CTA参数联合miR-21、miR-140-3p对冠状动脉狭窄的诊断价值

张烨

陆军军医大学第二附属医院放射科，重庆 400000

冠心病主要由冠状动脉血管粥样硬化所致的血管狭窄/阻塞引发，而血管腔狭窄/阻塞作为冠心病患者心绞痛、心律失常、心肌梗死等临床症状发生诱因，严重威胁患者生命健康，因此有效诊断干预对提供患者生存质量具有重要裨益[1-2]。冠脉数字减影血管造影术（coronary angiography, CAG）作为临床评估冠心病狭窄程度的金标准，具有一定创伤性，且检查费用检查较高，临床应用中存在一定局限性[3]。随临床检查技术发展，螺旋CT 冠脉造影术（computed tomography angiography, CTA）在疾病检查中得到广泛应用[4]。研究表明，CTA 检查可对冠脉管腔狭窄程度作出直观反映，也可对斑块病变作出准确评估，为临床冠心病诊断及治疗提供重要依据[5-6]。而微小RNA（miRNA）作为单链小分子RNA，可介导细胞分化、增殖、凋亡等病理生理过程。相关学者指出，miRNA 水平异常可能介导缺血性心脏病的发生[7]。基于上述背景，本研究选取2020年3月—2021年3月于陆军军医大学第二附属医院就诊的89 例冠心病患者作为研究对象，分析CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 联合对冠状动脉狭窄的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院就诊的89 例冠心病患者作为研究对象，包括男47 例，女42 例；年龄49～70 岁，平均（59.50±8.92）岁。本研究得到院内医学伦理委员会批准，患者知情同意本研究。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：符合《非ST 段抬高型急性冠状动脉综合征基层诊疗指南（2019年）》[8]中冠状动脉狭窄相关诊断标准；心律整齐且控制在80 次/min 以下；存在胸闷、心前区不适、心电图异常表现；CAG 检查确诊为冠状动脉粥样硬化。

排除标准[9]：合并肝肾等脏器功能不全者；呼吸功能障碍者；此前接受经冠状动脉介入、搭桥术史、起搏器安装或瓣膜置换者；合并瓣膜性心脏病者；合并血液系统疾病、全身免疫性疾病者；恶性肿瘤者；实验检查过敏者。

1.3 方法

CTA 检查：采用西门子SOMATOM Definition Flash及AS 128 层螺旋CT，检查前，要求患者保持空腹状态，指导受检者练习呼吸，使受检者再一次CT 扫描中可以屏气，避免呼吸运动伪影。扫描前舌下含0.5 mg 硝酸异山梨酯（国药准字 H37022795），采用双筒高压注射器经外静脉注射造影剂（碘美普尔）（国药准字 H20067799）40～80 mL（按体质指数换算），随后追加50 mL 生理盐水（国药准字 S10870001），注射速率为5 mL/s。采用Bolus Tacking 触发扫描，感兴趣区放在主动脉弓层面，延迟6 s后跟踪触发，阈值为100 Hu，采用回顾性心电门控技术（有期前收缩者采用前瞻性心电门控技术），以气管隆突下1 cm 至膈下2 cm 为扫描范围，设置管电压参数为120 kV，采用自动管电流技术，准直器宽0.6 mm，螺距0.2～0.5，层厚0.75 mm，重建间隔0.5 mm，采集矩阵512×512，显示矩阵1 024×1 024。卷积函数值班B26f，延迟时间5 s，屏气时间7～10 s，检查完毕后通过处理工作站进行分析、重建。采用syngo，via 软件，用容积再现重建（volume rendering, VR）、最高最大密度投影（maximum intensity proj ection, MIP）、多平面重组、曲面重建（curvey plain reconstruction, CPR）等多种重建方法，多角度观察冠状动脉CT 血管成像参数。

miR-21、miR-140-3p 检查：于接诊当日抽取所有受试者5 mL 空腹外周静脉血，离心处理20 min（转速2 500 r/min，离心半径10 cm），分离上清于为含RNA 酶试管内，-80℃低温保存待检。采用RT-PCR法测定miR-21、miR-140-3p 水平，采用microRNA 提取分离试剂盒分离血清内miR-21、miR-140-3p 细胞总RNA，采用TaqMan microRNA 反转录试剂盒及SYBR Premix ExTaq Ⅱ kit 分别做microRNA 逆 转 录 及定量PCR 反应，设置反应条件为预火95℃，预变性30 min，取出降温至90℃，变性5 s，迅速降温至58℃，退火20 s，温度保持60℃，延伸45 s，40 个循环，重复实验3 次。 内参为U6（上游引物：5`-GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3`；下游引物：5`-GCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3`），采用2-△△Ct方法计算miR-21、miR-140-3p 相对水平倍数。miR-21 上游引物：5`-ACTCTCCAGCTGGGTAGCTTATCAGACTGAT-3`；下游引物：5`-ACTGGTGTCGTGGAGTCG-3`；miR-140-3p上游引物：5`-ACACTCCAGCTGGGAGGCGGGGCGCCG CGGGA-3；下游引物：5`-CTCAACTGGTGTCGTGGA-3`。

1.4 观察指标

①CTA 评估标准：轻度狭窄：冠脉斑块短小、无软斑，狭窄计算指数得值为25%～50%；中度狭窄：冠脉存在肺钙化斑和/或混合斑块，狭窄计算指数得值为51%～75%；重度狭窄：冠脉存在非钙化斑和/或混合斑块，狭窄计算指数得值＞75%。狭窄计算指数公式：（狭窄部位近心端的血管直径-最狭窄管腔的直径）/最狭窄管腔近心端血管直径×100.00%。②以CGA 为金标准，比较不同检查方式冠状动脉狭窄检出情况。③采用ROC 曲线分析CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 及3 项联合对冠状动脉狭窄的诊断价值。

1.5 统计方法

采用SPSS 21.0 统计学软件进行数据处理，计数资料以频数和百分比（%）表示，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CTA 影像学分析

右冠状动脉主干近、中段以非钙化斑块为主，同时存在混合斑块，管腔内重度狭窄及部分管腔全闭。见图1。

图1 CPR 图像、MIP 图像Figure 1 CPR image， MIP image

2.2 不同检查方式冠状动脉狭窄检出情况比较

4 种诊断方式对冠状动脉狭窄总检出结果比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；相比CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 检查，3 项联合检查冠状动脉狭窄检出率较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 不同检查方式冠状动脉狭窄检出情况比较Table 1 Comparison of coronary artery stenosis detection by different examination modalities

2.3 不同检查方式与CGA 结果相比

本文研究中CGA 检查显示，89 例冠心病患者中冠脉轻度狭窄患者39 例、冠脉中度狭窄患者28 例、冠脉重度狭窄患者22 例。CTA 参数、miR-21、miR-140-3p及3 项联合对冠状动脉狭窄检查结果见表2。

表2 不同检查方式与CGA 结果相比Table 2 Comparison of different examination methods with CGA results

2.4 ROC 曲线分析CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 及3项联合对冠状动脉狭窄的诊断价值

与CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 相比，3 项联合对冠状动脉狭窄的诊断价值较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 ROC 曲线分析CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 及3 项联合对冠状动脉狭窄的诊断价值Table 3 ROC curve analysis of CTA parameters, miR-21, miR-140-3p and the combination of the three on the diagnostic value of coronary artery stenosis

3 讨论

冠状动脉疾病作为复杂心血管疾病，主要由血管腔狭窄/闭塞、动脉粥样硬化引发，严重影响患者生存质量[10]。研究表明，冠脉病变患者缺乏典型临床表现，冠脉病变程度差异较大，极大增加了临床病情诊断难度，而CAG 作为冠心病冠脉狭窄评估的金标准，会对患者机体产生一定创伤，可能会引发严重并发症，故探寻更为准确、安全的诊断方式对患者干预及预后具有独特意义[11-12]。

本文研究指出，通过CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 联合应用对冠状动脉狭窄患者检查具有良好的诊断价值，可准确反映患者冠状动脉狭窄情况，为治疗方案选择提供重要参考。研究表明，miRNAs 可通过与靶基因结合而沉默靶基因水平，抑制下游信号通路活性，从而发挥作用，同时miRNAs 可通过外泌体实现细胞间信号传递，参与细胞间信息交流[13-14]。部分miRNs 已证实在维持内皮细胞稳定、保护心肌细胞等方面发挥重要作用，是心血管疾病潜在的生物标志物[15]。研究表明，冠脉斑块不稳定可诱发冠状动脉病变，miR-21 参与动脉粥样硬化过程，与炎症相关的miENAs 通过调控炎性细胞因子而启动、影响炎症反应，导致炎症递质对冠脉内斑块稳定性造成影响[16]。相关学者表明，miR-21 水平与Gensini 评分存在相关性，且随冠心病患者疾病程度增加而增加，由此表明miR-21 可造成冠状动脉供血异常[17]。而miR-140-3 作为TLR4 上游miRNAs，两者呈负调控关系。相关研究表明，冠心病患者外周血中miR-140-3p 呈异常低水平，且冠脉狭窄患者miR-140-3p 水平低于无狭窄患者，由此表明血液循环中miR-140-3p 水平可能与冠心病、冠状动脉粥样硬化相关[18]。相关研究表明，CTA 可准确反映较小冠状动脉血管病变，并通过VR、MPR、CPR 等技术对血管进行多角度观察，极大提高冠状动脉狭窄的诊断准确性[19]。而斑块数、非钙化斑块体积、钙化斑块体积、总斑块体积等CT血管成像分析定量参数均反映了冠状动脉的狭窄程度，相关研究表明，冠心病患者斑块数、非钙化斑块体积、钙化斑块体积、总斑块体积等参数明显高于健康者，由此表明通过监测CTA 参数变化可对冠状动脉狭窄患者冠脉狭窄程度做出有效诊断[20]。CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 检查在冠状动脉狭窄诊断各具有优势，综合性诊断更能为临床诊断提供准确依据，证实上述检查方式联合应用诊断价值更高。总的来说，相比CTA 参数（69.66%）、miR-21（49.43%）、miR-140-3p（50.56%）检查，3 项联合检查冠状动脉狭窄检出率较高（89.88%）（P＜0.05），该结果和陈汉章[21]的结果大致相同，其研究结果表明：CTA 联合诊断，其符合率为75.00%，高于单一方法检测的符合率（46.05%、35.53%）（P＜0.05）。

综上所述，CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 联合应用可有效检出冠状动脉狭窄情况，明确冠脉狭窄程度，为干预、预后评估提供重要参考，值得临床推广与应用。但研究中样本量选取较少，且未对CTA 参数、miR-21、miR-140-3p 与患者预后情况进行分析，导致研究存在局限性，需进一步增加样本量进行多中心研究证实。