则”[5]，指的是与中药的功能属性密切相关的指示性物质，自2016 年提出后至今一直倍受关注[6]。Q-marker 以中药药效物质基础为主线，明确中药有效性-物质基础-质量控制标志性成分的关联关系。此外，鉴于利用外标法对中药多成分同时检测时，要求高纯度标准品，且成本昂贵，王智民等[7-8]基于各化学成分内在的函数关系和比例关系，进行“一测多 评 ”（quantitative analysis of multi-components by single-maker，QAMS）研究，实现使用一个标准品同时定量多个指标成分，该方法在中药材多指标成分含量测定中得到广泛应用[9-12]。

本研究构建适用于野菊花品质评价的HPLC 指纹图谱体系，对全国12 个省份共31 个居群的野菊花种质资源开展品质评价，基于野菊花化学成分及药理学研究进展，结合Q-marker“五原则”综合分析、预测野菊花的Q-marker 候选化合物，并利用预测的野菊花Q-marker 成分进行QAMS 研究，以期为野菊花药材质量评价及优良品种选育奠定基础。

1 仪器、试剂和药品

1.1 仪器

Agilent 1260 高效液相色谱仪，Shimadzu LC-20AD 型高效液相色谱仪，优普UPT-11-20T型超纯水机，净信 JXFSTPRP-24 型球磨仪，声彦 SCQ-5201C 型超声波清洗器，梅特勒-托利多MS105/A 型十万分之一电子分析天平，金思达YS-02 型1.8L 玻璃煎药壶，亿通HY-5型旋转振荡器。

1.2 试剂

绿原酸（批号：18071907）、咖啡酸（批号：20110501）、芦丁（批号：21010804）、木犀草苷（批号：20060301）、异绿原酸B（批号：21012902）、异绿原酸A（批号：21012504）、大波斯菊苷（批号：19010203）、异绿原酸C（批号：21011101）、香叶木素苷（批号：19121602）、黄芩苷（批号：18041002）、蒙花苷（批号：18092812）、田蓟苷（批号：19022004）、香叶木素（批号：19053103）、金合欢素（批号：19061702）对照品购自成都普菲德生物技术有限公司；芹菜素（批号：T04S8F43072）、木犀草素（批号：C29N10Q104574）对照品购自上海源叶生物科技有限公司，经HPLC-UV峰面积归一化法测得其纯度均＞98%。甲醇、乙腈为色谱纯，水为自制超纯水，其余试剂均为分析纯。

1.3 样品

野菊花样品采自湖北中医药大学野菊种质资源圃，样本来源于甘肃、陕西、四川、重庆、贵州、湖南、湖北、河南、安徽、江苏、江西、浙江等12 个省份共31 个居群（表1），所有植株种植于湖北中医药大学药用植物园，于花初开时采收，蒸汽杀青后，60℃烘干。此外，采集了菊属植物菊（小亳菊、怀白菊、怀黄菊、杭菊、滁菊）、异色菊、小红菊、委陵菊、菊花脑和亚菊属矶菊的花器官样品，并购买了野菊花主产区的20批符合2020版《中国药典》质量要求的野菊花药材样品S1-S20（表1）。所有样品经湖北中医药大学胡志刚教授鉴定，其基原准确。

表1 野菊花药材及其他菊花类样品信息

2 方法与结果

2.1 供试品溶液制备

精确称取样品粉末0.5000 g 置50 mL 锥形瓶中，精密称定，加80%甲醇25 mL，称重，超声60 min（功率250 W，频率40 kHz），取出，静置，放冷，80%甲醇补足减失的质量，0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。

2.2 对照品溶液制备

分别精密称取16 种对照品适量，移液器精密加80%甲醇溶解，配制成绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、大波斯菊苷、异绿原酸C、香叶木素苷、黄芩苷、蒙花苷、木犀草素、田蓟苷、芹菜素、香叶木素、金合欢素浓度分别为1.65、0.11、0.20、0.63、1.08、2.14、0.83、1.27、0.21、0.54、1.87、0.27、1.03、0.59、0.16、0.24 mg/mL的对照品溶液；另吸取等量对照品溶液，混匀，配置成混合对照品溶液。

2.3 野菊花标准汤剂制备

称取野菊花饮片100 g，使用1.8 L 玻璃煎药壶，煎煮2 次，一煎加水1200 mL，浸泡30 min，武火煮沸，文火保持微沸20 min，120 目筛网趁热过滤；二煎加水1000 mL，武火煮沸，文火保持微沸15 min，120 目筛网趁热过滤，合并2 次煎液，置冷水浴中迅速冷却，55℃真空减压浓缩至约500 mL 浓缩液，即得野菊花标准汤剂。

2.4 HPLC色谱条件

色谱条件：Welch Ultimate XB-C18 色谱柱（4.6×250 mm，5 μm），柱温30℃，检测波长326 nm，流动相0.1%磷酸（A）-乙腈（B），梯度洗脱（0-8 min，16% B；8-13 min，16% - 20% B；13-30 min，20% B；30-35 min，20%-25%B；35-60 min，25%-30%B；60-70 min，30-60% B；70-80 min，60% B），流速 0.8 mL·min-1，进样量20 μL。理论板数按蒙花苷峰计不低于3000，各组分分离度良好，阴性无干扰，得各色谱峰分离图（图1）。

图1 野菊花药材HPLC色谱图

2.5 HPLC方法学考察

2.5.1 线性关系考察

分别精密吸取2.2 项下各对照品溶液适量，加80%甲醇稀释2 倍并连续稀释6 次，得系列对照品溶液，按2.4 项下色谱条件测定。以对照品质量浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，进行线性回归（表2）。

表2 16个成分的回归方程、相关系数和线性范围

2.5.2 精密度试验

精密称取CQJF-4 样本适量，按2.1 项下方法制备供试品，按2.4 项下色谱条件测定含量，连续重复进样6 次，测定峰面积，并计算绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、大波斯菊苷、异绿原酸C、香叶木素苷、黄芩苷、蒙花苷、木犀草素、田蓟苷、芹菜素、香叶木素及金合欢素的RSD 分别为0.88%、0.71%、0.75%、0.93%、0.62%、1.12%、0.79%、0.81%、1.23%、1.14%、0.89%、0.97%、1.04%、1.19%、0.86% 和0.93%，表明仪器精密度良好。

2.5.3 重复性试验

精密称取CQJF-4 同一样本6 份，按2.1 项下方法制备供试品，按2.4 项下色谱条件测定含量，并计算绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、大波斯菊苷、异绿原酸C、香叶木素苷、黄芩苷、蒙花苷、木犀草素、田蓟苷、芹菜素、香叶木素及金合欢素的平均质量分数分别为1.01%、0.10%、0.04%、0.29%、0.20%、0.67%、0.11%、0.84%、0.11%、0.08%、0.11%、0.08%、0.76%、0.41%、0.01%和0.03%；RSD 分别 为 0.77%、0.95%、0.83%、1.04%、0.85%、0.91%、0.73%、0.89%、1.07%、0.86%、1.14%、0.93%、0.74%、0.73%、0.99%和1.31%，表明该方法重复性良好。

2.5.4 稳定性试验

精密称取CQJF-4 样本适量，按2.1 项下方法制备供试品，按2.4 项下色谱条件测定含量，分别于配制后0、3、6、9、12、24 h 测定各色谱峰峰面积，并计算绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、大波斯菊苷、异绿原酸C、香叶木素苷、黄芩苷、蒙花苷、木犀草素、田蓟苷、芹菜素、香叶木素及金合欢素的RSD 分别为 0.91%、1.03%、0.71%、1.37%、0.94%、0.81%、1.04%、0.96%、0.86%、0.97%、0.83%、1.45%、1.12%、0.98%、1.08% 和1.17%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

2.5.5 加样回收试验

取已知各指标成分含量的CQJF-4样本样品6份，每份约0.25 g，精密称定，按1:1 比例精密加入各对照品，按2.1 项下方法制备供试品，按2.4 项下色谱条件测定含量，并计算绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、大波斯菊苷、异绿原酸C、香叶木素苷、黄芩苷、蒙花苷、木犀草素、田蓟苷、芹菜素、香叶木素及金合欢素的平均回收率依次为99.51%、98.37%、 103.68%、 101.39%、 99.65%、 101.28%、97.71%、 100.28%、 101.59%、 102.63%、 98.74%、97.66%、96.48%、101.92%、103.85%和99.63%；RSD 分别 为 1.31%、0.84%、2.22%、1.08%、0.97%、1.94%、0.96%、1.24%、1.88%、1.27%、1.04%、1.37%、1.08%、1.21%、1.89%和0.88%，表明该方法回收率良好。

2.6 野菊花Q-marker的预测

2.6.1 基于物质存在性的野菊花Q-marker预测

物质存在性是Q-marker 的基本条件之一，即Q-marker 是存在于中药材和中药产品中固有的或加工制备过程中形成的、与中药的功能属性密切相关的化学物质，有明确的化学结构[6]。中药的临床应用形式多以入汤剂煎服，按照刘昌孝等提出的Q-marker的确定与研究方法[6]，中药Q-marker 的预测应从中药饮片标准汤剂的物质成分入手。

野菊花作为花类药材，其药材和饮片虽商品属性不同，但临床使用的药物本质是一致的，均为菊科植物野菊C. indicumL.的干燥头状花序[1]。野菊花汤剂多用水煎煮而得，临床药效成分应多为水溶性成分[13]，郭杰[14]和田伟[15]等人构建了野菊花饮片标准汤剂的UPLC 指纹图谱，分别得到9 个和12 个共有峰，指认出其中7 个峰为酚酸类成分，分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C，2个峰为黄酮类成分木樨草苷和蒙花苷。由此可知野菊花汤剂中的主要化学成分以黄酮类、酚酸类成分为主。

本研究根据中药饮片标准汤剂研究策略[16]，制备了20 批次符合2020 版《中国药典》质量要求的市售野菊花饮片标准汤剂，生成野菊花标准汤剂对照指纹图谱，经文献查阅和与对照品HPLC 色谱图比对，共指认出其中9个主要化学物质，分别为：绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、大波斯菊苷、异绿原酸和蒙花苷。但对于中成药产业，由于其工艺过程增加了不少现代产业元素和技术，很多产品不是以汤剂为基础制备[6]，本研究以野菊花80%甲醇提取物构建其HPLC 指纹图谱体系，指认出其中16 个化合物：绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、大波斯菊苷、异绿原酸C、香叶木素苷、黄芩苷、蒙花苷、木犀草素、田蓟苷、芹菜素、香叶木素和金合欢素。

基于物质存在性原则，综合文献检索和自建野菊花HPLC 指纹图谱的指认结果，野菊花Q-marker 可优先选择野菊花标准汤剂中的11 种成分：新绿原酸，绿原酸，隐绿原酸，异绿原酸B，异绿原酸A，异绿原酸C，咖啡酸，芦丁，木犀草苷，大波斯菊苷，蒙花苷；野菊花药材HPLC 指纹图谱中的另外7 种黄酮类化合物香叶木素苷、黄芩苷、木犀草素、田蓟苷、芹菜素、香叶木素及金合欢素，文献查阅得到的洋蓟素[18]、槲皮素[17]等化学物质可作为补充。

2.6.2 基于传递与溯源性原则的野菊花Q-marker 预测

中药发挥疗效，通常需经煎煮、口服、入血、分布、代谢等生物途径后才能产生相应的生物效应。从质量传递与溯源的角度出发，能被人体吸收并进入血液发挥药效是质量传递体系的最终环节，也是中药质量标志物Q-marker 确定的重要依据[19]。基于质量传递与溯源原则预测野菊花Q-marker 可借助中药系统药理学分析平台（TCMSP）数据库[20]，结合2.6.1 项下预测的野菊花Q-marker候选化合物，检索野菊花中的主要酚酸类及黄酮类化合物，以口服生物利用度OB 指标进行排序，结果见表3。从检索结果看，2.6.1项下筛选的Q-marker候选物质均具有一定的生物利用度，其中生物利用度OB 值大于30%的有槲皮素、蒙花苷、木犀草素、金合欢素、香叶木素和1,3-二咖啡酰奎宁酸等。虽然在TCMSP 系统中未检索到香叶木素苷的药代动力学指标，但现代药理学研究其在体内具有抗炎[21]作用，说明也具有一定的生物利用度。

表3 基于TCMSP系统筛选的野菊花主要酚酸类及黄酮类化合物信息表

2.6.3 基于成分与药效关联的野菊花Q-marker 预测分析

按照传统中医药理论，野菊花主要功效为调中止泻，解毒凉肝，息风散火，破血，通络，消肿等，主要用于治痈肿疔毒，瘰疬，恶疮，眼目热痛等症。野菊花临床单方或复方多用于风热感冒、肺炎、口疮、痈疖及抗菌消炎和降脂降压[22-24]等症。黄酮和酚酸类化合物是野菊花主要的药效组分[13]，具有抑菌[25]、抗炎[26]、降血脂[27]、降血压[28]、抗氧化[29]、抗肿瘤[30-31]、护肝[32-33]、调节免疫[26]、治疗胃肠炎[34]、抗心室重构[35]等药理活性，符合其“清热解毒，泻火平肝”的功效[36]，同时与其归肝经理论有一定的吻合之处[37]。野菊花主要黄酮类及酚酸类成分的药理作用见表4。

表4 野菊花主要黄酮类及酚酸类成分的药理作用

2.6.4 基于成分可测性原则的野菊花Q-marker 预测分析

按照2.4 项下HPLC 色谱条件检测不同野菊及菊属不同物种样品中的绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、蒙花苷、木犀草素、金合欢素、芹菜素、田蓟苷、大波斯菊苷、木犀草苷、芦丁、香叶木素苷、黄芩苷、香叶木素等16 种化学成分的含量。结果表明，16种化学成分皆具有可检测性。

2.6.5 基于特有性原则的野菊花Q-marker 预测分析

中药化学成分复杂，一种中药含有多种化学成分，而不同药材可能含有相同的化学成分。从植物亲缘学入手探讨Q-marker的特有性，可以提高质量控制的针对性和指向性。野菊花及同属植物主要含有黄酮类、酚酸类、萜类、挥发油、氨基酸类及多糖类等成分，其中黄酮类和酚酸类化合物为主要的药效成分[25,94]。本研究按2.1 项下方法制备供试品及2.4 项下色谱条件，测定菊属植物菊（小亳菊、怀白菊、怀黄菊、杭菊、滁菊）、异色菊、小红菊、委陵菊、菊花脑和亚菊属矶菊等样品中11 种黄酮类和5 种酚酸类化合物的含量（图2），从检测结果看，绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C 是菊属中普遍存在且含量较高的化合物，黄酮类和酚酸类化合物在同属不同种及同种不同产地间含量差异明显。结合图1A 可看出，SXFX、CQJF 居群野菊样品的田蓟苷、芹菜素含量和HBMC、HNBY、AHLH 居群野菊样品中的蒙花苷含量均明显高于其他物种，具有一定的物种特有性。

图2 不同菊花样品中16种化合物含量

此外，本研究测定了不同居群野菊样品中11种黄酮类和5 种酚酸类成分含量如图3 所示，从图3A 中可以看出，野菊的5 种酚酸类成分中异绿原酸A 和绿原酸含量普遍较高，而咖啡酸含量普遍较低。异绿原酸B 和异绿原酸C 在不同居群样本间含量差异明显，具有一定居群特有性，可选择与异绿原酸A 和绿原酸共同作为野菊花Q-marker 的候选化合物。从图3B 中可以看出野菊花11种黄酮类成分中木犀草素、大波斯菊苷、黄芩苷、香叶木素苷、芦丁、金合欢素和香叶木素的含量分布较均匀，但含量普遍较低，只有个别样品的含量较高，作为质量标志物容易增加检测误差。野菊花中含量较高的黄酮类成分为蒙花苷、田蓟苷、芹菜素和木犀草苷，但其含量分布不均匀且有两极分化的趋势，高含量化合物只集中分布在少部分的样品中，具有明显的居群特有性特点，亦可选择作为野菊花Q-marker的候选化合物。

图3 不同居群野菊花中16种化合物含量分布热图

2.6.6 野菊花Q-marker的综合预测分析

综上所述，基于中药Q-marker的“五原则”进行预测分析，野菊花中11 种黄酮类和5 种酚酸类成分绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、绿原酸C、蒙花苷、木犀草素、金合欢素、芹菜素、田蓟苷、大波斯菊苷、木犀草苷、芦丁、香叶木素苷、黄芩苷、香叶木素均符合“存在性”“质量传递和可追溯性”“可测性”“药效相关性”原则。绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C是菊属中普遍存在且含量较高的化合物，蒙花苷、田蓟苷和芹菜素是野菊区别同属其他物种的高含量物质。异绿原酸B、异绿原酸C、蒙花苷、田蓟苷、芹菜素和木犀草苷在不同居群样本间含量差异明显，具有一定居群特有性。综合以上预测分析，建议选择绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、蒙花苷、田蓟苷、芹菜素和木犀草苷等含量较高、可检测性较好、具有明显的居群特有性和物种特有性的8种化合物作为野菊花Q-marker的候选化合物。

2.7 野菊花预测Q-marker相对校正因子的确定

2.7.1 相对校正因子计算

精密取2.2 项下系列对照品溶液，按2.4 项下色谱条件测定。以蒙花苷（H）为内参物，按公式fs/i=(As×Wi)/(Ws×Ai（)式中As 为内参物峰面积，Ws 为内参物的量，Ai 为组分i 的峰面积；Wi 为组分i 的量），分别计算绿原酸（A）、木犀草苷（B）、异绿原酸B（C）、异绿原酸A（D）、异绿原酸C（E）、田蓟苷（F）和芹菜素（G）的相对校正因子（表5）。

2.7.2 相对校正因子重现性

考察了 Shimadzu LC-20AD、Aglient1260 型高效液相色谱仪和2 种色谱柱，蒙花苷（H）对绿原酸（A）、木犀草苷（B）、异绿原酸B（C）、异绿原酸A（D）、异绿原酸C（E）、田蓟苷（F）和芹菜素（G）的相对校正因子基本一致。RSD 在1.23%-2.23%，表明不同仪器和色谱柱对各成分的相对校正因子无显著影响，结果稳定可控（表6）。

2.7.3 待测组分峰的定位

利用相对保留值（rs/k）定性，以蒙花苷（H）为内参物，按公式rs/k=tk/ts（式中tk为待测物的保留时间，ts为内参物的保留时间），测定绿原酸（A）、木犀草苷（B）、异绿原酸B（C）、异绿原酸A（D）、异绿原酸C（E）、田蓟苷（F）和芹菜素（G）相对保留时间，结果见表6，RSD 在0.88%-4.07%，表明利用rs/k进行峰定位可行（表7）。

表6 不同仪器和不同色谱柱测的相对校正因子

表7 不同仪器和色谱柱下目标成分相对保留值

2.8 一测多评法（QAMS）与外标法测定结果比较

取CQJF-4 样本样品3 份，按2.1 项下方法制备供试品，按2.4 项下色谱条件测定含量，计算绿原酸、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、田蓟苷和芹菜素的相对校正因子，计算各组分的含量。将一测多评法（QAMS）与外标法测得值进行比较（表8）。所得值RSD 在0.77%-3.06%。表明一测多评可用于野菊花8种黄酮及酚酸成分的含量测定。

表8 一测多评法与外标法测定7种成分含量比较

3 讨论

3.1 野菊花Q-marker综合分析

历年版《中国药典》均仅限定蒙花苷含量，从本研究发现，高含量的蒙花苷只集中分布在少数居群中，全国绝大部分居群的野菊花中的蒙花苷含量均较低，甚至检测不到，该结果与韩正洲[95]的调查结果一致。目前，野菊花药材以野生为主，合格药材的产区非常集中，若野生资源遭受破坏，将严重影响野菊花药材的正常市场供应。市场调查中发现蒙花苷含量达标的野菊花产量不能满足市场需求，而将蒙花苷含量不达标的野菊花掺入高蒙花苷含量野菊花中销售的现象多见。通过查阅相关文献，野菊花总黄酮及其他黄酮类成分的药理作用与蒙花苷基本一致，本研究发现部分居群野菊中的蒙花苷含量虽然较低但其他黄酮类成分含量较高。所以选育优良品种发展人工种植，或优化质量标准扩大产区尤为迫切。本研究在总结野菊花中药材的化学成分、药理作用及传统用药思维的基础上，结合中药质量标志物的核心概念，依据中药质量标志物筛选的原则和方法，从野菊花的功效相关性、可测成分、入血成分及成分特异性等多方面对野菊花的质量标志物进行了分析与预测，建议考虑将野菊花药材中的4 个类黄酮成分（蒙花苷、田蓟苷、芹菜素和木犀草苷）和4 个酚酸类成分（绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B 和异绿原酸C）作为野菊花药材Q-marker的候选化合物。

3.2 野菊花提取条件及检测波长选择

2020 版《中国药典》记载的野菊花供试品提取方法为100%甲醇，加热回流3小时，该方法较费时费力，不便大批量提取与分析。此外，在标准品制备过程中，以100%甲醇作为溶剂难以完全溶解标准品，直接影响含量测定准确性。超声提取分离过程，具有提高提取分离率、缩短提取时间、节约成本、可批量提取等优点。本研究以蒙花苷的百分含量为检测指标，分别考察了不同提取方法（回流和超声提取）、不同体积分数提取溶剂（甲醇、90%甲醇、80%甲醇、70%甲醇）、不同提取溶剂体积（料液比1:25、1:50、1:100 mL）和不同提取时间（30、40、50、60、70 min）。综合考虑提取时间、溶剂用量、蒙花苷含量，最终确定最佳提取方法为：0.5 g 野菊花粉末，使用80%甲醇25 mL，超声提取60 min。根据《中国药典》及文献查阅，比较了254 nm、326 nm、334 nm、348 nm 和 355 nm 等波长 HPLC 色谱图，发现在326 nm 的检出物质种类较多、峰型较好，且基线平稳，最终选择326 nm作为最佳检测波长。

3.3 野菊花QAMS的构建

多指标成分的同时检测增加了实验的操作难度及检测成本，QAMS可在缺乏标准品的条件下，借助各成分间相对校正因子实现“一对多”检测，采用QAMS可提高中药成分检测效率，降低检测费用，且更加全面有效的评价中药的整体质量。本研究以药典规定的检测成分蒙花苷为内参物，采用QAMS 实现了对野菊花8 个有效成分同步检测，经验证该方法快速、简单、准确，且检测成本低，能实现仅使用一个标准品对野菊花中多药效成分含量同时测定，进而实现对野菊花药材的综合质量评价。

4 结论

本研究构建了适用于野菊花药材品质评价的HPLC 体系，首次以16 个指标成分对全国31 个居群野菊花种质资源进行质量评价，并以Q-marker 的“五原则”为指导，结合野菊花化学成分及药理学研究进展，最终确定以绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、蒙花苷、田蓟苷、芹菜素和木犀草苷8 个指标成分作为其Q-marker的候选化合物。此外，首次利用预测的野菊花Q-marker 成分进行QAMS 研究，实现以单个成分蒙花苷作为参照物的野菊花Q-marker 多指标成分的同时定量分析，为野菊花药材质量评价及优良品种选育奠定基础。