盐水法接合柱凝集法应用于ABO疑难血型检测中临床价值分析

王品

在输血之前,对红细胞ABO 血型进行准确鉴定,是保障患者用血安全的最重要前提。作为输血相容性检测最重要环节之一,只有ABO 血型正定型(红细胞定型)与反定型(血清定型)一致,才能确定ABO 血型［1］。但值得注意的是,采用柱凝集法进行单一ABO血型检测时,经常出现血型正反定型不一致的情况,尤其是进行疑难血型检测时,难以获取良好检测结果［2］。因此,应积极寻找更合理、有效检测方法,为临床提供准确检测结果,改善患者预后质量。本文选择本院2018 年1 月～2020 年1 月所收治ABO 疑难血型患者8 例为研究对象,以评估盐水法接合柱凝集法价值。现将详细情况报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2018 年1 月～2020 年1 月所收治ABO 疑难血型患者8 例为研究对象,均为ABO血型检测正反定型不一致者,并全部对其血液进行对比性试验检测。

1.2 设备与试剂 设备：恒温箱、离心机；试剂：生理盐水、A、B 细胞试剂、标准抗-A、抗-B 血清(南京华欣药业生物工程有限公司)；其他：ABO 血液正反定性反应卡、Liss/coombs 结合反应卡(瑞士达美亚公司)。

1.3 方法 获取ABO 血型正反定型不一致样本8 例,均予以盐水法接合柱凝集法：将患者50 μl 的2%红细胞液与50 μl 抗-A 及抗-B 标准血清进行混合反应,并置于37℃环境内反应15 min。将反应液充分反应结合后,放在Liss/coombs 卡上置于37℃恒温箱内反应15 min,离心处理10 min,判断结果。另外,将50 μl 血浆与ABO 试剂A、B 细胞液50 μl 进行反应,并将其反应液转移至Liss/coombs 卡,置于37℃恒温箱内反应15 min,离心处理10 min,观察结果。最后,对不同稀释浓度抗-A 及抗-B 标准血清进行检测。

1.4 观察指标 比较三种检测方法抗原减弱或抗体减低结果、血清连续倍比稀释结果。

2 结果

2.1 三种检测方法抗原减弱或抗体减低结果比较8 例样本均确证为ABO 抗原减弱或抗体减低,经混合法测定,完全符合血型鉴定结果,且盐水法与柱凝集法检测结果存在明显差异。见表1。

表1 三种方法检测抗原减弱或抗体减低结果比较

2.2 三种检测方法血清连续倍比稀释结果比较 在稀释至64 倍时,三种检测结果出现较大差异,混合法检测灵敏度明显高于盐水法和柱凝集法。见表2。

表2 三种检测方法血清连续倍比稀释结果比较

3 讨论

精确进行血型鉴定、确保输血安全,一直是临床工作的重中之重,对保护患者生命安全、提升患者临床表现均具有积极意义。但值得注意的是,在进行血型测定过程中,通过单一方法检测会经常出现正反定型不一致的疑难血型,可在一定程度提升输血风险,甚至是威胁患者生命健康［3,4］。因此,应积极寻找更高效、结合式检测方法,既可以准确判断血型,又不会加重患者负担。在临床上,虽ABO 血型检测方法众多,例如,盐水法、柱凝集法,但是,单一检测方法均无法获取理想检测效果。相关研究指出［5,6］,柱凝集法仅可实现单一检测目的,柱凝集法的血型反应卡与交叉配血反应卡多只能实现各自单一目的,缺乏联合与拓展应用能力,不论是进行方式改变或完善,仍存在一定比例正反定型不一致比例。另外,柱凝集法是利用红细胞抗原和相应抗体结合,经离心处理后,凝集红细胞悬浮在凝胶表面或中层呈阳性反应,但未与抗体结合的红细胞则沉淀于凝胶底部呈阴性反应［7-10］。相关研究指出［11］,柱凝集法虽在免疫球蛋白G(IgG)抗体检测方面具有肯定价值,但是在对ABO 血型检测方面,则与盐水试管法检测无明显差异。而在进行单一盐水法检测时,将阴性反应液结合到Liss/Coombs 卡上进行抗球蛋白试验,可显示阴性反应。说明采用单一柱凝集法对ABO 血型测定具有一定灵敏度,但无法确定抗原减弱或抗体减低患者ABO 血型。相关研究指出［12,13］,在进行ABO 疑难血型进行检测过程中,出现正反定型不一致主要是与血液中抗原和抗体减弱有关。本组研究结果显示,8 例样本均确证为ABO 抗原减弱或抗体减低,经混合法测定,完全符合血型鉴定结果,且与两种单一方法存在明显差异。说明混合法在抗原和抗体减弱时均可完全进行血型鉴定,具有较高应用价值。

本研究所采用混合法是一种拓展性的检验方式,通过将盐水法反应阳性反应液接合至Liss/Coombs 卡上进行抗球蛋白试验,可显著提升检测敏感性［14,15］。本组研究结果显示,在稀释至64 倍时,三种检测结果出现较大差异,混合法检测灵敏度明显高于盐水法和柱凝集法。提示混合法灵敏度高且效率更高。

综上所述,盐水法接合柱凝集法对抗原减弱或抗体减低ABO 疑难血型患者进行血型鉴定,效果理想且灵敏度高,值得推广应用。但值得注意的是,本次研究所收集样本数量偏少,所得出结论可能与真实情况有所差异,应在加大样本后作进一步研究讨论。