脑胶质瘤患者TGF-β1、Smad7、VEGF水平及临床意义分析

赵岩江，刘力，魏新亭

（1.遂平仁安医院神经内科，河南 驻马 463100；2.郑州大学第一附属医院神经外科，河南 郑州 450000）

胶质瘤是临床上常见的原发性脑肿瘤，患者具有预后效果差，生存期短，复发率高的特点[1]。胶质瘤的发生也是一个多阶段的多阶段发展过程，基因水平决定了胶质瘤的发生和发展[2]。探索胶质瘤进展相关基因及其发病机制和分子机制的深入研究将为发现新的分子疗法和靶向疗法提供基础。转化生长因子β1（TGF-β1）是一种具有调节机体细胞凋亡，增殖和分化的功能的细胞因子。TGFβ1超家族肽类的细胞内转导调控分子（Smad7）它是信号的负反馈调节器，与R-Smad蛋白通过竞争性地抑制与TβRI结合，使R-Smad磷酸化过程受阻[3]。Smad7还通过遍在蛋白化抑制TGF-β1并促进TGF-β1受体的降解，抑制其信号传输。血管内皮生长因子（VEGF）是一种促血管生成因子，具有高度特异性的，刺激内皮细胞的增殖，增加血管通透性,在肿瘤血管内皮细胞的增殖和迁移过程中起重要作用[4]。本研究选择2020年9月至2020年10月在我院就诊的胶质瘤患者,观察患者TGF-β1，Smad7和VEGF水平，并分析其临床意义。报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020年9月-2020年10月在我院接受治疗的脑胶质瘤患者为研究对象。纳入标准：⑴年龄≥18周岁；⑵经影像学和病理诊断为脑胶质瘤；⑶无其他系统严重疾病者；排除标准：⑴临床资料不全者；⑵合并其他颅脑疾病者；⑶精神异常者。根据标准共纳入100例，男58例，女42例，年龄38～70岁，平均57.38±4.12岁；共纳入良性脑胶质瘤患者100例，男55例，女45例，年龄36～72岁，平均57.40±4.54岁。两组的一般资料比较无明显差别，具有可比性。本项研究经医院伦理委员会评审通过，且患者均知情同意。

1.2 研究方法 两组患者TGF-β1、Smad7、VEGF表达水平采用免疫组化法检测：所有患者反应均在湿盒中进行，常规将石蜡切片脱水后，用pH6.0枸橼酸盐缓冲液煮沸修复抗原，使用0.3%H2O2消除内源性过氧化氢酶，室温下封闭10%BSA，滴加稀释的一抗，在4℃的加湿箱中过夜，空白对照用等量的PBS替换第一抗体，第二天滴加生物素过氧化物酶复合物，并在室温下温育1h;用含有0.3%H2O2的DAB溶液显色，约5min时终止反应，并在室温下通过光学显微镜下观察。

1.3 评价指标 观察两组患者TGF-β1、Smad7、VEGF水平，比较不同临床病理特征脑胶质瘤患者TGF-β1、Smad7、VEGF水平的差异，分析影响脑胶质 瘤 患 者TGF-β1、Smad7、VEGF表 达 情 况 的 因素。

1.4 统计分析 数据采用Excel录入后，采用SPSS 11.5软件分析。计数和计量资料分别采用例和均数±标准差表示。应用t检验进行统计学处理。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者TGF-β1、Smad7、VEGF水平的比较 脑胶质瘤患者的TGF-β1、Smad7、VEGF阳性表达率均高于良性肿瘤组，差异有统计学意义（χ2值=105.195、86.445、106.404，P<0.001）。见表1。

表1 两组患者TGF-β1、Smad7、VEGF水平的比较

2.2 不同临床病理特征患者TGF-β1、Smad7、VEGF水平的比较 有淋巴结转移、分化程度为中低分化、TNM分期为Ⅲ期+Ⅳ期的脑胶质瘤患者的TGF-β1、Smad7、VEGF阳性表达率较高，差异有统计学意义（P<0.05），不同年龄、性别患者的TGFβ1、Smad7、VEGF阳性表达率无差别，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 不同临床病理特征患者TGF-β1、Smad7、VEGF水平的比较

2.3 影响脑胶质瘤患者TGF-β1、Smad7、VEGF表达水平的因素 将单因素分析有意义的因素作为自变量，将TGF-β1、Smad7、VEGF阳性率作为因变量进行回归分析，结果显示，淋巴转移和TNM分期是影响胶质瘤患者TGF-β1、Smad7、VEGF阳性表达的因素。见表3。

表3 影响脑胶质瘤患者TGF-β1、Smad7、VEGF阳性表达的因素

3 讨论

脑胶质瘤的特点是浸润生长,没有明显的边界，难以完全切除并且术后复发率较高，患者中位生存期无明显改善[4]。研究发现脑胶质瘤的发展是一个涉及长期多因素参与的复杂过程,涉及多因素和多步骤的协同积累,肿瘤的发展取决于细胞的增殖和新血管的形成过程[5]。通过该实验研究，与细胞增殖和新血管形成密切相关的因子TGF-β1，Smad7和VEGF出现异常表达，其表达情况和微血管密度与细胞瘤的病理分级呈正相关[6]，说明三者和微血管密度增加与胶质细胞瘤的发生发展有显著的联系。

TGF-β1是促进肿瘤进展和侵袭的重要因子，在各种肿瘤细胞和组织中呈现高表达，参与肿瘤血管生成，增殖和侵袭过程[7]。Zhang等[8]发现TGFβ1在高级别胶质瘤中的阳性表达率明显高于低级别胶质瘤，与微血管密度呈正相关。与本研究的结果相同。体外研究也证实TGF-β1可以被用作肿瘤标志物之一，并且与增殖，侵袭，转移和预后密切相关，是肿瘤细胞迁移浸润的分子基础[9]。Smads蛋白是TGF-β信号通路中的关键分子，具有核转位和转录因子活性。Smads蛋白的异常功能干扰正常的信号转导并促进肿瘤发生[10]。Smad7基因作为TGF-β信号传导的抑制剂，与活化的TGF-β受体复合物特异性和稳定结合，阻断Smad蛋白的磷酸化，抑制细胞内TGF-β信号传导。Smad7表达异常会使细胞对TGF-β的应答过程受到影响，加剧了胶质细胞瘤的发展进程[11]。

研究表明，肿瘤新生血管形成是由多种因素共同参与的复杂生物学过程，目前认为VEGF是血管内皮细胞中具有特异性的血管生成因子之一，并且与胶质细胞瘤的浸润转移密切相关，可以促进血管内皮细胞的增殖，使血管通透性增加，增强血管支持物的功能和抑制肿瘤细胞的凋亡等[12]。VEGF是肿瘤血管生成中重要的血管生成刺激因子。恶性胶质瘤细胞主要作用机制是分泌大量VEGF，并与血管内皮细胞膜上的受体结合，发挥丝裂原活性，使内皮细胞增殖和迁移被激活，产生新的肿瘤血管,促进肿瘤细胞的生长和扩散。VEGF可以增加血管通透性，促进血液纤维蛋白原的外渗，形成肿瘤周围水肿，为肿瘤血管生成和肿瘤细胞的侵袭和生长提供了良好的生长环境[13-15]。

本次研究结果显示,两组患者TGF-β1、Sm ad7、VEGF水平的比较结果显示，脑胶质瘤患者的TGF-β1、Smad7、VEGF阳性表达率均显著高于良性肿瘤组。并且有淋巴结转移、分化程度为中低分化、TNM分期为Ⅲ期+Ⅳ期的脑胶质瘤患者的TGF-β1、Smad7、VEGF阳性表达率较高,不同年龄、性别患者的TGF-β1、Smad7、VEGF阳性表达率无差别。这些结果提示TGF-β1，Smad7和VEGF可参与胶质瘤的发病机制和恶性过程,三个指标的变化与淋巴结转移的存在与否,细胞分化与临床分期有关，与年龄，性别等因素无关。单因素分析将有意义因素作为自变量，TGF-β1，Smad7，VEGF阳性率作为因变量回归分析,结果显示淋巴结转移和TNM分 期 是 影 响 胶 质 瘤 患 者TGF-β1，Smad7，VEGF阳性表达的因素。

综上所述，脑胶质瘤患者的TGF-β1、Smad7、VEGF阳性表达率较高，且受患者淋巴结转移情况和TNM分期的影响。