三七丹参片功能学实验研究

张兴城，高明海 ，游晓蕾 ，董勇波 ，张维清 ，赵 爱

（1.文山华信三七股份有限公司，文山663099；2.文山学院文山三七研究院，文山663099）

三七[Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen]为五加科植物，全株可入药，临床应用广泛。三七具有止血消炎、对中枢神经抑制、增强免疫力等的功效作用[1]。丹参为唇形科鼠尾草属多年生草本植物，现代研究认为，丹参具有较好的活血化瘀作用，广泛用于心血管系统疾病，具有改善微循环、抗菌等作用[2]。本文通过经口给予小鼠不同剂量的三七丹参片实验，研究三七丹参片的增强免疫力功能，为进一步开发产品提供帮助。

1 材料、实验动物、实验条件

1.1 样品

由文山华信三七股份有限公司出品 （北京御生堂保健食品有限公司生产），批号：20170801。送检样品为片剂，实验前将样品用粉碎机粉碎，以1%羧甲基纤维素钠为溶媒配制成不同浓度的样品液供实验用。

1.2 实验动物

实验用ICR小鼠由选浙江省实验动物中心提供，实验动物生产许可证号为SCXK （浙）2014-0001，SPF级，雄性，体重为18～22g。实验动物使用许可证号为SYXK（浙）2014-0008。

1.3 实验环境条件

实验条件为：室温20～25℃，相对湿度40%～70%。

2 实验方法

2.1 剂量设计

实验设三个剂量组和阴性对照组（1%羧甲基纤维素钠）。 低、中、高三个剂量分别为 0.43、0.86、2060g/kg BW，相当于人体推荐摄入量的5、10、30倍。分别取样品 8.6、17.2、52.0g加1%羧甲基纤维素钠至 200mL，灌胃给予受试物，灌胃体积为0.1mL/10g BW，对照组予以等体积的溶剂，每天灌胃一次，连续一个月。

2.2 实验方法

2.2.1 ConA诱导小鼠淋巴细胞转化实验（MTT法）

2.2.2 绵羊红细胞（SRBC）诱导小鼠DTH实验（足跖增厚法）

2.2.3 抗体生成细胞检测（Jerne改良玻片法）

2.2.4 小鼠血清溶血素测定（血凝法）

2.2.5 小鼠碳廓清实验

2.2.6 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验（滴片法）

2.2.7 NK细胞活性测定（LDH测定法）

2.2.8脏器/体重比值

2.3 数据处理

采用SPSS统计软件分析。

3 实验结果

3.1 受试物对ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖能力的影响，结果见表1。原始数据符合方差齐性要求 （P＞0.05）。各剂量组ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增值能力实验光密度差值与阴性对照组比较，差异均无显著意义（P＞0.05）。

表1 受试物对ConA诱导的小鼠淋巴细胞增值能力的影响（x±s）

3.2 受试物对绵羊红细胞（SRBC）诱导小鼠DTH的影响，结果见表2。原始数据符合方差齐性要求（P＞0.05）。各剂量组小鼠左足后跖部24h和0h厚度差值与阴性对照组比较，差异均无显著性意义（P＞0.05）。

表2 受试物对绵羊红细胞诱导小鼠DTH的影响（x±s）

3.3 受试物对小鼠抗体生成细胞的影响，结果见表3。原始数据符合方差齐性要求（P＞0.05）。各剂量组溶血空斑数与阴性对照组比较，差异均无显著性意义（P＞0.05）。

表3 受试物对小鼠抗体生成细胞的影响（x±s）

3.4 受试物对小鼠血清溶血素影响，结果见表4。原始数据符合方差齐性要求（P＞0.05）。与阴性对照组比较，三个剂量组小鼠血清溶血素抗体积数值均升高，差异均有显著性意义（P＞0.01）

表4 受试物对小鼠血清溶血素的影响（x±s）

3.5 受试物对小鼠碳廓清实验吞噬指数的影响，结果见表5。原始数据符合方差齐性要求（P＞0.05）。各剂量组小鼠的吞噬指数与阴性对照组比较，差异均无显著性意义（P＞0.05）。

表5 受试物对小鼠碳廓清实验吞噬指数的影响（x±s）

3.6 受试物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响，结果见表6。吞噬百分率通过X=Sin-1P1/2进行数据转换，转换后的数据符合方差齐性要求（P＞0.05），吞噬指数的原始数据符合方差齐性要求（P＞0.05），与阴性对照组比较，中、高剂量小组腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数均升高，差异均有显著性意义（P＞0.05，P＞0.01）

表6 受试物对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响（x±s）

3.7 受试物对小鼠NK细胞活性的影响，结果见表7.NK细胞活性X=Sin-1P1/2进行数据转换，转换后的数据符合方差齐性的要求（P＞0.05）。剂量组小鼠NK细胞活性与阴性对照组比较，差异均无显著性意义（P＞0.05）。

表7 受试物对小鼠NK细胞活性的影响（x±s）

3.8 受试物对小鼠脏器/体重比值的影响，结果见表8。原始数据符合方差齐性要求（P＞0.05）。与阴性对照组比较，三个剂量组小鼠胸腺/体重比值及脾脏/体重比值的差异均无显著性意义（P＞0.05）。

表8 受试物对小鼠脏器/体重比值的影响（x±s）

3.9 受试物对小鼠体重的影响，结果见表9a-9e。为ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验和NK细胞活性测定实验小鼠体重；表9b为绵羊红细胞（SRBC）诱导小鼠DTH、小鼠血清溶血素测定、抗体生成细胞检测小鼠体重；表9c为小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验小鼠体重；表9d为小鼠碳廓清实验小鼠体重，表9e为脏器/体重比值测定小鼠体重。实验原始数据符合方差齐性要求（P＞0.05），三剂量组小鼠体重在实验的初期、中期及终期分别与阴性对照组比较，差异均无显著性意义（P＞0.05）。

表9 a受试物对小鼠体重的影响（x±s）

表9 b受试物对小鼠体重的影响（x±s）

表9 c受试物对小鼠体重的影响（x±s）

表9 e受试物对小鼠体重的影响（x±s）

4 结论

实验结果表明，与阴性对照组比较，三个剂量组对小鼠血清溶血素抗体积数值均升高；中、高剂量组小鼠小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬率、吞噬指数均升高；以上差异均有显著性意义（P＞0.05，P＞0.01）。三七丹参片具有增强免疫力功能。