乌鲁木齐地区健康成人网织血小板参考区间的建立①

古丽沙提·海米提，刘 潇，谢伊代·阿不都海力力，太威斯亚·图尔孙，冯阳春

（新疆医科大学第三临床医学院（附属肿瘤医院）1检验科；2输血科，乌鲁木齐830011）

网织血小板（reticulated platelet,RP）是在外周血循环中出现的一种比成熟血小板体积更大，结构更加致密且含有更多活性颗粒，可以被亚甲蓝染色的有残余信使核糖核酸（mRNA）和粗面内质网成分的不成熟血小板，是巨核细胞转化为成熟血小板过程中的一种幼稚阶段[1,2]。外周血RP计数和网织血小板比例（immature platelet fraction,IPF%）可反映骨髓对血小板减少的代偿能力，同时可预测血小板的生成能力，精确反映骨髓血小板的动力学[3,4]。目前国际上对RP的研究主要集中于血小板相关性疾病的诊断和预后疗效[5-10]。伴随着网织血小板检测技术的不断发展，该指标有望成为全血细胞计数常规检验的一部分[11]。目前在中国关于网织血小板的参考区间缺乏权威的行业标准，本次研究针对乌鲁木齐地区成人建立符合人群特点的网织血小板参考区间，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以2019年9—12月在新疆医科大学附属肿瘤医院健康体检中心进行体检的1 500例体检者为研究对象，男性和女性各750例，每个性别按年龄分为3组，其中18～35岁组200例，36～60岁组350例，＞60岁组200例。男性平均年龄47.0岁，女性平均年龄46.7岁。另收集2020年1月体检者40例，其中18～60岁和＞60岁组人群各20例进行参考区间的验证。本研究经新疆医科大学附属肿瘤医院伦理委员会批准。

1.2 纳入标准（1）出生于乌鲁木齐市，并生活在乌鲁木齐周边的年满18周岁人群；（2）近1个月内无献血或输血治疗；（3）近期未服用影响血液系统的相关药物；（4）无吸烟无酗酒史；（5）全血细胞计数常规检验未见异常指标；（6）女性避开生理周期；（7）无慢性疾病；（8）健康体检未发现机体功能异常者。

1.3 指标的测定 采集研究对象EDTA抗凝全血标本2～4 mL，颠倒混匀5～8次，采用日本SYSMEX公司XN-9000血液分析仪的CBC+DIFF+PLT-F通道进行检测，收集整理数据。

1.4 统计学处理 按照极差法检查有无离群值，离群值即最大值和次大值或次小值和最小值的差值超过1/3极差，如有离群值，须删除离群值。采用SPSS19.0统计软件进行数据分析，用Kolmogorov-Smirnov正态性检验对数据进行正态性分析，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（-x±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组数据比较采用单因素方差分析；不符合正态分布的计量资料组间比较采用Mann-Whitney非参数检验，参考区间取（2.5～97.5）th，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 1 500例体检人群中RP和IPF%的分布情况1 500例个体检测结果中RP和IPF%未出现离群值，1 500例数据均纳入结果分析。1 500例个体中RP属于正偏态分布资料（P2.5=1.0×109/L，P97.5=17.9×109/L），IPF%属于正偏态分布资料（P2.5=0.5%，P97.5=7.2%），见图1。

图1 1 500例体检人群中RP和IPF%的分布情况

2.2 1 500例体检人群中不同性别RP和IPF%的分布情况 1 500例体检人群中男性和女性RP均属于正偏态分布资料（男性：P2.5=1.0×109/L，P97.5=18.0×109/L；女性：P2.5=1.0×109/L，P97.5=17.9×109/L）；IPF%均属于正偏态分布资料（男性：P2.5=0.6%，P97.5=7.2%；女性：P2.5=0.5%，P97.5=7.2%）。在不同性别组之间RP和IPF%差异无统计学意义（Z=0.914,P=0.361；Z=0.703,P=0.482）。

2.3 RP和IPF%在1 500例体检人群中不同年龄段的分布情况 由于RP和IPF%在不同性别组的分布差异无统计学意义，可对3个年龄段的检测结果进行正态性检验。RP和IPF%在18～35岁组和36～60岁组之间差异无统计学意义，可将这两个年龄段合并为一个年龄段，最终建立的参考区间，即RP的参考区间为：18～60岁（1.3×109/L～18.4×109/L），＞60岁（0.8×109/L～14.9×109/L）；IPF%的参考区间为：18～60岁（0.6%～7.3%），＞60岁（0.5%～6.8%），见表1、2。

2.4 参考区间的验证 对所建立的RP和IPF%参考区间进行验证，验证结果100%通过，符合专业要求，证明本研究建立的参考区间有效。

表1 RP和IPF%在3个年龄段的正态性检验和两两比较结果

表2 RP和IPF%在18～60岁和＞60岁参考区间

3 讨论

随着全自动血细胞分析仪的发展，实验室进行RP检测越来越容易，现有的研究已经表明，Sysmex的XE2100，XE-5000及XN系统均可以用于RP检测，并能给出IFP%值，而且在RP的高中低3个结果范围中均和传统的流式细胞仪检测结果具有较好的一致性，大大降低了网织血小板的检测成本，为网织血小板从科研走向临床提供了简便快捷的检测手段[12-13]。

参考区间作为检验项目进入临床应用的必要条件，建立符合特定人群的各检验项目合适的参考区间已经成为检验领域亟待解决的问题[14-15]。研究表明北京地区成人IPF%参考区间为0.57%～6.83%，男女之间差异无统计学意义[16]；兰州地区成人IPF%参考区间为0.50%～6.04%，老年人IPF%参考区间为0.20%～4.03%[17]。同时韩国的研究表明在韩国人群中男性IPF%参考区间为0.5%～3.1%，女性参考区间为0.5%～3.4%；男性RP参考区间为1.30×109/L～6.80×109/L，女性参考区间为1.21×109/L～7.15×109/L[18]。英国的一项研究报道显示英国不同性别人群中IPF%存在分布差异，男性和女性人群IPF%参考区间分别是1.8%～10.0%和1.5%～10.1%[19]。针对IPF%的参考区间，本研究和北京地区的结果类似，均显示男女之间无差异，且参考区间范围接近。同时本次研究显示老年人的IPF%相比于其它成年人呈现下降趋势，和兰州地区的研究结果相符，老年人由于机体造血及营养吸收等方面功能降低，血小板生成率降低，导致RP和IPF%的减少。

不同地区各实验室应根据服务人群建立适合本实验室的RP和IPF%的参考区间，为临床医生在网织血小板相关疾病的辅助诊断和疗效判断等方面提供依据[20]。本次研究仅为1个实验室的单一中心研究，且纳入人群数量有限，未来应该针对乌鲁木齐地区人群进行多中心大规模的人群研究。