支秀霞,米 兰,刘朝晖,3,张 岱
(1.北京大学第一医院,北京 100000;2.北京市密云区妇幼保健院,北京 101500;3.北京市妇产医院,北京 100000)
女性阴道微生态体系是由阴道内的微生态菌群、机体的内分泌调节功能和解剖结构共同组成[1]。健康妇女阴道内存在多种正常微生物群落。各种微生物之间相互制约、相互作用、相互依赖以及阴道局部的免疫状态使微生物群与宿主、环境保持着协调、动态的平衡[2]。近年来随着基础研究的进展及益生菌制剂的出现,阴道微生态学日益受到人们的关注。目前临床上能够明确诊断的和不明原因的阴道感染,都存在不同程度的阴道微生态失调。为了更好地了解阴道微生态体系在妇女阴道感染中的变化,了解影响阴道微生态体系动态平衡的因素,从而通过改变生活方式来改善阴道微生态环境,我们对701例健康妇女进行了研究。
2008年7月在北京大学第一医院妇产科门诊进行健康体检的妇女701例。
1.2.1 阴道微生态检测步骤
(1)取样:所有研究对象均用无菌刮板及长棉签从阴道侧壁上1/3取得阴道分泌物。
(2)盐水湿片:直接光镜检查清洁度及有无滴虫。
(3)涂片后革兰染色,显微镜下进行阴道微生态检测。
1.2.2 阴道微生态检测内容:Gram染色后显微镜检测[3]
(1)菌群密集度:根据油镜下每视野平均细菌数分为I~IV级。I级:1~9个/油镜视野,II级:10~99个/油镜视野,III级:油镜下每视野平均细菌数在100个以上光镜下观察细菌满视野,IV级:光镜下观察细菌聚集成团、或密集覆盖粘膜上皮细胞。
(2)菌群多样性:根据光镜下观察细菌的形态分为I~IV级。Ⅰ级:能辨别1~3种细菌,Ⅱ级:能辨别4~6种细菌,Ⅲ级:能辨别7~10种细菌,Ⅳ级:能辨别11种以上细菌。
(3)优势菌:根据所见数量最多的微生物定义为优势菌。
(4)病原微生物:主要是真菌菌丝和/或滴虫。
(5)采用Nugent标准积分[4]≥7分,诊断为细菌性阴道病(BV)。
1.2.3 问卷调查:通过问卷调查了解体检女性的各项客观指标,包括年龄、职业、受教育程度及居住城市;与性行为相关的因素包括性行为频率、性伴侣数目、避孕方式等;与感染症状相关因素为是否有外阴不适、不适症状及持续时间;与既往病史相关的因素包括是否做过宫颈涂片检查、检查方式及结果,本人是否患有外阴湿疣、性病或HPV感染,本人是否有吸毒史,性伴侣是否有前列腺癌或阴茎癌病史,伴侣是否有性病史等。
采用SPSS 16.0进行统计学处理。对性行为等影响因素的比较采用Spearman非参数相关分析,对于避孕方式的比较采用x2检验。P<0.05认为差异有统计学意义。
701例妇女的阴道微生态情况:菌群正常者560例,占79.9%。异常菌群114例,占16.2%,包括BV中间型、BV、VVC、菌群异常、菌群抑制、菌群增殖过度。其中,BV中间型31例,占4.4%,BV阳性者20例,占2.9%,VVC阳性者37例,占5.3%。另有27例无微生态结果。
正常菌群的密集度为++~+++,多样性主要为+~++,占98.2%。菌群异常者密集度多为+~++,占92.3%,菌群抑制者密集度和多样性均为+及以下。菌群增殖过度的密集度为++++,多样性为++~+++,BV及BV中间型的密集度为+++~++++,多样性为+++,占98.0%。VVC的密集度以+++为主,占91.2%,多样性为+~++,占97.3%,见表1。
表1 阴道菌群密集度及多样性
正常菌群100%为革兰阳性大杆菌,即乳酸杆菌。菌群异常全部为革兰阳性球菌,菌群抑制、增值过度及VVC时的优势菌均为乳酸杆菌,见表2。
表2 阴道优势菌
将菌群异常、BV中间型、BV及VVC统称为异常菌群,据此统计,体检女性半年内性伴侣数93.4%为1个,0.6%为3个以上,余16人无信息。性生活频率每天一次为8例(1.1%),每2~3天一次为76例(10.8%),每周一次为356例(50.8%),每月一次158例(22.5%),一月以上一次77例(11.0%)。体检女性避孕方式选择,397人(58.2%)为避孕套,124人(17.7%)为宫内环,74人(10.6%)为安全期,46人(6.6%)不避孕,11人(1.6%)使用紧急避孕药,9人(1.3%)每天口服短效避孕药,5人(0.7%)使用避孕杀精剂,2人(0.3%)采用绝育术避孕。
利用Spearman非参数相关分析,发现性生活频率与微生态结果之间不相关,相关系数为0.073(P>0.05)。性生活频率与菌群密集度相关,相关系数为-0.116(P=0.003)。性生活频率与菌群多样性无关,相关系数为-0.075(P=0.056)。
将菌群异常、菌群抑制和菌群增值过度均纳入异常菌群的范畴,比较不同避孕方式对微生态结果的影响,将每天口服短效避孕药的人群与服用紧急避孕药的人群划为一组,将不避孕的人群与绝育的人群划为一组,采用χ2检验比较,6组人群微生态结果差异有显著性(x2=16.788,P=0.005)。对使用避孕套和宫内节育器避孕的女性再次应用χ2检验比较,微生态结果差异有显著性(x2=14.248,P<0.001)。
阴道微生态评价体系通过对女性阴道菌群的描述,特别是对阴道内乳杆菌的存在状态及功能的了解,将为临床诊断、治疗及评估预后提供充足的依据。
首先,阴道微生态评价不仅可以快速诊断临床常见的阴道炎症如BV、VVC,还可以对目前临床上有白带增多、外阴瘙痒等症状而用现有方法难以诊断的阴道炎症进行微生态分析,从而达到指导临床治疗的目的。特别是非特异性感染,如需氧菌性阴道炎等,能很好地被识别。
其次,阴道微生态临床评价能够客观指导临床治疗,评估预后,它使临床治疗真正做到有据可依。随着医学的进步,感染性疾病的诊断逐渐从单纯的病原学诊断转变为病原学结合微生态学诊断,微生态学诊断将使大量无法确定病原体的混合感染患者得到良好的临床治疗。
通过阴道微生态的评价可以更好地指导妇女的行为。我们的研究认为性生活过频将使阴道菌群数量增加,但是否会导致微生态异常还有待更大样本的证实。宫内节育器的使用会导致阴道菌群异常的发生率增加,然而WHO发布的计划生育推广者手册[5]仅认为宫内节育器会增加盆腔炎发生的几率,并未提及其对阴道菌群的影响,其具体机制还有待进一步研究。