陈婉婵 刘见欢 黄金时 林春明 梁逸仙
广东省东莞市第三人民医院检验科,广东东莞 523326
脓毒血症是一种常见的并发症,常出现在内、外科重症疾病的患者身上,是一种自我破坏炎性反应的过程,并且整个反应都不受控制。患者体内一般有高度可疑的感染灶或有细菌存在。虽然目前脓毒血症的病理过程研究以及治疗手段取得了不小的进步,但该疾病仍具有极高的病死率[1]。一旦机体内炎症因子的水平出现异常,产生过度的炎症反应,那么机体内的细胞组织都会被损坏,器官功能也会产生障碍,后期会发展成为脓毒血症休克等重症疾病[2]。因此,早期诊断脓毒血症成为必不可少的手段,我院分别利用PCT、SAA、SOD、IL-10 检测两组研究对象,发现四种方法均有一定的诊断效果,现报道如下。
选 取2017 年1 月~2018 年1 月 我 院 收 治的脓毒血症患者52 例作为研究组,再选取52 例健康人群作为对照组。纳入标准:外周血白细胞<4×109或>12×109个/L;研究组患者呼吸>20次/ 分,体温<36℃或大于38℃,心率>90 次/ 分;血培养结果为阳性。排除标准:近期有使用抗生素,并在医院接受治疗;存在恶性肿瘤或血液系统疾病。
对 照 组 中 男35 例,女17 例,平 均 年 龄(42.5±7.2) 岁,Neu 计 数(64.5±14.6)%,WBC(8.8±5.5)×109/L;研究组中男31 例,女21 例,平均年龄(40.5±7.6)岁,Neu 计数(78.2±19.5)%,WBC(13.8±6.2)×109/L;两组患者的一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性,均知情同意本研究,并经过医院伦理委员会批准。
于清晨采集所有患者的外周静脉血定容至5mL,以3000r/min 的速度离心10min,分离后取出血清,用于上机检测PCT、SAA、SOD。抽取外周静脉血定容至2mL 用EDTA-K2 抗凝上机检测IL-10。采用RocheE602 全自动电化学发光免疫分析仪检测PCT 水平[3],试剂盒来自Roche 有限公司;采用广州市微米生物科技有限公司研发的全自动特种蛋白分析仪,利用免疫荧光层析法检测SAA 水平,试剂来自广州市微米生物科技有限公司[4];应用美国BD FACSCalibur 流式细胞仪检测IL-10 水平,试剂来自美国BD 公司;SOD 检测采用的试剂盒来自南京建成生物工程研究所[5]。采用Sys-mex XE5000五分类血细胞分析检测Neu 计数和WBC[6]。
对比记录两组研究对象的四种检测方法的水平,并计算各检测方法的敏感度以及特异性。
研究组患者的PCT、SAA、IL-10 检测水平[(3.7±0.6)ng/mL,(371.6±195.8)mg/L,(73.3±20.5)ng/L]均 显 著 高 于 对 照 组[(3.1±0.7)ng/mL,(182.5±150.3)mg/L,(18.9±6.27)ng/L],SOD 水平(72.8±3.8)U/mL 低于对照组(256.8±13.6)U/mL(P<0.05),见表1。
表1 两组四种炎性指标水平比较
IL-10(ng/L)对照组 52 3.1±0.7 182.5±150.3 256.8±13.6 18.9±6.2研究组 52 3.7±0.6 371.6±195.8 72.8±3.8 73.3±20.5 t 6.256 11.319 11.208 6.526 P<0.05 <0.05 <0.05 <0.05组别 n PCT(ng/mL)SAA(mg/L)SOD(U/mL)
PCT 与SAA 成正相关,PCT 与ESA、Neu 无相关性,PCT 与WBC 的相关性较弱(P<0.05),见表2。
表2 PCT与各炎症因子的相关性分析
表2 PCT与各炎症因子的相关性分析
指标 R P OR 95%可信区间WBC 0.111 0.034 8.34 0.695~0.810 Neu 0.052 0.332 6.23 0.645~0.776 SAA 0.622 0.000 9.45 0.689~0.802 ESA 0.334 0.210 3.45 0.655~0.612
脓毒血症具有死亡率高、病情凶险的特点,发病率普遍较高,随着人口的快速增长,死亡率也逐渐上升至55%。临床认为治疗脓毒血症应在1h 内,若能掌握高效的确诊方法,病死率可下降5% ~10%[7]。虽然脓毒症是因为感染而引发的,但其发展却会遵循自身的病理规律及过程,所以本质上来说脓毒症是机体对感染性因素的一种反应[8]。临床常见的诊断依据是及宿主对病原微生物的全身炎症反应综合征以及宿主的感染状态,检查方法一般是血培养,但血培养的阳性率低,并且花费的时间长,极有可能会错失最佳的治疗时机,因而诊断价值不高,由此寻找科学高效的诊断方法尤为必要[9]。
PCT 能够将全身炎症反应的活跃程度反映出来,可以作为监控炎症活动的参数[10]。在健康人群中,PCT 的检测水平较低,一般<0.1ng/mL[11]。当人体患有细菌感染性疾病时,PCT 的水平就会升高,这是因为机体一旦受到细菌感染,在2 ~3h 内,甲状腺以外的组织就会合成大量的PCT 并就此表达,并且在发病后15h 内会快速升高,24h 内便可达到峰值,此外,机体在受感染的12h 内会出现炎症反应,这会激发相关组织再次合成PCT,此时,PCT 的高水平也会就此维持,因此,该指标已广泛用于诊断感染性疾病[12]。但有关研究认为,PCT 水平的高低无法预测死亡,高水平的PCT 只能起到警示作用,尽可能早的提示脓毒血症、严重脓毒血症等严重感染性疾病状态。若能结合患者的临床表现、hs-CRP 和SAA 等其他感染性指标,可进一步提高脓毒血症诊断的灵敏度和特异性。SAA 也是一种较为敏感的炎症反应标志物,主要由肝脏合成,是肝脏炎性因子刺激了成纤维细胞和巨噬细胞而产生的,是载脂蛋白的家族成员之一。当机体受到轻度感染时,SAA 水平能在5 ~6h 内提高1000 倍左右,但不久后就会迅速下降,因此其作为一种诊断标志的可靠性较差[13]。SOD 属于抗氧化防御系统,主要存在于抗氧化酶中是一种非特异的辅助性的诊断标志。脓毒症患者出现的炎症反应、内毒素以及内分泌代谢紊乱等都会引发强烈的氧化应激反应,生成大量的样氧自由基,SOD 的水平就会下降[14]。IL-10 主要参与免疫反应与炎症反应,能够调节细胞的分化与生长,在造血系统、肿瘤、器官移植、心血管系统以及感染中发挥重要的作用。IL-10 能够在T 辅助细胞的帮助下,调节宿主的反应,避免出现IL-6 的表达过度的现象,但若抗炎介质过度了也会抑制免疫功能,因此,IL-10 只能在一定程度上评估脓毒血症的严重程度[15]。有研究表明,IL-10 能够阻碍B 细胞的分化,降低免疫系统的功能,抑制体内相关细胞因子的释放,患者血清中IL-10 水平升高可能与全身中毒感染有着紧密联系,并且预示着预后一般为不良。抗炎介质IL-10作为脓毒血症细胞因子瀑布中的抗炎因子可抑制TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8 等促炎因子的合成。本研究结果显示,脓毒血症患者IL-10 水平均明显升高,并且会随着病情的加重而不断升高。这可能与脓毒症所致血管内皮损还导致IL-6 失控性释放,促炎介质与抗炎介质动态平衡被打破有关。同时也说明IL-10 可在一定程度上作为脓毒血症严重程度及预后的评估指标。本研究发现,脓毒症组患者血清中PCT、SAA、IL-10 水平均高于非脓毒症组,说明脓毒症组患者感染水平和体内炎症反应逐步增强,并且炎症反应会随着时间逐步加重,预后不良症状较难改变提示有感染病灶的存在。其在本次研究中,研究组患者的PCT、SAA、IL-10 检测水平均显著高于对照组,SOD 水平低于对照组(P<0.05)。本研究也存在一些局限性。本研究样本数量少,持续时间短,后续需要进一步进行多中心大样本的研究。并且只分析了 PCT、SAA、SOD 和IL-10 在脓毒血症中的临床应用,而对于其他感染性疾病未作分析。
综上所述,PCT、SAA、SOD、IL-10 均可诊断脓毒血症,四种方法联合检测具有较好的诊断价值,值得在临床广泛推广应用。