ADRA2A-1291C>G和CCK1R-779T>C基因遗传变异与肠易激综合征相关性的Meta分析

苑芳芬，杨晓云

山东大学齐鲁医院消化内科，山东 济南 250012

肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS)是一种胃肠道结构和生化异常的胃肠道功能障碍性疾病，其临床表现包括持续性或间歇性胃痛和肠道习惯改变[1]。根据主要的肠道症状，IBS分为不同的类型，包括便秘型IBS(IBS-C)、腹泻型IBS(IBS-D)和腹泻与便秘混合型IBS(IBS-M)[2]。有数据显示，普通人群IBS发病率为7%～21%，女性IBS的发病率是男性的1.5～2倍[3]。IBS不仅对患者身心健康造成了严重的影响，也增加了社会负担[4]。因此，研究IBS的发病机制具有重要的现实意义。

IBS病因复杂，目前尚不清楚。目前被认为是多种因素，如胃肠动力异常、炎症、遗传背景、环境因素和心理因素共同作用的结果[5]。Makker等[6]揭示了IBS的遗传基础。在过去的10年中，已经发现了许多可能与IBS相关的候选基因，包括5-HTT基因和GNB-3基因[7]。除了这些备受关注的基因外，同样有研究显示，α2A肾上腺素能受体(ADRA2A)-1291C>G[8]和胆囊收缩素受体1(CCK1R)-779T>C[9]的多态性与IBS相关。

ADRA2A-1291C>G位于ADRA2A基因启动子区，可能通过改变IBS的运动和感觉功能参与IBS的发病机制[10]。然而在不同种族IBS的遗传学研究中却出现了相互矛盾的结果。CCK1R-779T>C可能与IBS便秘患者胃排空减慢有关[11]，也有研究显示其与IBS相关，但结果同样不一致[12-13]。

目前，尚无Meta分析总结ADRA2A-1291C>G和CCK1R-779T>C这两个遗传变异与IBS的关系，本文结合文献资料，采用Meta分析方法研究这两个基因遗传变异与IBS的关系。考虑到IBS亚型的易感性，进一步进行亚组分析，为进一步阐明IBS的遗传易感性提供理论基础。

1 资料与方法

1.1 文献检索检索1996年6月至2019年5月PubMed、Embase、ISI 科学网、万方等数据库所有相关的已发表研究，使用关键词，如“肠易激综合征”、“IBS”、“多态性”、“ADRA2A”、“CCK1R”，“ADRA2A-1291C>G”和“CCK1R-779T>C”进行组合检索。

1.2 纳入及排除标准纳入标准：(1)病例对照研究或观察性研究，评估ADRA2A-1291C>G、CCK1R-779T>C与IBS风险或IBS亚型风险的相关性；(2)提供或允许计算OR及其95%CI；(3)对于重复样本，只选择样本量较大的研究。排除标准：(1)未评估ADRA2A-1291C>G及CCK1R-779T>C与IBS风险相关性的研究；(2)动物性实验等无法提取数据的研究；(3)综述性及Meta分析的研究。

1.3 数据提取从文献中提取以下信息，包括第一作者、国家、出版年份、民族类型、基因型分布和诊断标准。两个数据员分别独立提取数据，并就所有项目达成一致意见，通过纽卡斯尔渥太华量表(NOS)(http://www.ohri.ca/programs/clinicalempiology/oxford.asp)对纳入文献进行质量评估。

1.4 统计学分析分别计算ADRA2A-1291C>G多态性在等位基因、显性和隐性模型及CCK1R-779T>C多态性等位基因模型下与IBS的相关性。通过Q检验[14]和HigginsI2统计[15]检验研究中的异质性。无异质性时(P<0.05)，采用Mantel-Haenszel方法。相反，当存在异质性时，则采用德西蒙尼亚和莱尔德方法[16]。根据Egger回归评估发表偏倚[17]。所有统计分析均采用R软件(15.3版)，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究对象基本特征初步检索发现有63篇文献，经过阅读摘要和标题后有33篇文献被剔除。进一步阅读全文发现13篇符合纳入标准。最终1篇重复[8]和3篇综述文章[2，18-19]被删除，共纳入9篇文献[9，12-13，20-25]，文献筛选流程如图1所示。有4篇文献来自高加索人群，3篇来自亚洲人群，1篇为欧洲人群，1篇无人口学数据。所有文献经NOS评价，得分均在7分以上(见表1)。

图1 文献筛选流程及结果Fig 1 Document screening process and results

表1 纳入研究文献基本情况Tab 1 Basic information of included research literature

2.2 Meta分析结果图2显示了3种遗传模型(等位、显性和隐性模型)中ADRA2A-1291C>G与IBS风险相关性的OR及95%CI，根据异质性的P值，选择固定效应模型，ADRA2A-1291C>G CC基因型和C等位基因分别与GG+CG基因型和G等位基因相比，能够增加IBS的风险[显性遗传模型(CCvsGG+CG)：OR=1.39，95%CI：1.08～1.80和等位遗传模型(CvsG)：OR=1.16，95%CI：1.00～1.35，见表2]。图3显示了等位基因模型中CCK1R-779T>C多态性与IBS风险显著相关(TvsC：OR=1.37，95%CI：1.15～1.63)。

图2 ADRA2A-1291C>G多态性与IBS相关性的森林图 A:等位基因模型;B:显性模型;C:隐性模型Fig 2 Forest map of correlation between ADRA2A-1291C>G polymorphism and IBS A:allelic model;B:dominant model;C:recessive model

图3 CCK1R-779T>C多态性与IBS相关性的森林图Fig 3 Forest map of correlation between CCK1R-779T>C polymorphism and IBS

表2 Meta分析结果Tab 2 Meta-analysis results

2.3 亚组分析研究ADRA2A-1291C>G与IBS亚型的相关性发现,ADRA2A-1291C>G在显性模型下能够增加IBS-C与IBS-D的发病风险(CCvsGG+CG：OR=1.38，95%CI：1.00～1.90)和IBS-D(CCvsGG+CG：OR=1.50，95%CI：1.06～2.14)(见表2)。

2.4 发表偏倚本研究ADRA2A-1291C>G多态性与IBS相关性和CCK1R-779T>C多态性与IBS相关性漏斗图均基本对称(见图4～5)，显示无明显发表偏倚，Egger检验发现无发表偏倚(P>0.05)。

图4 ADRA2A-1291C>G和IBS风险相关性分析漏斗图 A：显性模型；B：隐性模型；C：等位基因模型Fig 4 Funnel plot of risk correlation analysis between ADRA2A-1291C>G and IBS A:dominant model;B:recessive model;C:allelic model

3 讨论

本研究发现，ADRA2A-1291C>G的C等位基因和CCK1R-779T>C的T等位基因与IBS的发病风险密切相关。研究发现ADRA2A可能参与IBS-D的发病机制[26-29]。一项动物研究证实，与野生型小鼠相比，敲除小鼠体内的ADRA2A基因可促进胃肠道转运，同样腹腔注射美托咪定(一种有效的ADRA2A激动剂)可抑制野生型小鼠的胃肠道运转。此外，Liu等[27]研究表明，肾上腺素受体有利于调节肠道的抗皱作用，而ADRA2A的损伤可能引起离子和水的吸收减少，从而导致腹泻。目前，ADRA2A-1291C>G被认为可调节IBS患者运动和感觉功能[2，10]。此外，Choi等[8]和Sikander等[20]的研究揭示了ADRA2A-1291C>G多态性与IBS的相关性。Kim等[30]报道显示，ADRA2A-1291C>G似乎与IBS-C的表型有关。不同的是，来自印度的其他研究证实ADRA2A-1291C>G与IBS-D有关，而与IBS-C无关[31]。ADRA2A-1291C>G基因启动子区多态性与IBS患者功能丧失有关。本研究的Meta分析结果显示，携带G等位基因与IBS-D显著相关(OR=1.16，95%CI：1.00～1.35)，与上述研究一致。

图5 CCK1R-779T>C多态性与IBS风险Fig 5 Polymorphism of CCK1R-779T>C and IBS risk

然而，我们的研究结果与以往的研究仍有一些差异，造成这些差异的原因可能是先前对IBS-D的单一研究中，样本量较小。除此之外，在不同的人群中，单核苷酸多态性(SNP)的不同等位基因频率对IBS的风险表现出不成比例的影响。

有研究观察到CCK可引起IBS患者结肠运动异常增加[32]。此外，CCK输注似乎与IBS患者的肠运动功能障碍有关[33]。CCK1受体内含子1779T>C的多态性可能增强内源性CCK的反应，这可能与内脏的超敏反应有关。一项重要的研究揭示了CCK 779T>C多态性与胃排空率降低之间的关系[34]。此外，CCK1受体内含子1779T>C也被证实与IBS有关[12]。我们的荟萃分析发现，CCK1R的984TC能够降低IBS发病风险。

本研究首次应用Meta分析探讨ADRA2A-1291C>G、CCK1R-779T>C多态性与IBS风险的关系。ADRA2A-1291C>G的C等位基因和CCK1R-779T>C的T等位基因与IBS发病风险的增加密切相关。该Meta分析无发表偏倚存在，从某种程度上显示了研究的可信度。然而由于许多亚组中样本含量较少，研究结论尚需更大样本的进一步验证。其次，由于数据的局限性，我们未对IBS进展的相关因素如年龄、生活方式和社会心理进行亚组分析。