甘草干姜汤的质量研究进展

王雪芙，孙国祥

（1.沈阳药科大学无涯创新学院，辽宁沈阳 110016； 2.沈阳药科大学药学院）

中药经典名方是经历代中医药名家反复研究和临床实践积累下来的中医药精华，是中医药传承与创新的重要载体。甘草干姜汤方出自东汉张仲景所著《伤寒杂病论》，用于治疗阴阳两虚证与肺痿病，属中药经典名方。现代研究认为，甘草干姜汤可用于治疗因虚寒所致的咳嗽、遗尿、眩晕、胃痛、肺癌、过敏性鼻炎等病症，临床用途广泛[1-3]。甘草干姜汤由甘草四两（炙）、干姜二两（炮）组成（东汉时期一两折合现在13.75g[4]）。甘草干姜汤还是一个重要的中药基础方剂，加味后可得四逆汤、甘姜苓术汤、甘草泻心汤、温脾汤等经典方剂[3]。基于甘草干姜汤在中药方剂学中的重要地位，开展该方剂的系统研究对中医药守正创新具有现实意义。本文对近年来有关甘草干姜汤的药材、炮制饮片和汤剂的质量研究报道进行分类总结和归纳，以期为后续研究提供参考。

1 甘草干姜汤中药材

《中国药典》2015版规定，甘草为豆科甘草属植物（乌拉尔）甘草（Glycyrrhiza uralensisFisch.）、胀果甘草（Glycyrrhiza inflataBat.）或光果甘草（Glycyrrhiza glabralL.）的干燥根和根茎[5]。研究表明，东汉时期的甘草为乌拉尔甘草，主产地为甘肃、陕西；近现代以来，三种甘草均可药用，主产地为内蒙古、甘肃和宁夏[6]。干姜是姜科植物姜（Zingiber officinaleRose．）的干燥根茎[7]，全国大部地区有种植，基原清晰。

1.1 基原鉴定

中药材基原鉴定属于定性分析，是采用本草学、中药学和植物、动物或矿物形态、分类学等方面的知识，对中药材的来源进行鉴定，确定药材基原正确的学名，以保证中药材品种准确的一种方法[8]。长期以来，植物药基原鉴定普遍采用生药学方法。近年来，分子鉴定成为植物药基原研究热点，特别适用于生药学鉴定较难区分的药材。杨瑞等[9]利用ITS和psbA-trnH序列鉴定不同基原的甘草，发现ITS序列的4个变异点位可用来鉴定乌拉尔甘草，而psb-Ⅳ点位为光果甘草所特有，综合二种序列结果，可以鉴别不同基原的甘草。干姜的分子鉴定尚未见研究报道，可能与干姜基原清晰有关。对于一般中药方剂而言，三种基原的甘草均可使用；但对于古代经典名方，应遵循历史传承。甘草干姜汤中应使用乌拉尔甘草和干姜。

1.2 含量测定

《中国药典》2015版规定，甘草中的甘草苷含量≥0.5%，甘草酸含量≥2.0%，三种甘草均为同一标准；干姜中6-姜辣素含量≥0.6%，挥发油≥0.8%。对于二味药材中其他化学成分的含量测定方法，不同学者做了研究。郑云枫等[10]建立了乌拉尔甘草中4个黄酮类和5个皂苷类化学成分的HPLC含量测定方法，并用于评价不同来源的乌拉尔甘草，发现不同产区种植的甘草4个黄酮成分总含量有显著性差异，内蒙古种植品含量最高；野生品的9个化学成分含量均大幅高于种植品。李鹏辉等[11]制定了干姜中6-姜酚等5种化学成分的HPLC含量测定方法用于药材质量控制，获得了满意的效果。

1.3 指纹图谱

指纹图谱具有特征性和系统性，能够实现中药材的整体质量控制[12,13]。

甘草药材的指纹图谱研究主要集中在乌拉尔甘草。谢佳颖等[14]建立的HPLC指纹图谱确定了7个共有峰，认为适用于甘草的质量评价。李喆等[15]对不同产地的甘草进行指纹图谱相似度评价，均大于0.92。陈慧荣等[16]对于种植的乌拉尔甘草确定了20个共有峰，对于野生品则确定了17个共有峰，发现了二者之间的差异，并认为甘草断面颜色与指纹图谱间具有相关性。乌拉尔甘草的UPLC指纹图谱法较HPLC法能够显著缩短分析检测时间，具有成本优势。王青等[17]建立的UPLC指纹图谱确定了20个共有峰，孙云波等[18]建立的方法确定了24个共有峰。杨天鸣等[19,20]研究了不同产地的乌拉尔甘草的近红外漫反射（NIRDRS）指纹光谱和X-衍射指纹光谱，认为PLSDA模型对不同产地甘草的训练集和预测集分类正确识别率均为100%。PLSDA模型分析同样适用于X-射线粉末衍射光谱，能够准确判别乌拉尔甘草的产地来源及野生或种植来源。王文鹏等[21]建立了乌拉尔甘草水提取物的HPLC指纹图谱及甘草苷和甘草酸的含量测定方法，确定了13个共有峰，实现了指纹光谱检测和2种成分含量测定同时完成。

另有学者做了多基原甘草药材的指纹图谱研究。金辉等[22]对21份不同来源的甘草建立了HPLC指纹图谱，确立10个共有峰。魏珊珊等[23]基于29批次的甘草药材建立的HPLC指纹图谱，确立了29个共有峰。通过图谱分析，发现样品基本分为3类，作者推测可能与甘草药材的3个基原有关。邹桂华等[24]以甘草为反应底物建立化学震荡体系，通过电化学工作站记录电位(E)随时间(t)的变化曲线，建立非线性指纹谱，认为可用于甘草与其伪品的区分鉴别。

干姜的指纹图谱研究报道较多。申玲玲等[25]建立的HPLC指纹图谱确认了6个共有峰。郭琪等[26]通过优化色谱条件确认了10个共有峰，李鹏辉等[11]则确认了24个共有峰。徐佳琪等[27]的研究认为，采用综合评分法对干姜药材HPLC指纹图谱进行分析，可用于评价不同批次、产地的药材质量。韩燕全等[28]建立的干姜UPLC指纹图谱评价了不同干燥方法生产干姜的图谱差异，认为干燥工艺以晾干和60℃真空干燥为宜。

李翔等[29]研究了干姜水提取液和甲醇提取液的HPLC-MSD指纹图谱，在水提取液中确认了5个共有峰，而甲醇提取液中确认了20个共有峰，提示以甲醇为溶剂相较于以水为溶剂能够提取出更多的化学成分。挥发油是干姜的主要活性成分，刘金环等[30]建立的干姜挥发油GC指纹图谱确定了20个共有峰。

2 甘草干姜汤中药材的炮制加工

中药炮制是中医药理论的重要组成部分，具有增效减毒、引药归经、方便制剂、祛除异味等多种作用。

2.1 炙甘草

有研究报道，东汉时期制备炙甘草的方法为微炒法，唐代改为蜜炙，清代为炒制或蜜炙，当代历年版《中国药典》规定炙甘草为蜜炙法[31]。因此，甘草干姜汤中所用饮片，炙甘草应为蜜炙。按《中国药典》2015版规定，方法为先将炼蜜加适量沸水稀释，加入甘草薄片中拌匀，闷透，置炒制容器内，用文火炒至深黄色。每100kg甘草用炼蜜25kg。甘草蜜炙之前需要软化切片，对甘草药材的化学成分具有较大的影响。沈钱能等[32]研究了不同软化方法对甘草质量的影响，作者采用HPLC指纹图谱并测定甘草苷等6个化学成分含量，认为常压蒸润法最为合理。

孙磊等[33]建立了炙甘草HPLC指纹图谱，确认了19个共有峰，评价了不同来源炙甘草的图谱相似度。周萃等[34]研究了甘草不同炮制品的HPLC指纹图谱，发现了炙甘草与生甘草和清炒甘草的差异性。裴玉琼等[35]做了炙甘草HPLC指纹图谱和多成分含量测定研究，建立了较为系统的炙甘草质量评价方法。周倩等[36]采用气相离子迁移谱（GC-IMS）技术分析了炙甘草挥发性物质，确认了76个化学成分，认为是一种可靠的炙甘草检验方法。

2.2 炮干姜

历史上，炮干姜的制备方法主要为清炒法和砂烫法，其中砂烫法可以使中药饮片受热均匀，故现代均采用砂烫法。《中国药典》2015版规定，炮干姜的制备方法为取干姜，以砂烫至鼓起，表面棕褐色。

韩燕全等[37]通过建立UPLC指纹图谱和多指标成分含量测定方法，评价了干姜炮制工艺参数，认为炮干姜的砂烫工艺参数以195℃、7min为宜。龙全江等[38]建立了炮干姜HPLC指纹图谱，并评价了不同炮制工艺对制品的影响。韩燕全等[39]比较了不同产地干姜、炮姜的UPLC指纹图谱，认为干姜和炮姜之间指纹图谱差异明显，所建方法可用于干姜和炮姜的质量控制。

3 甘草干姜汤的质量研究

目前，尚没有甘草干姜汤的中成药批准上市，整体汤剂的质量控制方法研究不多。杨颜芳等[40]研究建立了同时测定甘草干姜汤中8种化学成分的HPLC检测方法，其中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸、异甘草素等5种成分来自炙甘草，6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚等3种成分来自炮干姜，初步实现了该汤剂的质量控制。

4 结语

近年来，《药品管理法》和《中医药法》相继颁布实施，两部法规均提出了加强经典名方的研究，国家药监局还发布了《古代经典名方中药复方制剂简化注册审批管理规定》。中药经典名方的研究被摆在了更加突出的地位，已成为中医药研究的热点领域。

中药汤剂成分复杂，需要建立从药材、炮制加工到临床用药的系统质量控制体系才能保证临床疗效。甘草干姜汤是一个经典的基础中药方剂，具有重要的研究价值。在其基础上加味附子即为四逆汤，具温中祛寒、回阳救逆之功能；加味白术、茯苓即为甘姜苓术汤，具温脾胜湿之功能；加味黄芩、半夏、大枣、黄连即为甘草泻心汤，具益气和胃、消痞止呕之功能；加味附子、大黄、芒硝、当归、人参即为温脾汤，具有攻下冷积、温补脾阳之功能。目前，虽然甘草干姜汤的质量研究基础较好，但仍有深入研究的空间。指纹图谱技术适用于复杂成分体系的中药质量控制，但谱效关系还鲜有研究，整体汤剂的质量研究相对薄弱。近年来，有学者提出了中药质量标志物（Q-Markers）的概念与研究方法，为中药质量研究开创了一个新思路[41]。但尚未有甘草干姜汤的相关研究报道。相信随着研究的不断深入，甘草干姜汤的质量和疗效必将进一步得到保证，也能为其他中药经典名方研究提供借鉴。