稳定型心绞痛患者血清CTRP3、CTRP9水平与冠状动脉斑块性质的关系及其判断价值

董清涛，马乔炎，张平，王勇，杨建

心绞痛是由暂时性心肌缺血引起，以胸痛为主要特征的一种临床综合征。稳定型心绞痛(stable angina pectoris，SAP)又称稳定型劳力性心绞痛，是指心绞痛发作程度、频度在数周内无显著变化。包括SAP在内的急性冠状动脉综合征发生的始动因素为动脉粥样硬化斑块破裂[1-2]。因此寻找评定斑块性质指标，对防治疾病发生、减少住院及降低病死率有重要意义。CT冠状动脉造影可显示冠状动脉主干及主要的粥样硬化斑块，对评价斑块的稳定性有一定的价值[3]。C1q/TNF相关蛋白(CTRP)是一种具有多种调节功能的脂肪因子，在肥胖相关炎性反应及代谢调节方面有重要作用[4]。在心肌梗死大鼠中CTRP3表达水平显著降低，具有抗凋亡、心脏保护和促血管新生的作用[5]。另有研究表明，血清CTRP3浓度在SAP和急性冠状动脉综合征患者中显著下降，血清CTRP9浓度在心肌缺血再灌注损伤小鼠中显著降低，且外源性增加CTRP9浓度后小鼠心肌梗死面积显著缩小[6-7]。但目前关于SAP患者血清CTRP3、CTRP9水平与斑块性质之间相关性的研究较少。因此，现检测SAP患者血清CTRP3、CTRP9水平，CT冠状动脉造影检测患者体内斑块性质，以分析两指标与斑块性质的相关性及二者评定斑块性质的价值，从而为临床上开发早期SAP评价指标提供新思路，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019年1月—2020年5月首都医科大学附属北京康复医院心内科住院SAP患者86例为研究对象(SAP组)， 合并症：高脂血症57例，高血压49例。同期选取医院健康体检者78例作为健康对照组。2组性别、年龄、BMI、TG、TC、LDL-C比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；SAP组吸烟史比例显著高于健康对照组(P<0.05)，HDL-C水平显著低于健康对照组(P<0.01)，见表1。本研究经医院伦理委员会批准，所有受试对象及家属均由专业人员详细告知研究内容并自愿参加，同时签署知情同意书。

1.2 病例选择标准 (1)纳入标准：①符合“慢性稳定性心绞痛诊断与治疗指南”中的诊断标准[8]；②临床病理资料齐全者；③特征性心电图动态演变过程及心电图表现者；④心肌坏死标志物改变者；⑤伴有典型临床表现，如持续时间较长的胸骨后放射痛及压榨性疼痛者。(2)排除标准：①伴有先天性心脏病、心肌病、急性脑血管意外、心脏瓣膜病者；②伴有自身免疫疾病者；③因严重创伤或手术大出血而重度脏器衰竭者；④伴有急性感染性疾病、尿崩症者；⑤伴有严重肝肾功能不全者。

表1 2组临床资料比较

1.3 观测指标与方法

1.3.1 血清CTRP3、CTRP9水平检测：SAP组患者于入院第2天清晨空腹、对照组于体检当日清晨空腹抽取肘静脉血5 ml，离心后收集血清，置于-80℃保存待测。以酶联免疫吸附(ELISA)法检测2组血清CTRP3、CTRP9水平，操作步骤严格按照CTRP3 ELISA试剂盒(武汉艾美捷科技有限公司生产)、CTRP9 ELISA试剂盒(上海科顺生物科技有限公司生产)说明书进行。操作步骤：(1)铺板，CTRP3、CTRP9的单抗稀释后添加到96孔板中，4℃冰箱过夜。(2)目的(标准)蛋白孵育，将各浓度CTRP3、CTRP9多肽标准物于培养箱中37℃孵育2 h。(3)一抗孵育：羊抗人CTRP3、CTRP9多克隆抗体于培养箱中37℃孵育1 h。(4)二抗孵育，二抗置于培养箱中37℃孵育1 h。(5)显色，加入显色液显色后终止反应，30 min内450 nm处用Infinite F50型酶标仪(瑞士Tecan公司生产)测定吸光值。

1.3.2 冠状动脉斑块检测：检测前5 min患者舌下含服硝酸甘油0.5 mg，仰卧位，采用 Brilliance TM Big Bore型CT机(上海涵飞医疗器械有限公司生产)自患者胸廓入口扫描至心脏膈面，后做心脏平扫。采用Schroder分型方法将斑块分为：软斑块(-42～60)HU，混合斑块(61～120)HU，硬斑块(121～736)HU[9]。

2 结 果

2.1 2组血清CTRP3、CTRP9水平比较 SAP组血清CTRP3、CTRP9水平低于健康对照组(P<0.01)，见表2。

表2 2组血清中CTRP3、CTRP9水平比较

2.2 SAP患者各型斑块发生率 CT冠状动脉造影结果显示，SAP患者中以硬斑块为主55例(63.95%),软斑块次之21例(24.42%)，混合斑块最少10例(11.63%)。

2.3 各型斑块SAP患者血清CTRP3、CTRP9水平比较 硬斑块和混合斑块患者血清CTRP3、CTRP9水平显著高于软斑块患者(P<0.05)；而硬斑块患者血清CTRP9水平高于混合斑块患者(P<0.05)，见表3。

表3 各型斑块患者血清CTRP3、CTRP9水平比较

2.4 影响SAP发生的多因素分析 将是否发生SAP作为因变量，以CTRP3、CTRP9、斑块性质作为自变量进行Logistic回归分析，结果显示冠状动脉软斑块是影响SAP发生的独立危险因素，CTRP9是影响SAP发生的保护因素，见表4。

3 讨 论

SAP是冠心病的最常见表现之一，它是指冠状动脉血流不能满足心肌代谢需要而造成心肌缺血，进一步引发的心绞痛，SAP病情可通过服用药物或休息得到缓解。一般包括SAP在内的临床急性冠状动脉事件的发生都与斑块成分和稳定性有关，不稳定斑块破裂并诱发血栓是冠心病患者死亡的主要原因[10-11]。因此，探究斑块性质、寻找斑块性质评定指标，对降低心血管事件发生几率、降低患者病死率具有重要意义。

表4 影响SAP发生的多因素Logistic回归分析

近年来CT冠状动脉造影技术迅速发展，因其安全可靠、简便易行等优点，在冠心病诊断和危险分层中发挥重要作用[12-13]。CT冠状动脉造影测定粥样斑块区可将其分为软斑块、硬斑块和混合斑块，在评价冠状动脉粥样斑块性质方面有许多优点[14]。研究显示，混合斑块和硬斑块纤维帽较厚，脂质核心小，所以较稳定不易破裂。软斑块内部细胞外胆固醇含量高，并可呈多病灶，不稳定且易破裂，是诱发心血管事件的因素之一[15-16]。本研究CT冠状动脉造影结果显示，SAP患者中以硬斑块为主，软斑块次之，混合斑块最少。提示本研究中SAP患者体内斑块多数较稳定、不易破裂，病情目前较稳定，但应密切监测斑块性质，及时采取有效措施。

CTRP3又称为CORS-26，是近年来新发现的一种脂肪因子。CTRP3可抑制炎性反应，对血管舒张、诱导内皮细胞增生及迁移、心肌细胞凋亡等具有重要作用，是内源性的心血管保护因子，在心力衰竭治疗中可发挥重要作用[17-18]。CTRP9是CTRP家族中与脂联素(APN)同源度最高的脂肪因子，在脂肪组织中大量表达[19]。研究表明，CTRP9参与肥胖相关心血管疾病的病理过程及心脏正常的生理过程，与血管舒张有密切联系，可改善肥胖相关的糖脂代谢紊乱及心血管疾病[20]。杨和运等[21]研究发现，随疾病加重，冠心病患者血清CTRP3、CTRP9表达水平降低，与本研究中CTRP3、CTRP9变化趋势一致。本研究结果提示，与健康人群相比，SAP患者血清CTRP3、CTRP9呈低表达，推测其可能机制为：SAP患者出现病理变化后，导致其血清CTRP3、CTRP9表达量降低，进而使体内糖脂代谢发生紊乱，最终造成心肌功能出现异常，加速SAP病情发展。本研究中硬斑块和混合斑块患者血清CTRP3、CTRP9水平显著高于软斑块患者；硬斑块患者血清CTRP9水平显著高于混合斑块患者。提示SAP患者血清CTRP3、CTRP9水平与斑块性质可能有一定相关性，推测其可能机制为：病理变化造成血清CTRP3、CTRP9水平降低后，其无法减少动脉粥样硬化斑块及血管平滑肌细胞内钙盐的沉积，造成此时SAP患者体内可能多数为不稳定、易破裂的软斑块。进一步提示，临床上可通过密切监测CTRP3、CTRP9水平推测患者体内斑块性质，以便及时干预以稳定斑块、防止破裂发生，同时有效预防心血管事件发生。

综上所述，SAP患者血清CTRP3、CTRP9水平呈低表达，且与CT冠状动脉造影显示的斑块性质呈一定的相关性，三者与SAP病情密切相关。CT冠状动脉造影技术联合血清CTRP3、CTRP9水平监测，对早期发现软斑块并及时干预有一定临床参考意义。

利益冲突：所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明

董清涛：设计研究方案，实施研究过程，论文撰写；马乔炎：提出研究思路，分析试验数据，论文审核；张平：实施研究过程，资料搜集整理，论文修改；王勇：进行统计学分析；杨建：课题设计，论文撰写