几丁质酶1和热休克蛋白72对2型糖尿病肾病的早期诊断价值

岳新，陈燕芳

（1.河南中医药大学第一附属医院 内分泌科，河南 郑州 450004；2.郑州澍青医学高等专科学校，河南 郑州 450064）

临床上糖尿病的发病率相对较高，给社会及患者家属造成不同程度的负担。2 型糖尿病在所有糖尿病中占比约为90%，而2 型糖尿病肾病是该病患者最为常见的一种慢性并发症，由于2 型糖尿病肾病后期会不 可逆转的发展为终末期肾病，在一定程度上增加致残率和病死率，对患者的生命健康安全造成严重影响[1-2]。2 型糖尿病肾病患者主要临床表现包括由糖代谢紊乱、血压升高等引起的血流动力学变化，且在病程延长的过程中症状更为严重[3]。既往，临床上主要采用微量尿白蛋白排泄率（urinary albumin excretion rate, UAER）、血清肌酐等指标对早期2 型糖尿病肾病进行诊断，然而上述指标容易受到饮食、肾损伤程度等多种因素的影响，从而导致其无法准确地诊断患者的病情，存在一定的局限性[4]。而随着相关研究的逐渐深入，有学者发现几丁质酶1[5]、热休克蛋白72[6]相比传统指标可更早反映肾功能损害。鉴于此，本研究通过探讨几丁质酶1、热休克蛋白72 在2 型糖尿病肾病中的表达及其临床意义，旨在为临床2 型糖尿病肾病的早期诊断及病情严重程度的评估提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年3月—2017年12月河南中医药大学第一附属医院内分泌科收治的2 型糖尿病患者180 例为研究对象。纳入标准：①所有患者符合中华医学会糖尿病学分会所制定的2 型糖尿病相关诊断标准[7]； ②年龄＞40 岁；③临床病历资料完整；④入院前未接受任何相关治疗。排除标准：①合并肝、肺、心等脏器功能严重障碍者；②先于糖尿病发病的慢性肾炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及泌尿系统感染；③伴有神经系统疾病或交流沟通障碍者；④合并其他原因导致的慢性肾脏病；⑤急性心脑血管疾病、创伤、感染、应激状态等其他可引起热休克蛋白72 升高的情况。将所有患者根据24h UAER 不同分为糖尿病无肾病组（UAER＜30mg/24h）55 例、早期糖尿病肾病组（UAER 为30～300mg/24h）61 例及临床糖尿病肾病组（UAER ≥300m/24h）64 例[8]。另选取同期于本院体检的健康志愿者50 例作为健康对照组。研究经本院医学伦理委员会批准，患者及其家属知情并签署知情同意书。各组受试者年龄、性别、体重指数（body mass index, BMI）、收缩压（systolic blood pressure, SBP）、舒张压（diastolic blood pressure, DBP）、合并高血压例数等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

各组受试者入院后均采集清晨空腹静脉血5ml，离心获取血清保存于-80℃冰箱冷冻保存待检。分别采用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）检测血清几丁质酶1、热休克蛋白72水平，具体操作严格按照试剂盒说明书进行，相关试剂盒均购自上海酶联生物有限公司。采用日立7180全自动生化仪分析尿素氮（blood usea nitrogen, BUN）、肌酐（Creatinine, Cr）、尿酸（uric acid，UA）以及糖化血红蛋白（glycosylated hemoglobin, HbA1c）水平。

1.3 统计学方法

数据分析采用SPSS 20.0 统计软件。计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验；计数资料以构成比或例数表示，比较采用χ2检验；相关性采用Pearson 相关性分析，采用ROC 曲线分析早期诊断价值，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组一般临床资料比较

各组性别、年龄、BMI、SBP、DBP、合并高血压例数比较，差异无统计学意义（P＞0.05），甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。糖尿病无肾病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组TG、TC 高于健康对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 各组一般临床资料的比较

2.2 各组血清几丁质酶1 和热休克蛋白72 水平比较

各组血清几丁质酶1 和热休克蛋白72 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。糖尿病无肾病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组血清几丁质酶1与热休克蛋白72 均高于健康对照组（P＜0.05）；糖尿病无肾病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组的血清几丁质酶1 和热休克蛋白72 水平逐渐上升。见表2。

2.3 各组肾功能指标比较

各组BUN、Cr、UA、HbA1c 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。糖尿病无肾病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组BUN、Cr、UA、HbA1c 水平高于健康对照组（P＜0.05）；糖尿病无肾病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组UA、HbA1c 水平逐渐上升。见表3。

2.4 几丁质酶1、热休克蛋白72 与肾功能指标的相关性

经Pearson 相关分析显示，几丁质酶1 与UA、HbA1c呈正相关（r=0.597 和0.606，均P=0.000），与BUN、Cr无相关性（r=1.214 和2.012，P=0.261和0.196）；热休克蛋白72 与UA、HbA1c 呈正相关（r=0.352 和0.522，P=0.001 和0.000），与BUN、Cr无相关性（r=2.523 和2.689，P=0.172 和0.154）。

表2 各组血清几丁质酶1 和热休克蛋白72 水平的比较 （±s）

表2 各组血清几丁质酶1 和热休克蛋白72 水平的比较 （±s）

注：①与健康对照组比较，P ＜0.05；②与糖尿病无肾病组比较，P ＜0.05；③与早期糖尿病肾病组比较，P ＜0.05。

热休克蛋白72/ （pg/ml）健康对照组 50 30.06±5.19 38.80±14.00糖尿病无肾病组 55 37.48±5.76① 60.04±10.35①早期糖尿病肾病组 61 53.27±10.98①② 102.68±30.15①②临床糖尿病肾病组 64 73.38±18.63①②③ 182.72±35.14①②③F 值 149.931 363.803 P 值 0.000 0.000组别 n 几丁质酶1/ （ng/ml）

表3 各组肾功能指标比较 （±s）

表3 各组肾功能指标比较 （±s）

注：①与健康对照组比较，P ＜0.05；②与糖尿病无肾病组比较，P ＜0.05；③与早期糖尿病肾病组比较，P ＜0.05。

组别 n BUN/（mmol/L） Cr/（μmol/L） UA/（μmol/L） HbA1c/%健康对照组 50 4.72±1.07 67.44±11.64 300.80±55.32 4.20±1.03糖尿病无肾病组 55 7.14±1.49① 86.36±13.13① 333.09±91.45① 8.47±2.02①早期糖尿病肾病组 61 7.26±1.25① 87.56±14.09① 357.08±94.39①② 9.89±2.17①②临床糖尿病肾病组 64 7.35±1.33① 88.21±14.54① 404.96±98.20①②③ 11.73±5.27①②③F 值 49.771 28.786 14.334 55.196 P 值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.5 几丁质酶1、热休克蛋白72 对2 型糖尿病肾病的早期诊断价值

以健康对照组、糖尿病无肾病组为阴性样本，早期糖尿病肾病组和临床糖尿病肾病组为阳性样本，再将几丁质酶1 和热休克蛋白72 2 项指标水平划分成8个组段，建立ROC 诊断分析模型。ROC 曲线结果显示，几丁质酶1、热休克蛋白72 具有较高的2 型糖尿病肾病的早期诊断价值，在其理论阈值（分别为42 ng/ml，75 pg/ml）处，曲线下面积（area under curve, AUC）为 0.7～0.8，敏感性和特异性＞0.7。见表4和图1。

表4 几丁质酶1、热休克蛋白72 的ROC 曲线参数

图1 几丁质酶1、热休克蛋白72 的ROC 曲线

3 讨论

近年来，随着人们生活水平的不断提高以及人口老龄化问题的日益加重，2 型糖尿病的发病率正呈逐年升高趋势，从而导致2 型糖尿病肾病的发病率也相应增加[9-10]。2 型糖尿病肾病是导致2 型糖尿病患者死亡的重要原因之一，该类患者主要临床特征为持续的尿白蛋白升高且伴有不同程度的肾功能降低，最终引发肾衰竭，需予以透析治疗或肾脏移植，预后不佳[11-12]。因此，寻找一种有效的早期诊断方式显得尤为重要。迄今为止，2 型糖尿病肾病的具体发病机制尚未完全明确，大多数学者认为因高血糖导致的代谢紊乱及血流动力学异常是引发2 型糖尿病肾病的重要因素[13-14]。既往临床上主要是将BUN、Cr、内生肌酐清除率等作为诊断2 型糖尿病肾病的重要标志物，然而上述指标的改变通常具有滞后性，部分患者在上述指标发生异常之前便已存在肾功能损害，甚至已经发生不可逆性肾损害。由此，寻找新的早期诊断标志物成为临床研究热点。其中全身内皮细胞功能障碍在肾脏的损伤过程中发挥着重要作用，而几丁质酶1 参与机体多种炎症反应，包括内皮细胞功能障碍、心血管生成等[15]。热休克蛋白72 在多种因素引发的肾小管损伤中存在明显表达，是早期反映急性肾小管损伤的重要分子之一[16]。由此，本文通过研究上述2 项指标在2 型糖尿病肾病早期诊断中的应用价值，以期为临床2 型糖尿病肾病的诊断、治疗及预后评估提供新的靶点和思路。

本研究结果发现，健康对照组、糖尿病无肾病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组的血清几丁质酶1 与热休克蛋白72 水平均呈逐渐上升趋势，说明2 型糖尿病肾病患者几丁质酶1 与热休克蛋白72 水平存在高表达，提示上述2 项指标可能在2 型糖尿病肾病的发生、发展过程中起着至关重要的作用。几丁质是广泛存在于自然界的一种含氮多糖类生物性高分子，是人体健康以及生存必须的第6 元素，有助于改善人体健康状态，且具有免疫激活与免疫抑制的双向免疫调节作用，有利于改善糖尿病[17]。因此，笔者认为几丁质酶1 可能是通过降低机体内几丁质水平，从而抑制机体免疫机能活性，继而促进糖尿病肾病的发生、发展。热休克蛋白72 是临床上广泛用以反映器官缺血再灌注损伤的敏感指标之一，通过监测其水平的变化不但可早期发现肾小管缺血损伤，同时也可在一定程度上鉴别肾损伤类型，因此热休克蛋白72 可能成为2型糖尿病肾病早期诊断的有效指标之一[18-19]。此外，糖尿病无肾病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组BUN、Cr、UA、HbA1c 水平均高于健康对照组

；且健康对照组、糖尿病无肾病组、早期糖尿病肾病组、临床糖尿病肾病组UA、HbA1c 水平也均呈逐渐上升趋势。UAER 水平与机体肾损伤关联密切，随着UAER 的逐渐升高，机体各项肾功能指标水平升高，提示机体肾功能损伤进一步加重[20]。经Pearson 相关性分析可得：几丁质酶1、热休克蛋白72 与UA、HbA1c 均呈正相关。ROC 曲线分析结果显示，几丁质酶1、热休克蛋白72 对2 型糖尿病肾病的敏感性和特异性＞0.7。提示了几丁质酶1 与热休克蛋白表达水平与2 型糖尿病患者各项肾功能评估指标存在着密切关联，可用作评估患者肾功能损伤的指标，且随着2项指标水平的不断升高，提示机体肾损伤程度加重，并且其在2 型糖尿病患者体内表达较上述常规肾功能评估指标更早，该指标对2 型糖尿病肾病具有较高的早期诊断价值。因此，在临床工作中可尝试将上述2项指标作为筛查早期2 型糖尿病肾病的重要标志物。综上所述，几丁质酶1 与热休克蛋白72 在早期2型糖尿病肾病中存在高表达，且与UA、HbA1c 水平存在正相关，两者联合检测可能有助于2 型糖尿病肾病的早期诊断和有利于临床治疗方案的制定，进一步达到改善患者预后的目的。