GB 5009.27—2016检测食品中 苯并（a）芘时注意事项

◎ 崔瑞霞，赛 平

（河南中测技术检测服务有限公司，河南 郑州 450000）

《食品安全国家标准 食品中苯并（a）芘的测定》（GB 5009.27—2016）[1]是国家市场监督管理总局发布的强制标准，基本涵盖所有可能含有苯并（a）芘食品类别，是食品检测中常用的检测标准。近年来，随着人们生活水平的提高，食品安全也被更多的人关注和重视，其中食品中苯并（a）芘也被列入每年的国家食品抽检项目中。该标准虽然前处理简单，但会出现试剂空白中检出苯并（a）芘、平行样相对偏差大、回收率低等现象，并且存在一定安全隐患。基于此，结合前处理操作过程中需要注意的问题做以下总结。

1 安全防护

苯并（a）芘是一种多环芳香烃类化合物[2]，对人体具有强致癌性、致畸性、致突变性等危害[3-13]。苯并（a）芘的测定一定要在通风橱中操作，带上口罩和手套，尽量减少暴露，同时全部采样器具均应使用玻璃制品，避免与塑料或橡胶接触。检测过程中，部分步骤必须更换手套以防交叉污染，对从事实验过程的整个区域桌面和器具进行有效清理。如已污染了皮肤，应采用10%次氯酸钠水溶液浸泡和洗刷，在紫外光下观察皮肤上有无蓝紫色斑点，直到蓝色斑点消失为止。

2 材料

该标准中有2种净化方法，即中性氧化铝柱净化法和分子印迹柱法净化法，其中中性氧化铝柱需储存在避光干燥的环境中，否则空气中水分会影响中性氧化铝柱的性能，从而直接影响苯并（a）芘的加标回收率。苯并（a）芘分子印迹柱净化法不同厂家的质量差距较大，每次使用苯并（a）芘分子印迹柱前处理时一定要做全程质控加标回收，确定回收率达到要求才能作为检测使用。

3 试剂

样品前处理过程中，会用到水、甲苯、正己烷、二氯甲烷和乙腈，从多次试验中发现，甲苯、正己烷、二氯甲烷、乙腈一定要用色谱纯试剂，并且需做全程试剂空白试验，扣除试剂空白以确保试验数据的准确性。

4 标准溶液

标准溶液是对样品中的目标物定性定量的重要参考物，标准溶液的采购、保存、溶剂和配制过程也是保证实验结果准确非常重要的因素。①采购正规的、能够附有被认可的证书的标准溶液或标准品（纯度≥99%），并且避光保存在0～5 ℃的冰箱中。②标准溶液的溶剂是色谱纯乙腈，要用能准确定量的移液枪逐级稀释标准溶液。③在配制和逐级稀释标准溶液过程用到的枪头、容量瓶和吸量管需要先用干净的色谱纯乙腈润洗至少2遍，在配制和逐级稀释标准溶液过程中需注意需先加入少量乙腈至容量瓶，再加入标准品或标准溶液，最后用乙腈定容。④标准溶液应临用现配。标准溶液放置一段时间后浓度会有所改变，每次用之前应与之前的、同样浓度的标准溶液图谱进行比较，检查其同样浓度的标准溶液峰面积是否有较大的变化，若变化较大应重新采购新的标准溶液或标准物质重新配制。

5 样品制备

样品制备是样品预处理中至关重要的步骤，对后续样品提取和净化起到基石性的作用。一定要取可食用部分，去除杂质，固体样品要打碎均匀或绞碎均匀，保存在样品瓶中，注意样品编号、检测状态和保存温度，待称取用。

6 天平

标准要求使用是千分之一电子天平，先检查其是否水平，再开机提前预热30 min以上。天平室环境温湿度要特别注意，湿度需控制在80%以下，温度控制在 25 ℃左右。前处理过程中用到的玻璃仪器一定要用记号笔做好标记，离心管无污染且刻度清晰，一次性吸管要完全干燥。称取样品前检查样品，充分混匀样品，尽可能减少样品间不均匀性。样品直接称取至50 mL离心管中，尽量不要粘在离心管壁上，称量结束后按要求及时填写天平的使用记录，称重数据直接写在原始记录上。

7 提取

正己烷特别容易挥发，称取好样品的离心管加入正己烷后需尽快拧紧离心管盖。每次加入5 mL正己烷，先涡旋混合0.5 min，再在40 ℃水的超声波中超声提取10 min，此过程中注意控制温度不超过40 ℃。4 000 r·min-1离心5 min，用一次性移液管转移出上清 液，至少提取2次，合并正己烷提取液待净化。

8 净化

日常工作中用苯并（a）芘分子印迹柱，在正式投入使用前要进行验收，确保为合格品。先加二氯甲烷再加正己烷逐次活化柱子，加二氯甲烷的目的是去除固相萃取柱中的残留物，且需注意一定要使用色谱纯的二氯甲烷不能用分析纯二氯甲烷。收集净化液再在水浴温度40 ℃氮吹蒸发吹干，切记在氮吹前一定要用酒精棉擦洗氮吹管，且氮吹管不得离净化液面过近，以防污染样品。

9 上机测定

色谱柱一定要按标准要求用C18柱（4.6 mm× 250 mm，5 μm）或性能相当者。选用合适的色谱柱，柱子过短易造成分离不开、假阳性等问题，流动相用到的乙腈一定是色谱纯，水一定要用GB/T 6682—2008[14]规定的一级水。荧光检测器先预热，最好是检测器灯打开，基线平稳至少30 min后再采集进样。

10 原始记录

原始记录必须做到真正原始，一定要能反映现场状态的全部信息，应及时、准确、完整、客观，具备重现性。①数字修约应符合GB/T 8170—2008[14]数值修约规则与极限数值的表示和判定。②计算按照标准要求结果保留小数点后一位。③记录如需更改要按照《法定计量检定机构考核规范》（JJF 1069—2012）[15]中的要求，在改动的内容处划杠改加签名。④原始记录要三级审核签名，以确认相关信息和数据准确无误。

11 其他注意事项

①化验室新购买的试剂应先做试剂空白，确定试剂是否符合要求。②移液枪使用后应调到最大刻度并放到移液枪专用架子上。③当检测结果在标准规定的临界值附近或离散数据容易造成误判时或检测过程中发生异常情况（如环境变化、仪器故障、停电、停水等）有可能会影响检测结果时需要进行复测。