微柱凝胶技术在新生儿溶血病中的应用效果

刘洁

吉林省人民医院 ,吉林 长春 130000

新生儿溶血病(Hemolytic Disease of Newborn，HDN)是一种较常见的新生儿疾病，主要由于母婴血型不合导致。微柱凝胶技术(Microcolumn Gel Technology，MGT)是一种新型的、高效的新生儿溶血病检测手段，在全世界范围内拥有广泛的使用面和不俗的临床实用口碑[1]。本次研究根据本院近年来进行新生儿溶血病疾病诊断的幼儿的相关临床治疗数据，对微柱凝胶技术对其诊断效果进行分析和说明。现报道如下。

1 资料与方法

1.1基本资料 本次研究所涉及资料均来自2018年2月-2020年9月在我院进行新生儿溶血病检测的新生儿的相关医疗数据，共1720人。随机分为常规检测组和凝胶检测组，每组各860人。其中常规检测组有女童302人，男童558人；出生时间1～16d，平均出生时间(4.27±1.38)d。凝胶检测组有女童327人，男童533人；出生时间1～15d，平均出生时间(4.62±1.62)d。全部人员均排除严重脏器疾病以及心血管、脑血管、神经系统疾病和精神疾病者。病患及其家属对研究过程和治疗药物有明确认知，并在研究认同书上签字，院内伦理委员会在研究同意书上签字。对比两组病患基本临床数据不存在统计学意义，P>0.05，具有研究意义。

1.2检测方法 常规检测组采用常规检测手段，主要步骤，对母婴进行血样采集，制作4-5mL的EDTA-K2抗凝血样本，确定母婴的ABO血型及Rh血型。而后将母婴血液样本进行常规DTA(直接抗人球蛋白检验)，确定新生儿溶血病发生情况。

凝胶检测组采用微柱凝胶技术，主要步骤，首先确定母婴的ABO血型及Rh血型。

①抗人球蛋白检验，使用一张微柱凝胶抗人球蛋白卡，标记阴性、阳性和待检分区。将需检验的红细胞样本使用生理盐水制作成浓度为0.8%的悬浮液，抽50μL液体于标记管内。分别选50μL阴性和阳性标本液放于试管中，设置为对照组，并马上使用BYL血型血清进行5min的离心机离心，转速和时间分别设定为2min的900r/min，3min的1500r/min。对比结果可以以肉眼进行评定，阳性表现为红细胞凝集在胶表层或胶中层。

②血清游离抗体检验，使用一张微柱凝胶抗人球蛋白卡，对该卡前三个孔分别做Ac、Bc、Oc标记，在该三孔内分别滴入50μL的 A、B、O红细胞，之后再滴入50μL需检查血清。

③热放散法检验，即红细胞抗体释放及释放检验，使用一张微柱凝胶抗人球蛋白卡，对该卡前三个孔分别做Ac、Bc、Oc标记，在该三孔内分别滴入50μL的 A、B、O红细胞。在各标记处滴入50μL放散液。将该蛋白卡放入孵育器，温度为37℃，时间为15min。而后进行5min的BYL血型血清分离，时间为5min，分别为2min的900r/min，3min的1500r/min。对阳性结果判定标准同①。

1.3评定标准 本次研究设计评价指标为对比两组新生儿溶血病检出情况。对新生儿溶血病的判定为①②③项检验结果均为阳性即为新生儿患有新生儿溶血病。若三项结果并不同时为阳性，医生则应该以儿童具体临床病症、表现、DTA、抗体游离检测结果进行综合性分析和确诊。

1.4统计学方法 采用SPSS 20.0对纳入患者资料展开分析，计量值用±表示，计数值用卡方检验，P<0.05，有差异。

2 结 果

常规检测组860名患儿经血液学检测确诊新生儿溶血病患儿638人，常规检测出新生儿溶血病患儿492人，准确率为77.12%。凝胶检测组860名患儿经血液学检测确诊新生儿溶血病患儿661人，凝胶检测出新生儿溶血病患儿635人，准确率为96.07%。对比两组新生儿溶血病检验准确率，凝胶检测组明显好于常规检测组，存在统计学意义，P<0.05。

3 讨 论

新生儿溶血病会导致多种疾病，如黄疸、贫血、核黄疸等，严重者会致使新生儿死亡[2]。有效的新生儿溶血病诊断手段能够及时确定新生儿的疾病状态，并及早地进行治疗干预，从而提升新生儿的健康程度和新生儿溶血病的治疗效果。微柱凝胶技术是一种新型的、高效的新生儿溶血病检测手段，在检测中需注意阳性和阴性对照物的制作，从而提升检测准确率[3][4]。使用生理盐水对O型Rh阳性红细胞冲洗3次，做成浓度为0.5-1.0%的红细胞悬浮液，为阴性对照物。使用2份1:32抗体效价的IgG抗-D血清和1份O型Rh阳性红细胞进行融合，进行30min的37℃水浴孵育，再使用生理盐水冲洗3次，做成浓度为0.5-1.0%的红细胞悬浮液，为阳性对照物[5]。另外，在热放散法检验时需注意对的配置，使用生理盐水对需检验人员血红细胞进行三次冲洗，制成悬浮液，取500μL悬浮液与500μL生理盐水进行混合，以灭活的AB型血清或清蛋白为最佳。将混合液加入试管，进行10min的水浴，温度设为56 ℃，不断振摇。而后取出试管放于56℃热套管中，进行5min2000r/min的离心操作，取样上清液，为放散液。本次研究中对比两组新生儿溶血病检验准确率，凝胶检测组明显好于常规检测组，存在统计学意义，P<0.05。

总而言之，微柱凝胶技术是一种新型高效的新生儿溶血病诊断手段，具有操作便捷、诊断准确率高、特异性好等优点，可以普遍应用于临床新生儿疾病诊断和筛查之中。