2型糖尿病患者并发缺血性脑卒中危险因素及与载脂蛋白E基因型相关性分析

李丽容，卢治兰，邓向海，单林玲

(1.安康市中医医院检验科，陕西 安康 725000；2.安康市中医医院影像中心，陕西 安康 725000)

缺血性脑卒中是2型糖尿病(Type 2 diabetes，T2DM)人群常见严重大血管病变之一，致死致残率较高，严重威胁生命安全；同时，T2DM亦被证实是缺血性脑卒中独立危险因素，人群罹患风险为健康人群的2～5倍[1]。国外研究[2]证实，T2DM患者大血管病变发生与脂代谢异常密切相关，而载脂蛋白E(Apolipoprotein E，ApoE)是脂代谢中关键调控指标。ApoE由299个氨基酸构成，具有稳定脂蛋白结构、运转脂类物质、调节脂类代谢及保护大脑功能等多种作用[3]。目前研究[4]证实ApoE基因rs7412(C/T)和rs429358(C/T)单核苷酸多态性共同决定共显性等位基因(ε2、ε3及ε4)，同时形成3个纯合子和3个杂合子，其中ε3/ε3基因型占比最高，一般在70%以上，又称为野生型。研究[5]显示，检测ApoE基因型能够实现T2DM患者继发大血管病变的早期预测及干预。但对于ApoE基因型是否会对缺血性脑卒中的发生产生影响，尚无明确定论。本研究探讨T2DM患者并发缺血性脑卒中的危险因素及与ApoE基因型相关性，现报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 本研究纳入我院2016年1月至2020年9月收治的T2DM患者共490例为研究对象，根据是否并发缺血性脑卒中分为A组(未并发缺血性脑卒中)与B组(并发缺血性脑卒中)。T2DM和缺血性脑卒中均符合世界卫生组织诊断标准[6]，年龄≥18岁，同时排除存在重要脏器功能异常、恶性肿瘤、精神系统疾病、妊娠及妊娠糖尿病者。本研究设计符合《赫尔辛基宣言》要求，且患者及家属知情同意。

1.2 研究方法 查阅病例收集患者性别、年龄、身高与体重[计算体重指数(BMI)]、T2DM病程、吸烟史、原发性高血压、收缩压、舒张压、血清实验室指标[甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)]及ApoE基因检测指标。实验室指标检测：入选患者均抽取清晨空腹静脉血4～5 ml。HbA1c采用东曹HLC-723G8型HbA1c全自动分析仪检测，其他指标均采用贝克曼ISE AU5800型全自动生化分析仪检测。ApoE基因检测：收集患者肘静脉血，提取血液基因组DNA，采用实时荧光定量PCR法检测ApoE基因型，通过荧光曲线判读基因型。阴性对照品无Ct值或Ct值>29，阳性对照品Ct值<25。

2 结 果

2.1 两组患者一般资料比较 见表1。B组收缩压和舒张压高于A组，合并原发性高血压比例低于A组(均P<0.05)。两组其他指标比较均无统计学差异(均P>0.05)。

表1 两组患者一般资料比较

2.2 两组患者实验室指标比较 见表2。B组LDL-C水平低于A组(P<0.05)。两组其他指标比较均无统计学差异(均P>0.05)。

表2 两组患者实验室指标比较

2.3 两组患者ApoE基因型频率及等位基因频率比较 见表3。χ2检验证实研究纳入人群ApoE基因分布符合H-W遗传平衡定律及连锁平衡，可代表整个群体。B组ε2/ε3、ε3/ε4基因型频率显著高于A组，ε3/ε3基因型频率显著低于A组(χ2=8.26、10.71、6.98，均P<0.05)。B组ε4基因频率显著高于A组，ε3基因频率显著低于A组(χ2=11.65、10.71，均P<0.05)。

表3 两组患者ApoE基因型频率及等位基因频率比较(%)

2.4 T2DM患者并发缺血性脑卒中危险因素Logistic回归分析 见表4。Logistic回归模型自变量赋值：T2DM病程和收缩压为连续变量，根据原始数据分析；合并原发性高血压=1，未合并=0；ε3/ε3作为参考对照，ε2/ε3和ε3/ε4基因型出现=1，未出现=0。结果显示，合并原发性高血压、高收缩压、ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型均是T2DM患者并发缺血性脑卒中的独立危险因素(均P<0.05)。

表4 T2DM患者并发缺血性脑卒中危险因素Logistic回归分析

3 讨 论

本次研究结果显示，B组ε2/ε3、ε3/ε4基因型频率及ε4基因频率显著高于A组，ε3/ε3基因型频率和ε3基因频率显著低于A组。Logistic回归模型多因素分析结果显示， ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型是T2DM患者并发缺血性脑卒中的独立危险因素，进一步证实ApoE基因型为ε2/ε3和ε3/ε4的T2DM患者更易发生缺血性脑卒中。国外研究[7-8]证实，经多元回归分析校正年龄、BMI、血压、血脂及吸烟情况后，ApoE基因型为ε3/ε3的人群不易发生缺血性脑卒中。另有研究[9-10]认为，ApoE基因型为ε2/ε4和ε3/ε4的缺血性脑卒中患者中可见VLDL-C与TG水平显著升高。一项Meta分析研究[11]显示，ApoE ε4等位基因存在可导致缺血性/出血性脑卒中发生风险升高。此外，ApoE ε4等位基因还被证实可促进颈动脉内膜中层增厚，并进一步提高缺血性脑卒中发生风险[12-13]。上述研究结果均支持本次研究结论，据此笔者推测ApoE基因型ε2/ε3和ε3/ε4、ApoE ε4等位基因可对体内脂类代谢特别是脑部脂类代谢产生影响，导致脑部动脉粥样硬化病情发生及发展，从而引起T2DM患者并发缺血性脑卒中风险升高。

本次研究结果中，两组合并原发性高血压比例、收缩压、舒张压及LDL-C水平比较差异均有统计学意义，提示并发缺血性脑卒中患者血压水平均显著升高，同时LDL-C水平更低。继续采用Logistic回归模型分析证实，合并原发性高血压病和高收缩压与T2DM患者缺血性脑卒中发生独立相关，但低LDL-C水平并未证实存在保护效应，与以往报道结果不符[14-16]，笔者认为这可能与纳入样本量相对较少、单中心及人种差异有关。同时，有报道[17-18]提示，基因型为ε3/ε4和ε4/ε4的患者体内LDL-C水平较低，导致内皮依赖性血管舒张受到抑制，从而造成血压升高，故LDL-C与T2DM患者缺血性脑卒中发生之间的关系仍有待后续研究进一步确证。

本研究采用χ2检验证实纳入人群ApoE基因分布符合H-W遗传平衡定律及连锁平衡，可代表整个群体；同时，基因型和等位基因分析结果提示，缺血性脑卒中患者ε2/ε3和ε3/ε4基因型频率及ε4基因频率均更高。以上数据进一步提示，T2DM患者并发缺血性脑卒中与ApoE基因型间存在密切联系。有研究[19-20]证实，ApoE ε4等位基因可刺激血管收缩，提高血压水平，导致淀粉样蛋白Aβ在脑内大量沉积，最终诱发阿尔兹海默症。亚洲人群中ApoE ε4等位基因和基因型ε3/ε 4、ε4/ε4亦与原发性高血压发生有关[21]。结合本次及上述研究结果，笔者认为ApoE ε2和ε4等位基因可能在原发性高血压发生、发展过程中发挥着重要作用，并诱发多种心脑血管疾病。

综上所述，合并原发性高血压、高收缩压、ApoE ε2/ε3和ε3/ε4基因型及T2DM患者更易并发缺血性脑卒中。早期评估ApoE基因型并给予针对性干预有助于降低缺血性脑卒中发生风险。但本研究属于单中心回顾性分析，无法完全排除混杂因素影响，仍有待后续更大样本量及多中心研究确证。