辣木基质对云南羊肚菌栽培特性的影响*

张 慧，钱 泉，杨钺戈，赵自爱，周锦燕，张 芸，李 跃，李树红，曾千春，2**

（1.云南农业大学农学与生物技术学院，云南 昆明 650201；2.云南农业大学云南辣木研究所，云南 昆明 650201；3.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，云南 昆明 650223）

羊肚菌（Morchella spp.）隶属于子囊菌亚门（Ascomycotina） 盘菌纲 （Discomycetes） 盘 菌 目（Pezizales） 羊肚菌科 （Morohellaceae） 羊肚菌属（Morchella），是珍贵的食用和药用真菌[1-2]。随着人们生活水平的日益提高，更多人选择食药同源的羊肚菌作为营养滋补佳品。20世纪80年代初，我国开始羊肚菌人工栽培技术的研究[1-2]，目前梯棱羊肚菌（Morchella importuna）、六妹羊肚菌 （Morchella sextelata） 在我国的栽培量位居前列[3-5]。辣木（Moringa oleifera Lam），属辣木科 （Moringaceae） 辣木属（Moringa）植物，多年生乔木，速生，且叶片、茎秆中含有丰富的矿物质、维生素和氨基酸[6-7]。在云南，菜用型辣木每年都要进行修剪，产生大量废弃茎杆，将其添加至羊肚菌栽培基质中，可以充分利用辣木茎杆中的营养成分，也能解决辣木茎杆废弃资源的转化利用问题，丰富了羊肚菌栽培基质的原料来源，为栽培出更高产优质的羊肚菌提供更多可能。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

菌株YD1号（梯棱羊肚菌）、YD4号（六妹羊肚菌）来源于云南省农业科学院，生物技术与种质资源研究所食用菌研究中心。羊肚菌母种培养基选择PDY培养基（葡萄糖20 g、琼脂15 g、蛋白胨2 g、酵母粉2 g、磷酸二氢钾0.2 g，水1 000 mL，自然pH），配好后用电磁炉加热，使琼脂溶解，装入三角烧瓶，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌。接种后封口，放入23℃恒温培养箱中培养，约7 d～10 d菌丝长满，母种制备成功，放入4℃冰箱中储存备用。

1.2 基质配比

栽培袋中的基质配比分为2组，配方组成见表1。

表1 基质配比Tab.1 Formula proportion

由表1所示，基质配方分为辣木组配方和对照组（杂木屑）配方，辣木屑[8]、杂木屑、麦壳提前润湿12 h，将各个配方基质分别搅拌均匀后装入18 cm×35 cm×0.05 cm的菌袋，每个菌袋装基质500 g，每组12袋（每块地可起3垄，每垄需播撒4袋，每袋500 g），控制含水量在55%～60%，放入灭菌锅灭菌2 h（121℃、0.15 MPa）[3]，待冷却后，在超净工作台上接入母种15袋，后放入菌丝培养室培养。

1.3 羊肚菌菌丝生长速率测定方法

接种后，每隔2 d～4 d用记号笔在菌袋上划线记录一次，直至菌丝长满整袋。每组配方从中任意取出12袋计算平均速率，每2条相临划线间任取3段距离，计算平均值，得出菌丝平均生长速率；最后再将菌袋上所有相临划线间的平均生长速率取平均值，得到整个菌丝生长阶段的菌丝平均生长速率。记录菌丝生长过程中菌核的发生时间及成熟时间，菌核从白色小点逐渐变成黄色即为菌核成熟[9-10]。

1.4 羊肚菌大棚播种及管理

将菌株YD1号（梯棱羊肚菌） 和YD4号（六妹羊肚菌）播种于云南省农业科学院嵩明现代试验基地大棚，羊肚菌菌丝长满整袋即可进行大田播种栽培。大田播种时，将羊肚菌栽培袋撕开、捏碎放入小盆，播种深度约4 cm～5 cm。每小区播量为4袋（1.76袋/m2），播撒完毕后覆土，浇水，播种7 d后采用滴灌（每天打开滴灌浇水10 min或每2天浇水15 min，采用滴灌会降低浇水时对表面菌丝的伤害）[9-10]。

1.5 羊肚菌成分测定方法

大棚羊肚菌出菇后进行采收、称重，得到每试验组产量数据。将田间最先收获的辣木基质栽培的羊肚菌及对照送至昆明市农业农村部产品质量监督检测测试中心，测定其粗蛋白按照GB 5009.5-2016食品安全国家标准食品中蛋白质的测定[20]方法、总糖按照GB 5009.7-2016食品安全国家标准食品中还原糖的测定[21]方法、水分按照GB 5009.3-2016食品安全国家标准食品中水分的测定[22-23]方法、灰分按照GB 5009.4-2016食品安全国家标准食品中灰分的测定[24]方法、脂肪按照GB 5009.6-2016食品安全国家标准食品中脂肪的测定[25]方法的含量，每个检测项目设置3个重复[11]。

1.6 数据处理

将菌种培养期间和栽培阶段记录的试验数据，利用统计软件Excel 2016和DPS 7.05对所得数据进行统计分析。对不同配方处理间的差异进行单因素方差分析和Duncan氏多重比较（P<0.05）。

2 结果与分析

2.1 不同培养基质羊肚菌菌核菌丝生长情况

不同配方基质羊肚菌菌核及菌丝的生长情况见表2、表3。

表2结果表明，基质中添加60%辣木茎杆栽培的2种羊肚菌（MR1组和MR4组） 菌核出现时间均比对照组提前2 d；菌核成熟时间均比对照组提前3 d～4 d。2种羊肚菌菌丝生长速度MR1组为12.594 3 mm·d-1、MR4 组 （六妹羊肚菌） 为 15.932 1 mm·d-1，显著快于对照组。不同栽培基质羊肚菌菌丝满袋情况见表3。

表2 不同基质羊肚菌菌核菌丝生长情况Tab.2 Growth of Morchella spp.sclerotium in different substrates

表3 不同基质羊肚菌菌丝满袋天数Tab.3 Full bag days of Morchells spp.mycelium with different substrates

由表3可知，添加辣木茎杆基质培养的羊肚菌首袋满袋菌丝均早于对照2 d；末袋均早于3 d。

2.2 大棚播种生长状态

2种羊肚菌不同基质栽培后移入大棚栽培5 d的生长情况见图1。播种50 d后的生长情况见图2。

图1 播种5 d后羊肚菌生长情况Fig.1 Growth of Morchella spp.after sowing for 5 days

由图1、图2所示，在大田分别播种4种羊肚菌栽培种，播种5 d后，MR1组开始形成大量的菌霜，CK1无明显变化；MR4组出现零散的少量菌霜，CK4无明显变化；播种50 d后，MR1组发现土面有类似于羊肚菌原基的物质形成；播种69 d后，在MR1组土面出现羊肚菌幼菇，证明了用辣木茎杆作替代基质可以栽培羊肚菌；播种80 d后，CK1、CK4开始陆续出菇。

图2 梯棱羊肚菌在辣木基质下的生长情况Fig.2 Growth of Morchella importuna under Moringa oleifera stem substrate

2.3 羊肚菌产量测定

供试4组羊肚菌各在21.12 m2样地中的5次采收结果见表4。

由表4可知，样地中梯棱羊肚菌（MR1组）添加辣木培养出的鲜菌总产量为8.4 kg，高于对照组2.3 kg；六妹羊肚菌（MR4组） 添加辣木培养出的鲜菇总产量为2.9 kg，对照组为3.3 kg，低于对照组。在第5次采收时，梯棱羊肚菌（MR1组） 还在持续有幼菇长出，六妹羊肚菌（MR4组）几乎结束了整个生长周期。

表4 羊肚菌产量Tab.4 Yield of Morchella spp.

2.4 辣木基质栽培六妹羊肚菌成分测定

首次收获的辣木基质培养六妹羊肚菌的成分含量统计见图3。

图3 辣木基质培养六妹羊肚菌成分含量Fig.3 Component content of Morchella sextelata cultured in Moringa oleifera substrate

由图3所示，六妹羊肚菌辣木组（MR4组） 蛋白质、总糖、水分、灰分、粗脂肪含量依次为3.67%、0.42%、88.10%、1.09%、7.02%；与对照组（CK4组）相比，蛋白质含量提高0.27%，粗脂肪含量提高1.71%，灰分含量降低0.21%。从辣木基质培养羊肚菌的成分分析来看，辣木不仅可以作为替代基质来栽培羊肚菌，而且可以提高羊肚菌品质。

3 结论与讨论

3.1 辣木基质对菌核菌丝生长情况的影响

以辣木茎杆为基质栽培梯棱羊肚菌和六妹羊肚菌，均能使菌核更早发生、更快成熟，并能加速菌丝生长，缩短菌丝培养时间。菌丝体和菌核的产生是羊肚菌子实体形成的重要阶段，而不同的基质对菌丝和菌核产生的时间和数量有显著影响[12]。研究中对照组的菌丝生长速度与贺国强等[13]研究结果一致。而采用辣木茎杆作基质栽培的羊肚菌菌丝生长速度有显著提高，可以缩短生长周期。故在后续研究中，可尝试不同比例的辣木配方栽培羊肚菌，为进一步筛选最适羊肚菌栽培的辣木配方。

3.2 播种后对羊肚菌产量的影响

研究结果证实了采用辣木茎杆作基质可栽培羊肚菌，并且可以提高梯棱羊肚菌的产菌量，带来更高的经济效益；与六妹羊肚菌相比，辣木配方更适宜于栽培梯棱羊肚菌。储甲松等[14]采用12 m2的试验地栽培野生羊肚菌 [Morehella esculenta （L.）Pers.]，其产量在1.11 kg～1.22 kg，与本研究中六妹羊肚菌的产量相近。对于羊肚菌的人工栽培，目前有较多研究，有的试验产量很高，但重复性普遍较低，产量不能稳定[15]。因此，后续将进一步研究不同比例的辣木配方栽培梯棱羊肚菌品种，筛选出适宜于该品种生长的辣木配方，使其产量稳定。

3.3 辣木茎杆作基质对羊肚菌营养成分的影响

添加辣木茎杆作基质栽培羊肚菌的试验组MR4和对照组CK4相比，提高了羊肚菌中蛋白质和粗脂肪的含量。研究表明，羊肚菌蛋白质包含19种氨基酸，其中含有多数人体必需氨基酸[16]，并且具有抗氧化、提高免疫力和抗癌的作用[17]，是营养和保健佳品。羊肚菌的脂肪酸成分中：亚油酸占56.0%、油酸占28.41%、硬脂酸占2.02%、软脂酸占13.54%[18]，其中亚油酸含量最高，也是其主要药用成分，具有预防动脉粥样硬化、降低胆固醇、促进人体肾上腺皮质激素分泌、提高人体应激能力的功效[19]。因此，采用辣木茎秆基质栽培羊肚菌，可以提高其营养价值，但造成成分变化的因素还有待进一步研究。