美沙拉嗪结合锡类散灌肠治疗溃疡性结肠炎的效果及对患者免疫功能和细胞因子的影响

蔡 怡 贺明洁 罗培培

江苏大学附属武进医院消化内科，江苏常州 213000

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种由多种原因引起的结肠慢性复发性炎症。近年来，UC 在中国的发病率显著增加。大多数患者具有复发性的特点，轻度和长期缓解的UC 患者预后良好，但慢性或复发性患者预后较差，病程较长的患者癌变概率较高[1]。肠道菌群主要参与肠道内物质的分解代谢，以维持正常的生理功能，当疾病发生时，肠道菌群的数量和类型会发生变化。肠道菌群失调是导致免疫反应紊乱和细胞炎症反应的重要因素，而免疫反应紊乱和细胞炎症反应是导致UC 的重要因素[2]。目前临床上对UC 尚无有效的治疗方法。中医治疗有其独特的优势，中西医结合治疗UC 具有广阔的发展前景[3]。美沙拉嗪当前仍然是UC 的一线药物，然而，研究发现，随着使用时间的增加，其治疗效果会下降，一些患者会出现明显的胃肠道不适，严重甚至耐药[4]。提高UC 患者的治疗效果已成为一个非常重要的研究课题。锡类散是一种古方中成药，国内研究已将其应用于UC 患者，疗效显著[5]。本研究选取在江苏大学附属武进医院诊治的76 例UC 患者作为研究对象，主要探讨美沙拉嗪结合锡类散灌肠对UC 的疗效，并分析此治疗方式对患者免疫功能和细胞因子的影响，旨在为临床UC 的治疗提供一定的参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2021年1月在江苏大学附属武进医院诊治的76 例UC 患者作为研究对象，按随机数字表法将其分为对照组和研究组，每组各38 例。对照组中，男19 例，女19 例；年龄23～55 岁，平均（30.17±2.06）岁；病程1～5年，平均（3.03±1.06）年。观察组中，男17 例，女21 例；年龄23～56 岁，平均（30.24±2.17）岁；病程1.5～6年，平均（3.02±1.17）年。两组患者性别、年龄、病程等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经江苏大学附属武进医院医学伦理委员会审核及同意，所有患者均知晓本研究情况并签署知情同意书。

纳入标准：①患者均符合UC 诊断标准[6]；②所有患者的一般资料齐全；③主动配合研究者。排除标准：①合并严重基础疾病者；②感染性腹泻者；③伴有其他器质性肠病者；④凝血功能异常者；⑤妊娠和哺乳妇女；⑥有精神和认知障碍患者。

1.2 方法

对照组患者给予美沙拉嗪（葵花药业集团佳木斯鹿灵制药有限公司，国药准字H19980148，生产批号：20170326，规格：0.25 g）1 g 口服，3 次/d。

研究组患者在对照组的基础上给予锡类散（江苏信邦制药有限公司，国药准字Z32020770，生产批号：20170624，规格：1 g）1.0 g 加入0.9%生理盐水100 ml混匀，保留灌肠，每晚临睡前1 次，灌肠保留时间3～4 h，连用3 周，休息1 周。

两组患者的疗程均为8 周，治疗期间禁止使用其他治疗UC 的药物。注意补充高热量、高蛋白、易消化的食物，不吃冷、辣、刺激性食物，确保足够的休息时间。

1.3 观察指标及评价标准

1.3.1 临床疗效评价 参照《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见（2018年·北京）》[7]对两组患者的临床疗效进行评价。显效：症状消失，结肠镜检查结肠黏膜完全恢复正常；有效：症状明显改善，结肠镜检查结肠黏膜轻度炎症；无效：症状和结肠镜检查均无明显改善。总有效率=（显效+有效）例数/总例数×100%。

1.3.2 免疫指标 采集所有患者清晨抗凝静脉血5 ml，由检验科使用CyFlow Cube6 流式细胞仪（广州吉源生物科技有限公司）检测患者的辅助性T 细胞（helper T cells，Th17）和调节性T 细胞（regulatory T cell，Treg）、T 细胞亚群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）、自然杀伤细胞（natural killer cell，NK）水平，采用BS-220 全自动生化分析仪（南京贝登医疗股份有限公司）以免疫比浊法检测免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM 水平。试剂盒均购自上海瑞番生物科技有限公司，严格按试剂盒说明书操作。

1.3.3 细胞因子 取所有患者清晨空腹外周静脉血5 ml，4℃，转速为2000 r/min，离心半径为10 cm，离心10 min，于-70℃保存待测。观察比较两组患者治疗前后的血清白细胞介素（interleukin，IL）10、IL-18、IL-6、IL-4、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的变化，通过酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）进行检测，试剂盒购于上海西唐生物科技有限公司，严格按试剂盒说明书操作。

1.3.4 不良反应 观察两组患者治疗期间的不良反应（腹部不适、恶心、纳差）发生情况。

1.4 统计学方法

采用SPSS 26.0 统计学软件进行数据分析，符合正态分布的计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用独立样本t 检验，组内比较采用配对样本t 检验；计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者临床疗效的比较

研究组患者的治疗总有效率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 两组患者临床疗效的比较[n（%）]

2.2 两组患者治疗前后Th17、Treg 表达水平的比较

两组患者治疗前的Th17、Treg 表达水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；两组患者治疗后的Th17表达水平低于治疗前，Treg 表达水平高于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；研究组患者治疗后的Th17表达水平低于对照组，Treg 表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2 两组患者治疗前后Th17、Treg 表达水平的比较（%，±s）

表2 两组患者治疗前后Th17、Treg 表达水平的比较（%，±s）

对照组（n=38）治疗前治疗后t 值P 值研究组（n=38）治疗前治疗后t 值P 值t 治疗前组间比较值P 治疗前组间比较值t 治疗后组间比较值P 治疗后组间比较值5.89±1.23 4.21±1.02 6.481＜0.001 5.88±1.21 3.16±1.03 10.552＜0.001 0.036 0.970 4.465＜0.001 5.39±1.02 7.51±1.62 6.827＜0.001 5.40±0.22 8.62±1.42 13.814＜0.001 0.059 0.950 3.176＜0.001组别 Th17 Treg

2.3 两组患者治疗前后T 细胞亚群及NK 水平的比较

两组患者治疗前的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；两组患者治疗后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于治疗前，CD8+水平低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；研究组患者治疗后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于对照组，CD8+水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表3）。

表3 两组患者治疗前后T 细胞亚群及NK 水平的比较（±s）

表3 两组患者治疗前后T 细胞亚群及NK 水平的比较（±s）

对照组（n=38）治疗前治疗后t 值P 值研究组（n=38）治疗前治疗后t 值P 值t 治疗前组间比较值P 治疗前组间比较值t 治疗后组间比较值P 治疗后组间比较值32.12±3.22 38.86±2.17 10.700＜0.001 32.09±3.17 44.52±3.02 17.501＜0.001 0.041 0.970 9.382＜0.001 34.26±2.09 31.06±2.17 6.547＜0.001 34.17±2.06 26.23±3.01 13.419＜0.001 0.189 0.850 8.024＜0.001 1.06±0.32 1.42±0.22 5.715＜0.001 1.07±0.31 1.92±0.22 13.784＜0.001 0.138 0.890 9.907＜0.001 10.35±2.01 13.68±2.06 7.132＜0.001 10.34±2.11 17.28±2.31 13.674＜0.001 0.021 0.980 7.170＜0.001组别 CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+ NK（%）

2.4 两组患者治疗前后免疫球蛋白水平的比较

两组患者治疗前的IgA、IgG、IgM 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；两组患者治疗后的IgA、IgG、IgM 水平低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）；研究组患者治疗后的IgA、IgG、IgM 水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表4）。

表4 两组患者治疗前后免疫球蛋白水平的比较（g/L，±s）

表4 两组患者治疗前后免疫球蛋白水平的比较（g/L，±s）

对照组（n=38）治疗前治疗后t 值P 值研究组（n=38）治疗前治疗后t 值P 值t 治疗前组间比较值P 治疗前组间比较值t 治疗后组间比较值P 治疗后组间比较值1.97±0.22 1.72±0.32 3.969＜0.001 1.99±0.32 1.34±0.23 10.168＜0.001 0.317 0.350 5.944＜0.001 12.49±0.26 10.36±0.36 29.568＜0.001 12.51±0.26 8.53±0.28 64.209＜0.001 0.335 0.740 24.735＜0.001 1.37±0.22 1.24±0.39 2.202 0.030 1.38±0.21 1.10±0.01 8.210＜0.001 0.203 0.840 2.212 0.030组别 IgA IgG IgM

2.5 两组患者治疗前后细胞因子水平的比较

两组患者治疗前的IL-10、IL-4、IL-18、IL-6、TNF-α 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；两组患者治疗后的IL-10、IL-4 水平均高于治疗前，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05）； 研究组患者治疗后的IL-10、IL-4 水平均高于对照组，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表5）。

表5 两组患者治疗前后细胞因子水平的比较（ng/ml，±s）

表5 两组患者治疗前后细胞因子水平的比较（ng/ml，±s）

对照组（n=38）治疗前治疗后t 值P 值研究组（n=38）治疗前治疗后t 值P 值t 治疗前组间比较值P 治疗前组间比较值t 治疗后组间比较值P 治疗后组间比较值10.85±2.17 15.22±3.06 7.181＜0.001 10.84±2.06 18.20±3.22 11.869＜0.001 0.021 0.980 4.135＜0.001 197.23±20.16 128.22±20.17 14.917＜0.001 198.16±20.22 88.26±10.16 29.938＜0.001 0.201 0.840 10.907＜0.001 275.23±30.13 176.25±20.17 16.828＜0.001 275.22±30.06 155.26±30.25 17.340＜0.001 0.001 1.000 3.559＜0.001 7.86±2.16 15.03±5.01 8.101＜0.001 7.87±2.09 20.22±5.13 13.743＜0.001＜0.001 1.000 4.462＜0.001 115.23±20.12 72.13±10.22 11.773＜0.001 114.17±20.06 56.27±10.26 15.841＜0.001 0.230 0.820 6.751＜0.001组别 IL-10 IL-18 IL-6 IL-4 TNF-α

2.6 两组患者不良反应总发生率的比较

两组患者的不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表6）。

表6 两组患者不良反应总发生率的比较[n（%）]

3 讨论

UC 的发病机制尚不清楚。一些学者认为炎症细胞因子的失衡是UC 发病的关键。促炎因子水平的升高会损伤肠黏膜并引起疾病，炎症反应的程度与病情和预后有关。肠道免疫功能紊乱是UC 发生、发展的重要环节[8]。研究表明，肠黏膜受损后，其通透性增加，肠组织长期暴露于大量抗原，导致肠道免疫系统反应和误认，激活巨噬和淋巴细胞，释放细胞因子和炎症介质，并使全身和局部免疫系统紊乱，组织受损而引发UC[9]。因此，可以从细胞因子和免疫功能两方面入手，找到科学有效的治疗方法，对提高UC 的临床疗效具有十分重要的临床意义。

5-氨基水杨酸（5-aminosalicylic acid，5-ASA）是治疗UC 的首选药物。5-ASA 可抑制肠黏膜中前列腺素的合成和炎症介质（如白三烯）的形成，具有抗炎作用，非常适合UC 患者。美沙拉嗪通过乙基纤维素包裹5-ASA，其pH 依赖性释放微丸不易被胃酸分解，在胃内失效，在肠道碱性环境下释放5-ASA，发挥其功效。因为其包含两个5-ASA 分子，所以其比其他5-ASA 制剂具有显著优势[10]。锡类散主要由象牙屑、青黛、人工牛黄、冰片、珍珠、人指甲、壁钱炭等组成，具有清热解毒、活血止痛、收敛伤口、祛除腐肉的功效[11]。有研究证实，锡类散能消除肠黏膜充血水肿，促进黏膜愈合[12]。

本研究结果显示，研究组患者的治疗总有效率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），提示美沙拉嗪结合锡类散灌肠可提升UC 患者的临床治疗效果，分析原因：一方面，联合用药具有协同作用；另一方面，保留灌肠给药药效优于传统灌肠方法。在免疫功能方面，本研究结果显示，研究组患者治疗后的Th17表达水平低于对照组，Treg 表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；研究组患者治疗后的CD4+、CD4+/CD8+、NK 水平高于对照组，CD8+水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；研究组患者治疗后的IgA、IgG、IgM 水平低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），提示美沙拉嗪结合锡类散灌肠可改善UC 患者的免疫功能。细胞因子方面，本研究结果显示，研究组患者治疗后的IL-10、IL-4 水平均高于对照组，IL-18、IL-6、TNF-α 水平均低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），提示美沙拉嗪结合锡类散灌肠可减轻炎症反应，分析原因，改善肠道免疫功能和炎症可能是美沙拉嗪结合锡类散灌肠的治疗目标。美沙拉嗪和锡类散的抗炎作用通过抑制炎症细胞因子的释放，改善肠道炎症环境，调节免疫细胞水平，纠正肠黏膜免疫功能紊乱[13]。美沙拉嗪可抑制UC 患者病原体繁殖，改善肠道炎症，平衡肠道菌群，增强免疫力，显著改善患者症状[14]。锡类散具有清热解毒、去腐生肌的功效[3]。有研究认为，锡类散有助于提高Toll样受体4 的表达和核转录因子κB 的激活水平，减少炎性细胞因子的释放，抑制炎症和免疫反应，修复黏膜和愈合溃疡面[15]。另外，不良反应方面，本研究结果显示，两组患者的不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05），提示美沙拉嗪结合锡类散灌肠不会增加不良反应发生，安全性较高。

综上所述，美沙拉嗪结合锡类散灌肠可提升UC患者的临床治疗效果，改善UC 患者的免疫功能，减轻炎症反应，对免疫指标和细胞因子均产生不同程度的影响，且安全性较高。