MG患者外周血单个核细胞TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF的变化与其病情程度的关系

刘新华 邓建中 范仲鹏

重症肌无力（Myasthenia gravis，MG）属于获得性自身免疫性疾病，病变常累及神经、肌肉接头突触后膜，使其信号传递发生障碍，进而出现骨骼肌收缩无力。随着病情的进展，可出现肢体无力、眼睑下垂、吞咽困难、构音障碍等，严重影响患者的身心健康[1]。目前临床对于MG的发病机制尚未完全阐明，尚缺乏彻底根治MG的方法，已有的研究认为与携带易感基因、环境因素等有关[2]。

目前临床上缺乏MG早期诊断的敏感实验室指标，已有的研究认为MG的发生受到多种神经细胞因子的调控[3]。外周血单个核细胞中肿瘤坏死因子α诱导蛋白3交互作用蛋白1（TNIP1）蛋白可抑制NF-kB细胞，可保护神经细胞，并抑制其凋亡[4]。血清白球蛋白比值（Albumin globulin ratio，AGR）反应机体抗氧化、抗炎能力[5]。血浆血小板源性生长因子（platelet-derived growth factor，PDGF）可调节细胞增殖、分化和迁移过程，促进髓鞘再生，与多种神经系统免疫性疾病有关[6]。本研究探讨了MG患者外周血单个核细胞中TNIP1蛋白、AGR、PDGF的变化及与患者病情的关系，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2014年1月至2017年1月在本院收集的90例MG患者（MG组）、选取健康体检对象90例（对照组）。MG组，年龄26～75岁，平均（51.3±11.3）岁；男42例、女48例，病程3个月至6年，平均（2.8±1.4）年；MG分型：眼肌型51例、全身型39例。对照组，年龄25～79岁，平均（50.4±13.0）岁；男45例、女45例。两组对象的年龄、性别比较，差异不具有统计学意义，具有可比性。

纳入标准：①MG患者的诊断标准参考《中国重症肌无力诊断和治疗指南2015年版》[7]中的标准；②纳入对象年龄19～79岁；③患者入院后经肌电图检测确诊；④本研究取得研究对象的知情同意及医学伦理委员会的批准。

排除标准：①妊娠及哺乳期妇女；②近3个月服用激素、免疫抑制剂药物；③脑卒中病史；④头颅外伤病史；⑤神经系统病史；⑥恶性肿瘤。

1.2 指标检测方法

抽取研究对象空腹静脉血，3000r/min离心分离血清。采用溴甲酚氯染料结合法检测血清总蛋白、白蛋白水平。AGR=白蛋白/（总蛋白-白蛋白）。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清TNIP1蛋白、PDGF。检测仪器为美国伯腾全自动酶标仪，试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.3 QMGS评分标准

重症肌无力定量评分（QMGS）[3]包括复视、睑下垂、面肌、吞咽、发音、左右上肢、肺活量、左右手握力、抬头、左右腿测试，总分0～39分，评分越高表示患者的病情越严重。

1.4 统计学方法

统计软件采用SPSS 16.0版本，计量资料用（±s）的表示，两组间比较采用t检验、组间比较采用χ2检验；数据之间的相关性采用Pearson线性相关分析法，多因素分析采用多元线性回归分析法；P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2组对象的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF比较

MG组患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF水平均显著的低于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 2组对象的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF比较[n=90，（±s）]Table1 Comparison of TNIP1protein，serum AGR and plasma PDGF in 2 groups of subjects[n=90，（±s）]

表1 2组对象的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF比较[n=90，（±s）]Table1 Comparison of TNIP1protein，serum AGR and plasma PDGF in 2 groups of subjects[n=90，（±s）]

组别MG组对照组t值P值TNIP1蛋白（相对表达）0.52±0.160.81±0.1014.581＜0.001AGR 1.39±0.171.83±0.2015.902＜0.001PDGF（pg/mL）6.32±1.8010.57±1.16 18.828＜0.001

2.2 不同类型MG患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF比较

眼肌型MG组患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF水平均显著的高于全身型MG患者，差异具有统计学意义（P＜0.05），眼肌型MG患者QMGS评分显著的低于全身型MG患者（P＜0.05）；（表2）。

表2 不同类型MG患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF比较[n，（±s）]Table2 Comparison of TNIP1protein，serum AGR and plasma PDGF in different types of MG patients[n，（±s）]

表2 不同类型MG患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF比较[n，（±s）]Table2 Comparison of TNIP1protein，serum AGR and plasma PDGF in different types of MG patients[n，（±s）]

分型眼肌型全身型t值P值n 5139 TNIP1蛋白相对表达0.64±0.120.43±0.1510.371＜0.001AGR 1.48±0.111.28±0.1410.657＜0.001PDGF（pg/mL）7.15±1.655.60±1.736.151＜0.001QMGS评分（分）18.4±1.4 22.8±2.76.151＜0.001

2.3 MG患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF与患者病情的关系

MG组患者的TNIP1蛋白（r=-0.682，P＜0.001）、血清AGR（r=-0.558，P＜0.001）、血浆PDGF（r=-0.629，P＜0.001）水平与患者的QMGS评分均呈显著的负相关关系（P＜0.05）。采用多元线性回归分析，QMGS评分=38.062-5.571（TNIP1蛋白）-2.664（AGR）-0.883（PDGF）。

3 讨论

MG是临床常见的获得性自身免疫性疾病，发病原因不明，可能与自身免疫异常、感染、药物、环境等诸多因素有关[8]。目前多数学者认同MG是携带易感基因的个体在环境影响下出现免疫异常，产生抗体攻击神经肌肉接头突触后膜，进而引起骨骼肌无力。MG不仅可影响运动神经系统而致残，随着病程进展还可影响心脏功能而导致患者死亡[9]。

有研究认为，MG的发病与自身反应性B细胞活化为浆细胞后分泌自身抗体有关，因此80%以上的MG患者合并胸腺瘤、胸腺增生等胸腺异常情况[10]。因此临床上常采用胸腺切除术治疗MG，大多数患者病情可以得到良好的控制[11]。目前临床对于MG的临床诊断以新斯的明试验、胸腺CT、MRI、肌电图、乙酰胆碱受体抗体滴度检查等为主，常采取多个检查结果相结合进行诊断，尚缺乏特异性好、灵敏度高的实验室诊断指标[12]。

TNIP1蛋白在NF-kB信号通路中起到负反馈调节作用。有研究发现，NF-kB细胞激活后进入细胞核，促进增殖细胞因子合成。而TNIP1蛋白可抑制NF-kB的上述作用，对炎症性疾病产生一定的保护作用[13]。本研究中MG患者的TNIP1蛋白水平显著的低于健康人群。这一结果提示，MG患者外周血TNIP1蛋白水平显著降低，可将其作为MG诊断的辅助指标之一。MG患者TNIP1蛋白水平较低，在NF-kB信号通路中的负反馈调节作用减弱，不能抑制炎症性疾病的发生。

白蛋白是由肝脏合成的重要蛋白，参与机体抗氧化、抗炎过程，对自身免疫反应进行调节。免疫性疾病患者免疫球蛋白水平升高，白蛋白降低，由此导致血清AGR下降[14]。本研究中MG患者的血清AGR水平显著的低于健康人群。这一结果提示，MG患者外周血血清AGR水平显著降低，可将其作为MG诊断的辅助指标之一。MG患者肝脏合成白蛋白减少，对自身免疫反应的调节作用减弱，这可能是MG患者自身免疫功能异常的原因之一。

PDGF是人体重要的生长因子，与受体结合后启动多种信号通路，参与细胞增殖、分化、迁移。有研究发现，PDGF可调节少突胶质细胞向脱髓鞘部位迁移而促进髓鞘修复[15]。本研究中MG患者的PDGF水平均显著的低于健康人群。这一结果提示，MG患者外周血PDGF水平显著降低，可将其作为MG诊断的辅助指标之一。MG患者PDGF水平下降，影响多种信号通路，不能较好的调节少突胶质细胞向脱髓鞘部位迁移，不利于髓鞘修复而致肌无力。

根据病变的严重程度可将MG患者分为眼肌型MG和全身型MG。眼肌型MG患者的病情较轻，病变仅局限于眼肌周围。而全身型MG患者病情较严重，已累及全身骨骼肌。本研究发现，眼肌型MG患者QMGS评分显著的低于全身型MG患者，这一结果也证实，全身型MG患者的病情更加严重。本研究还细化分析了不同病变程度的MG患者TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF水平的变化，发现眼肌型MG组患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF水平均显著的高于全身型MG患者，这一结果提示，随着MG病情的进展，患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF水平均进一步下降。相关性检查结果也证实，MG组患者的TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF水平与患者的QMGS评分均呈显著的负相关关系。这一结果提示，MG患者外周血TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF水平的下降与患者病情加重有关，可将其作为评估MG病情和预后的指标。

综上所述，MG患者外周血TNIP1蛋白、血清AGR、血浆PDGF水平降低显著，并且与患者病情加重有关。