干扰素α注射对新型冠状病毒感染轻症或无症状者病毒核酸转阴的疗效初探

范文瀚，梁雪松，陈 怡，陈志辉 (海军军医大学长海医院感染科，上海 200433)

目前，仍无确切有效的抗病毒药物被批准或推荐用于治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)，已被批准用于治疗其他疾病的抗病毒药物可能成为治疗COVID-19的可选药物。Ⅰ型干扰素(干扰素α、干扰素β)对RNA病毒具有广谱的抗病毒活性，可作用于广泛的细胞类型，诱导抗病毒反应，并介导适应性免疫反应[1]。研究表明，干扰素诱导产生的IFITM家族蛋白可通过干扰病毒包膜与宿主膜融合，直接抑制多种包膜病毒的感染[2]，尤其是Ⅰ型干扰素诱导产生的Mx蛋白可广泛抑制流感、埃博拉、麻疹等多种RNA病毒的初期复制[3-4]。干扰素给药途径主要分为皮下注射和雾化吸入，针对COVID-19的治疗以雾化吸入报道较多，而皮下注射给药的研究相对较少。目前，干扰素β治疗COVID-19的随机对照临床试验报道相对较多，而干扰素α治疗COVID-19的临床证据极少，对干扰素抑制新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的效果存在争议。目前，由于国内疫情日趋稳定，境外输入性病例呈上升趋势，其中一部分为轻症或无症状感染者，SARS-CoV-2核酸转阴时间长，住院时间久，医疗资源占比高。因此，提高患者核酸短期转阴率，缩短住院时间成为临床诊治的主要目标。鉴于上述情况，海军军医大学长海医院感染科探索性地对1例轻症及2例无症状COVID-19患者采用皮下注射干扰素α治疗，详细记录其临床资料，并对用药安全性进行了全面评估，为用干扰素治疗COVID-19提供了参考依据。

1 病例资料

1.1 病例1 男性，47岁，体重70 kg，2021-02-26因发现SARS-CoV-2核酸阳性1 d，被收入本院感染科隔离病房。患者于2021-02-24乘坐飞机回国，回国前在境外检测SARS-CoV-2核酸，结果为阴性，回国途中全程佩戴口罩，穿防护服。入境疫检时，核酸检测呈阳性。患者无发热，轻微咳嗽，伴轻度咽痛，入院诊断为“SARS-CoV-2感染(轻症)”。病例1住院期间的重要临床信息和治疗时间轴见图1。

图1 病例1住院期间的重要临床信息和治疗时间轴T：体温；HR：心率；BP：血压；SaO2：血氧饱和度；WBC：白细胞计数；N：中性粒细胞占比；COVID-19：新型冠状病毒肺炎

1.2 病例2 女性，32岁， 体重66 kg， 2021-03-17因发现SARS-CoV-2核酸阳性1 d，被收入本院感染科隔离病房。患者回国前曾多次于境外行SARS-CoV-2核酸检测，结果均为阴性， 回国途中全程佩戴口罩， 穿防护服。 患者于2021-03-16下午14：00抵沪，行SARS-CoV-2核酸检测，结果呈阳性。患者无发热，咳嗽、咽痛等临床症状，入院诊断为“SARS-CoV-2感染(无症状)”。病例2住院期间的重要临床信息和治疗时间轴见图2。

图2 病例2住院期间的重要临床信息和治疗时间轴T：体温；HR：心率；BP：血压；SaO2：血氧饱和度；WBC：白细胞计数；N：中性粒细胞占比；COVID-19：新型冠状病毒肺炎

1.3 病例3 女，42岁，体重68 kg。2021-03-17因发现SARS-CoV-2核酸阳性1 d，被收入本院感染科隔离病房。患者回国前曾多次于境外行SARS-CoV-2核酸检测，结果均为阴性，回国途中全程佩戴口罩，穿防护服。患者于2021-03-16下午14：00抵沪，行SARS-CoV-2核酸检测，结果呈阳性。患者无发热、咳嗽、咽痛等临床症状，入院诊断为“SARS-CoV-2感染(无症状)”。患者住院期间的重要临床信息及治疗时间轴与病例2基本相同。

3例患者均每1～2天采集一次鼻咽拭子及粪便，并进行SARS-CoV-2的qRT-PCR检测，直至获得两次阴性结果，并无其他临床症状，才准予出院。

2 文献分析

2.1 干扰素治疗严重急性呼吸综合征(SARS)和中东呼吸综合征(MERS)的体内外研究 干扰素在体外的抗病毒效力已得到部分证实。有研究显示，从中药提取物及纯化物中进行筛选，在体外与SARS冠状病毒进行了中和试验后，发现干扰素β-1a、利巴韦林、洛帕那韦、黄芩苷等均具有抗病毒活性[5]。CHAN等[6]从已知抗甲型流感病毒药物的化学库中进行高通量筛选，评估了已鉴定的化合物、干扰素、奈非那韦和洛匹那韦的抗中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的活性，结果发现干扰素具有明显的体外抗MERS-CoV活性[6]。上述两项研究均证实，干扰素在体外具有抗病毒活性。SARS流行期间，一项小样本开放标签的研究共纳入22例SARS患者，其中13例单独使用皮质类固醇，9例使用皮质类固醇联合干扰素α-1治疗。结果显示，皮质类固醇组13例患者中，5例(38.5%)被转至ICU，3例(23.1%)需要插管和机械通气，1例(7.7%)死亡。 干扰素组9例患者中，3例(33.3%)转入ICU，1例(11.1%)需插管和机械通气，无死亡病例。干扰素组患者的治疗时间缩短近50%，肺部炎症改善中位时间也明显缩短(4 dvs9 d，P=0.001)。

2.2 干扰素β皮下注射治疗COVID-19 众所周知，早期病毒介导的免疫抑制被认为是SARS-CoV-2感染的独有特征之一。新近的一项前瞻性体外研究中，研究者确定了SARS-CoV-2解旋酶(nsp13)、核外酶(nsp14)、核内核酸酶(nsp15)以及辅助蛋白orf6能有效抑制初级干扰素的产生和干扰素信号的传递，其中orf6的抑制作用最强[7]。自2019年底发现首例COVID-19病例以来，其病情进展呈现出不同的模式。大多数患者肺部存在轻度或中度炎症，5%～10%的患者病情发展为重症，甚至急性呼吸衰竭。一项来自法国的研究根据肺部炎症程度，纳入了15例轻中度、17例重度及18例危重COVID-19患者，对其进行了表型分析和标准化的全血转录组分析。由于干扰素β在抗病毒免疫中起到了至关重要的作用，因此该研究发现危重患者体内干扰素α的表达显著低于轻中度及重度患者，而所有感染患者体内都无法检测到干扰素β mRNA[8]。在临床证据方面，一项来自WHO的动态系统评价和网状荟萃分析纳入了符合标准的35项研究，共涉及16 588例患者。结果显示，干扰素β未降低COVID-19患者的病死率(OR=1.02，95%CI：0.70～1.32)[9]。另一项大规模的研究纳入了30个国家405家医院的11 330例患者，并将其随机化分组，分别接受瑞德西韦、羟氯喹、匹洛那韦及干扰素治疗。结果显示，干扰素β治疗组(n=2063)患者在病死率(RR=1.16，95%CI：0.96～1.39)、住院天数、机械通气使用率等结局指标方面均无临床获益。然而，部分小样本研究显示出干扰素的临床获益证据[10]。一项来自香港的小样本随机对照临床试验共纳入86例非重症COVID-19患者，将其分为干扰素组(用干扰素β-1b+洛匹那韦/利托那韦+利巴韦林治疗)和无干扰素组(用洛匹那韦/利托那韦治疗)。结果显示，干扰素组患者的咽拭子转阴的中位时间明显短于无干扰素组(4 dvs8 d，P=0.001)[11]。

2.3 干扰素雾化吸入治疗COVID-19 在哮喘和部分呼吸道病毒感染的患者中雾化吸入干扰素β已被证实可增强肺部对病毒的防御能力[12-13]。一项来自英国的随机双盲安慰剂对照Ⅱ期试验共纳入了101例有症状的COVID-19患者，将患者按1∶1比例随机分为两组。一组给予6 mU干扰素β雾化吸入，另一组给予等剂量安慰剂，治疗周期为14 d。结果显示，干扰素组患者的临床症状改善几率更大(OR=2.32，95%CI：1.07～5.04，P=0.033)[14]。此外，仍有报道显示雾化吸入干扰素α治疗的COVID-19患者在临床中获益。一项由同济大学联合医院在疫情早期开展的回顾性队列研究，纳入77例COVID-19患者，按治疗方案分为干扰素α雾化吸入治疗组(n=7)、干扰素α雾化吸入联合阿比多尔口服治疗组(n=46)以及阿比多尔单药治疗组(n=24)。结果显示，含干扰素α雾化吸入治疗的53例患者下呼吸道病毒清除的中位时间为20.4 d，比阿比多尔单药治疗组缩短7 d(P=0.002)[15]。

2.4 对COVID-19无症状感染者病毒RNA的研究 SARS-CoV-2核酸阳性持续时间具有重要的临床及流行病学意义，但目前针对无症状感染者SARS-CoV-2 RNA持续时间的系统性研究仍然较少。来自国内的一项小样本研究共纳入未经治疗的SARS-CoV-2无症状感染者24例，每1～2天采集一次鼻咽拭子，并进行SARS-CoV-2的qRT-PCR核酸检测，直至获得两次阴性结果。SARS-CoV-2携带时间为(22.0±7.1) d，阳性RNA检测周期为(7.9±3.5) d(携带时间为从暴露日至核酸检测连续阴性第1天的间隔时间，检测周期为从核酸检测呈阳性的第1天至核酸检测连续阴性第1天的间隔时间)[16]。另一项来自印度的研究显示，44例未接受治疗的SARS-CoV-2无症状感染者的核酸阳性持续中位时间为8.87 d(95%CI:7.65～10.27)，病毒持续时间的95百分位数为20.70 d(95%CI:16.08～28.20)[17]。

3 小 结

结合上述1例新型冠状病毒感染轻症及2例无症状感染者的干扰素α皮下注射治疗过程及文献分析，与多项随机对照临床试验及队列研究中COVID-19患者核酸转阴的中位时间相比，本研究发现干扰素α皮下注射治疗方案对于COVID-19轻症或无症状感染者在缩短新型冠状病毒核酸转阴时间方面的收益不显著，鼻咽拭子核酸转阴中位时间为59 d。3例患者在干扰素治疗过程中，均未出现明显的药品不良反应。

本研究为皮下注射干扰素α治疗新型冠状病毒感染轻症及无症状者的初步探索研究，不可避免地存在一定的局限性，包括以下几个方面。(1)部分前期研究认为，干扰素与洛匹那韦/利托那韦、利巴韦林等药物可能存在协同抗病毒作用，但本研究考虑到收治的患者为轻症及无症状者，且抗病毒药物有潜在副反应，因此未联合用药，可能影响抗病毒疗效。(2)患者部分基线信息不具有可比性，如年龄、感染的确切时间、个体免疫状态以及病毒变异等。(3)3例患者均为国外输入性病例，不能排除变异病毒株的可能。(4)本研究纳入病例数较少，故研究结果仍有待进一步验证。