姜仁组合物联合抗呕吐作用研究

龙腾腾，吴李娜，郭春丽，徐翠梅，王鸣慧，岳 旺

(青岛黄海学院护理与健康学院，山东 青岛 266427)

呕吐是常见于妊娠、胃肠道疾病、手术后、晕动症、脑部疾病等的临床症状，可导致脱水、营养不良、电解质紊乱和代谢性酸中毒等不良反应，严重影响病人生存质量[1]。目前临床常用化学止呕药物毒副作用较大，如多巴胺拮抗剂、抗组胺药、吩噻嗪类、抗胆碱能药、抑制5-羟色胺(5-HT)类药、NK1受体拮抗药和激素类药物[2-4]。中药治疗呕吐历史悠久，因其有着多组分、多靶点、综合协同治疗的特点和疗效好、副作用小的优势，深受众多医药研究者的关注。因此，开发新型、高效、低毒、多靶点的中药止呕药物成为目前研究的热点。

姜(ZingiberofficinaleRosc.)为“呕家圣药”，其中的活性成分姜辣素(Gingerols)已被证实为多靶点、天然低毒止吐药[5]。砂仁(AmomumvillosumLour.)是我国重要的传统中药,《中华本草》中将砂仁列为上品，其味辛、性温，入脾、胃、肾经，主治脾胃虚寒、呕吐泄泻、妊娠恶阻、胎动不安、湿浊中阻[6]。另《玉揪药解》中记载：砂仁和中调气，呕吐与泄泻皆良。本试验将两味传统止呕药物制成生姜与砂仁组合物(以下简称姜仁组合)，研究其联合抗呕吐的作用效果，以期为生姜与砂仁的高效利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 动物 健康成年雄性水貂，体重1.3～1.6 kg，购自青岛特种养殖动物饲养中心。每只水貂单独置于铁笼中(75 cm×50 cm×50 cm)，24 h自然光照射，试验前自由摄食和饮水。昆明系小鼠，体重(20±2)g，购自青岛市药检所实验动物中心。24 h自然光照射，试验前自由摄食和饮水。

1.2 试剂 顺铂，购自山东齐鲁制药厂；硫酸铜，购自上海亨达化学制品公司；阿扑吗啡，购自美国Sigma公司；盐酸昂丹司琼注射液，购自奥赛康制药公司；生姜，购自山东平度；砂仁，购自青岛众生大药房；均由山东省立医院丁波医师鉴定。

1.3 方法

1.3.1 姜仁组合和姜辣素样品的制备 生姜砂仁水煎浓缩提取物的制备：取生姜、砂仁按照配伍比例为1∶1，浸泡于10倍量蒸馏水中1 h，于加石棉网的电炉上加热煎煮1 h，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍蒸塯水，同法浸泡、煎煮、过滤，将2次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70 ℃减压干燥36 h得粉末，即为生姜砂仁水煎浓缩提取物。

姜辣素的制备[7]：生姜切成薄片，自然干燥后置于高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放入5 000 mL大磨口瓶中，以6倍量丙酮常温下浸泡72 h；在40 ℃，40 kHz的超声波频率下超声提取15 min；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤得滤液，置于旋转蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。

1.3.2 姜仁组合抗顺铂致呕作用的研究 将水貂随机分为4组(n=6)，分别为顺铂模型对照组、昂丹司琼阳性药物组、姜辣素组和姜仁组合组。分别给予生理盐水、昂丹司琼7.5 mg/(kg·bw)、姜辣素10 g/(kg·bw)(相当于含生药量1 g)和姜仁组合10 g/(kg·bw)(相当于含生药量1 g)作预处理。各组水貂均在预处理30 min后给予顺铂7.5 mg/(kg·bw),腹腔注射，观察其在给药后6 h内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期、干呕次数及呕吐次数。

1.3.3 姜仁组合抗硫酸铜致呕作用的研究 将水貂随机分为4组(n=6)：分别为硫酸铜模型对照组、昂丹司琼阳性药物组、姜辣素组和姜仁组合组。分别给予生理盐水、昂丹司琼7.5 mg/(kg·bw)、姜辣素10 g/(kg·bw)(相当于含生药量1 g)和姜仁组合10 g/(kg·bw)(相当于含生药量1 g)作预处理。30 min后各组水貂均按40 mg/(kg·bw)灌胃硫酸铜，观察其在给药后6 h内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期、干呕次数及呕吐次数。

1.3.4 姜仁组合抗阿扑吗啡致呕作用的研究 将水貂随机分为4组(n=6)：分别为阿扑吗啡模型对照组、昂丹司琼阳性药物组、姜辣素组和姜仁组合组。分别给予生理盐水、昂丹司琼7.5 mg/(kg·bw)、姜辣素10 g/(kg·bw)(相当于含生药量1 g)和姜仁组合10 g/(kg·bw)(相当于含生药量1 g)作预处理。30 min后各组水貂均给予阿扑吗啡0.25 mg/(kg·bw)，腹腔注射，观察其在给药后6 h 内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期、干呕次数及呕吐次数。

1.3.5 急性毒性试验 按国家药品监督管理局1999年11月12日颁布修订的“中药新药研究技术要求”，对姜仁组合进行急性毒性试验。因受药物浓度及体积限制，无法测定LD50，故采用最大耐受量试验。取雌雄各15只昆明系小鼠，给予姜仁组合1 g/mL，每只0.8 mL(小鼠的最大灌胃体积)，用药后观察小鼠饮食、粪便、活动状态、呼吸、体重及死亡情况，连续观察14 d，记录相关数据[1]。

2 结果

2.1 姜仁组合抗顺铂致呕作用的影响 如表1所示，与对照组相比，各治疗组均能显著延长顺铂所致呕吐的潜伏期，降低致呕率并减少干呕及呕吐次数(P<0.01)，其中姜仁组合抗顺铂致呕作用效果在减少呕吐次数方面优于姜辣素组(P<0.05)，说明姜仁组合具有协同抗呕作用。

表1 姜仁组合抗顺铂致呕作用的影响

2.2 姜仁组合抗硫酸铜致呕作用的影响 如表2所示，与对照组相比，各治疗组均能显著延长硫酸铜所致呕吐的潜伏期，降低致呕率并减少干呕及呕吐次数(P<0.01)，其中姜仁组合抗硫酸铜致呕作用的潜伏期比姜辣素组明显延长(P<0.01)，说明姜仁组合具有协同抗呕作用趋势。

表2 姜仁组合抗硫酸铜致呕作用的影响

2.3 姜仁组合抗阿扑吗啡致呕作用的影响 如表3所示，与对照组相比，各治疗组均能显著延长阿扑吗啡所致呕吐的潜伏期，降低致呕率并减少干呕及呕吐次数(P<0.01)，其中姜仁组合抗阿扑吗啡致呕作用的潜伏期比姜辣素组明显延长(P<0.01)，说明姜仁组合具有协同抗呕作用。

表3 姜仁组合抗阿扑吗啡致呕作用的影响

2.4 姜仁组合急性毒性试验 各组小鼠给药后均行为正常，生长良好，体重增加，未见死亡及明显反应。连续观察14 d后将小鼠处死，脏器及病理学观察均未发现异常。试验结果表明，口服最大剂量姜仁组合对动物无明显损害，未发现机体产生毒副反应，是安全可靠的药物。

3 讨论

呕吐反应是机体自身防御性反应，其进程分为3个阶段：恶心、干呕和呕吐。呕吐反应与机体前庭器官、外周和中枢神经系统多种机制联系密切。神经递质及其受体在其中起着重要的作用。研究发现，组胺、多巴胺、阿片制剂、乙酰胆碱、5-HT、P物质等神经递质通过与相应受体结合均可引发呕吐反应，目前临床止呕药多为上述神经递质受体拮抗剂，因其效果差、毒副作用大、价格昂贵等因素造成临床应用受限，因此迫切需要开发价格低廉、毒副作用小、天然高效的抗呕药物。

顺铂是抗癌药，常用可引起95%患者剧烈呕吐，因顺铂是5-HT激动剂，一方面通过作用于胃肠道的感觉神经和嗜铬细胞释放5-HT，作用于受体后传入呕吐中枢引起呕吐；另一方面，可直接作用于延脑催吐化学感受区(CTZ)兴奋呕吐中枢引起呕吐[8-9]。硫酸铜是外周性催吐剂,可刺激胃黏膜等感受器，反射性引起呕吐。阿朴吗啡是中枢性催吐剂，主要通过激动多巴胺受体刺激CTZ引起呕吐[10]。本文使用3种经典催吐工具药成功造成水貂呕吐模型，以期初步探讨姜仁组合抗呕的作用机理。

生姜止呕作用机制前人已报道[11]，其止呕活性主要成分为姜辣素，可通过抑制肠道嗜铬细胞释放致吐因子5-HT和P物质，影响中枢和外周的5-HT和NK1等受体的功能，对抗硫酸铜和顺铂等所致呕吐[12-15]。砂仁的化学成分主要有乙酸龙脑酯、樟脑、樟烯、柠檬烯、苦橙油醇、桉油精、芳樟醇等，具有化湿止呕、温脾止泻、理气安胎之功效。在其药理学功效研究方面有抗溃疡、抗腹泻、促进胃排空和胃肠推进运动、利胆、镇痛、抗炎等报告[16]，在止呕方面的研究鲜见报道。

中药对呕吐治疗具有千年应用史，具有独特的防治理论和治疗优势，生姜和砂仁均为中药常用药物，毒性低，使用安全。本试验通过不同作用机理的经典催吐剂-顺铂、硫酸铜和阿朴吗啡构建3种呕吐模型，证明姜仁组合可抑制中枢和外周呕吐反应，为创制新型、天然、低毒、多靶点抗呕吐中药方剂打下试验基础，由于砂仁具有理气安胎之特效，为妊娠呕吐新药的研制提供了理论依据。