珠海地区985例变态反应性皮肤病患者变应原检测结果分析

魏秋姣，杜 鹏，刘小凤，黄嘉怡，沈守星

珠海市慢性病防治中心，广东 珠海 519000

变态反应性疾病又称过敏性疾病，包括过敏性鼻炎、过敏性哮喘、湿疹、荨麻疹、接触性皮炎和过敏性胃肠炎，机体通过吸入、食入、注入或接触某种含有致敏成分的物质（称为过敏原或变应原）后触发机体产生过量的免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)，从而引起各种功能性障碍或组织损伤的一类疾病［1-2］，其病因复杂，而且容易受内外环境因素的影响，导致防治较困难。研究表明，治疗过敏性疾病的关键在于过敏原的检测，如果过敏原检测结果不准确，则无法为医生提供治疗的可靠依据［3］。患者血清特异性IgE(Specific IgE antibodies,sIg)的检测可以确定过敏原，过敏原的分布具有区域、气候、自然环境以及生活方式的差异性，因此，了解变态反应性皮肤病患者血清总IgE和特异性IgE（sIgE）的种类、分布及其相互关系，可以为疾病的诊疗与本地区过敏性疾病的防治提供实验室依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2015年5月—2016年11月珠海市慢性病防治中心收治的变态反应性皮肤病患者985例，男440例，女545例，年龄1个月到83岁，平均年龄26岁。患者在检查前1周未使用过抗过敏及糖皮质激素类等药物。按年龄分为4 组: 婴幼儿组(≤5 岁)123 例，青少儿组(6 岁～19 岁) 150 例，中青年组(20岁～49岁) 481例，老年组(≥50岁) 267 例。

1.2 标本采集与保存

抽取静脉血5 ml，置于干燥管内，3 000 r/min 离心10 min，分离血清，不能及时检测的样本2 °C～8 °C 保存，不超过3天。

1.3 总IgE与特异性变应原的检测

患者总IgE 的检测采用欧蒙医学实验诊断有限公司的总IgE 检测试剂盒，严格按试剂说明书操作，依试剂说明书标准进行反应性判定；特异性变应原的检测采用欧蒙医学实验诊断有限公司的吸入性和食入性特异性IgE(sIgE)抗体检测试剂盒，该试剂盒采用免疫印迹法，膜条上包被了10 种吸入性过敏原：树组合2（柳树/杨树/榆树）、艾草、艾蒿、尘螨组合（屋尘螨/粉尘螨）、屋尘、猫毛、狗上皮、蟑螂、霉菌组合1（点青霉/分枝孢霉/烟曲霉/交链孢霉）、葎草，同时包被了10 种食入性过敏原：鸡蛋白、牛奶、花生、黄豆、牛肉、羊肉、海鱼组合1（鳕鱼/龙虾/扇贝）、淡水鱼组合1（鲑鱼/鲈鱼/鲤鱼）、虾、蟹。实验仪器为欧盟EUROBlotMaster 和EUROLineScan 系统。试验步骤：先将检测膜条预处理，然后加入患者血清与检测膜条在摇摆床上进行孵育，使血清中的IgE 抗体与膜条上包被的相应抗原相结合，然后用缓冲液进行膜条清洗，去掉未结合的抗体，加入酶结合物与IgE 抗体抗原复合物再次孵育，再次洗涤，加入色原/底物液进行孵育，最后经蒸馏水洗涤，风干膜条，粘附于结果判定模板中的塑料膜上。

1.4 结果判定

采用“EUROLineScan”软件自动读取风干后的膜条，按照sIgE 浓度的分级标准，把结果分为0～6 级：0 级为＜0.35 kU/l（未检出特异性抗体）；1 级为0.35～0.7 kU/l(极低抗体滴度，通常没有临床症状，但比较敏感)；2级为0.7～3.5 kU/l（低滴度抗体，如果在该类别的上限，则通常有临床症状）；3 级为3.5～17.5 kU/l（检测到特定抗体，通常会有临床症状）；4 级为17.5～50 kU/l（检测到高滴度抗体，通常具有临床症状）；5 级为50～100 kU/l（检测到高抗体滴度）；6级为＞100 kU/l（检测到非常高的抗体滴度）。

1.5 统计学方法

采用SPSS 17.0 统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t 检验；计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 总IgE和sIgE的检测结果

985 例患者中，578 例总IgE 检测有反应性，716 例sIgE检测有反应性，具体的结果，见表1。

表1 总IgE检测与sIgE检测结果

2.2 sIgE检测结果

716 例sIgE 检测有反应性的样本中，吸入性过敏原最多的是尘螨组合（屋尘螨/粉尘螨），其次是蟑螂，食入性过敏原最多的是海鱼组合1（鳕鱼/龙虾/扇贝），其次是淡水鱼组合1（鲑鱼/鲈鱼/鲤鱼），表中列出前五位组合，详细结果，见表2。

表2 sIgE检测结果

2.3 年龄与特异性变异原分布

将患者分为婴幼儿组、青少年组、中青年组、老年组。吸入性过敏原中各组最多的是尘螨组合；食入性过敏原中，婴幼儿组最多是鸡蛋白，其它三组为海鱼组合，详细结果，见表3。

2.4 总IgE浓度与特异性过敏原等级关系

患者总IgE 数值分为正常组、2 倍参考值组、3 倍参考值组、大于3倍参考范围值组。sIgE各等级占比不随总IgE浓度而改变，除当总IgE的浓度大于3倍参考值时6级数量明显增加，详细结果，见表4。

3 讨论

近年来，由于环境污染、食品安全和生活方式改变等原因，过敏原的种类越来越多，变态反应性皮肤病的发病率较前明显提高［4］。据世界变态反应组织（World Allergy Organization，WAO）白皮书报告，全世界有30%～40%的人被过敏问题所困扰，过敏已成为全球第六大疾病［5］。在日常生活中，常把由IgE 抗体介导的体液免疫反应认为是过敏反应的主要产生机制［6］，主要通过结合多价抗原并交联肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面受体，促使细胞托颗粒而产生炎症反应［7］，而过敏原特异性IgE 与过敏原息息相关，已被纳入多项疾病诊疗指南。因此，总IgE 和特异性IgE检测在过敏性疾病中具有重要意义。

我们对985 例患者进行了总IgE 和sIgE 的检测，总IgE检测有反应性578 例（58.7%），sIgE 检测有反应性716 例（80.7%），总IgE 与sIgE 具有相关性（χ2=42.5，P<0.01）。sIgE 检测分为吸入性和食入性，吸入性过敏原最多的是尘螨组合（屋尘螨/粉尘螨），占58.2%，其次是蟑螂，占33.0%，与国内其它南方地区的研究结果基本一致［8-10］，但新疆［11］以艾蒿、树组合为主，这可能与当地的气候环境有关，南方地区夏季高温高湿并且长期使用空调容易导致室内空气流通不均，有利于螨虫和蟑螂的繁殖生长；食入性过敏原最多的是海鱼组合1（鳕鱼/龙虾/扇贝），其次是淡水鱼组合1（鲑鱼/鲈鱼/鲤鱼）、蟹，国内部分研究与本研究结论相同［12-13］，但有些研究表明牛奶是主要的过敏原［14-15］，主要原因可能是珠海作为沿海城市，居民喜欢食用海鲜。同时，我们将患者按年龄分为婴幼儿、青少年、中青年、老年四组，各组吸入性过敏原最多的是尘螨组合，而食入性过敏原中，婴幼儿组最多是鸡蛋白，其它三组为海鱼组合，笔者猜测这是由于婴幼儿与成人具有不同的饮食结构。有报道指出，鸡蛋致敏主要发生在生命早期，我们应该密切监测婴幼儿食物过敏情况，避开这些变应原［16］，但鸡蛋具有较高的营养价值，又是中国餐桌常见食物，是否完全抛弃需要慎重考虑。

表3 年龄与特异性变异原分布的关系

表4 总IgE与特异性过敏原等级关系

对总IgE 浓度与sIgE 的等级之间的关系进行分析，发现sIgE 等级1 级在各总IgE 浓度组别中占主要部分， sIgE的各等级的占比不随总IgE浓度的变化而变化，但当总IgE的浓度大于3 倍参考值时，sIgE 等级6 级数量明显增加，所以笔者推测较低浓度的总IgE 与sIgE 的等级即临床症状没有必然的关系，但在高浓度时关系得到加强。可能的原因有：（1）参加检测的患者处于疾病非发作期；（2）患者过敏反应可能由检测项目以外的其他过敏原引起；（3）患者处于疾病高峰期与IgE 耗竭期，出现假阴性结果［17］。

过敏原阳性患者可根据检测报告调整自己的食物结构或者生活方式。吸入性过敏原阳性者要避免与过敏原接触，改善居住环境，保持房间通气干燥，衣被充分晾晒，清洁空调、空气净化器滤网等，不养宠物［18］, 食入性过敏原阳性者要尽量避免摄入含阳性成分的食物。由于包被抗原的种类与抗原特异性的限制，过敏性疾病与变应原的检测做不到完全符合，临床医生在结果解释时需慎重。虽然过敏原检测安全可靠，但也存在着缺乏符合我国国情的检测项目和阳性预计值参考范围以及没有国内标准物质的缺点。