三种检测方法在结核感染诊断中的比较研究

舒然

【摘 要】 目的：探讨三种检测方法在结核感染诊断中的比较。方法：選取2017年02月至2018年10月的52例疑似结核感染患者作为研究对象，均采用抗酸特殊染色法、培养法及实时荧光定量PCR检测，且对检测后标本阳性率进行观察及评估。结果：实时荧光定量PCR的阳性率显著高于抗酸特殊染色法，P<0.05;但与培养法相比无明显差异，P>0.05。结论：抗酸特殊染色法、培养法及实时荧光定量PCR用于结核感染诊断中具有较高的临床价值，但实时荧光定量PCR优势更大，不仅操作简单、快捷，并且诊断确诊率高，值得应用及推广。

【关键词】 抗酸特殊染色法;培养法;实时荧光定量PCR;结核感染

【中图分类号】R840.5

【文献标志码】A

【文章编号】1005-0019（2019）18-218-01

结核病是临床上较为常见的一种慢性传染病，具有极强的传染性，通过结核分枝杆菌侵袭肺部组织所引起的一种疾病，若不及时进行有效治疗，能够逐渐侵入机体全身各种器官，诱发严重并发症，为此尽早进行诊治十分重要，对控制疾病发展具有重要意义[1];我院为了探讨三种检测方法在结核感染诊断中的比较，选取52例疑似结核感染患者作为研究对象，见正文描述：

1 资料与方法

1.1 临床资料

本次选取2017年02月至2018年10月的52例疑似结核感染患者作为研究对象，均采用抗酸特殊染色法、培养法及实时荧光定量PCR检测，且对检测后标本阳性率进行观察及评估;其中男性受检人员共26例、女性受检人员共26例;平均年龄值（42.32±2.05）岁，年龄范围24-65岁。

1.2 方法

抗酸特殊染色法：先将标本涂抹于载玻片上，其次进行染色处理，染色完成后采用显微镜观察载玻片，且根据相关标准报告计数。

实时荧光定量PCR：痰液样本中加入4%NaOH溶液，随后振荡，以便于将两者混匀，放置30min后，取液化后的标本（500μl）进行离心处理，12000rpm，离心3min，且将上清吸除干净后加入生理盐水（1ml）行离心处理，再吸除上清，加入核酸释放剂（50μl），在100℃环境下处理，时间为10min，再行离心处理，其中将上清作为待测样本，且加入处理后的5μl待测样本与40μlPCR-mix，上机检测。

痰培养法---采用酸性改良罗氏培养基，按照说明书步骤执行操作。

1.3 观察指标

观察及评估52例疑似结核感染患者经三种检测方法检测后标本阳性率。

1.4 统计学标准

文中计数资料选择SPSS21.00软件分析，以（x±s）与百分比表示，卡方值与T值检验，以P<0.05，表示统计学存在对比价值。

2 结果

标本阳性率观察

实时荧光定量PCR的阳性率显著高于抗酸特殊染色法，P<0.05;但与培养法相比无明显差异，P>0.05;见表1：

3 讨论

肺结核是临床上较为常见疾病之一，同时也是一种传染性疾病，即是由结核分枝杆菌侵袭肺部所引起的一种慢性疾病;经调查发现该病每年发病人数约占130万人次，且占全球总发病率14%左右，即在全球位居第二[2];该病早期无典型临床表现，若是仅依据体征及症状进行确诊，极其容易发生误诊事件，即误诊为呼吸道感染，且在一定程度上耽误疾病治疗，为此早期进行实验室检测十分重要，有利于为临床诊治提供客观依据，对控制病情发展及改善预后具有积极作用;目前临床上采用抗酸特殊染色法、培养法及实时荧光定量PCR检测患者机体是否存在结核分枝杆菌[3];第一种检测方法虽然应用较为广泛，但是仍存在一定局限性，即非特异性，100余种的分枝杆菌同样可呈抗酸染色阳性，加上抗酸杆菌形态及大小变化不一致，可导致结果判断存在差异性，与此同时还能在一定程度上受菌体分布不均匀等因素的影响，发生客观漏诊事件;第二种检测方法是临床上的金标准，通过专门的培养皿在特殊外界环境中培养菌群，但是培养周期较长，无法在短时间内给出结论，并且实验操作较为复杂，同样可发生假阳性率及假阴性率[4];第三种检测方法则是将PCR、杂交及广谱等技术相结合，且通过加入荧光标记探针，实现检测标本中结核分枝杆菌的目标，具有具有操作简单、方便、敏感度高、特异性高等优势，为此在临床上得到广泛应用及推广，但是经调查发生不规则的实验室操作步骤仍可发生假阳性检测结果，为此操作人员在实验操作细节方法需特别注意以下几点：①密封性、②加样完全、③一次性耗材使用、④专区专用、⑤避免污染;只要做到规范操作就可避免假阳性事件的发生，对提高检测确诊率具有积极作用[5]。

总而言之，抗酸特殊染色法、培养法及实时荧光定量PCR用于结核感染诊断中具有较高的临床价值，但实时荧光定量PCR优势更大，不仅操作简单、快捷，并且诊断确诊率高，值得应用及推广。

参考文献

[1] 张志勇， 毛志方， 王芹. 三种检测方法在结核感染诊断中的比较研究[J]. 基层医学论坛， 2017， 21（7）：845-846.

[2] 樊红丽， 李健健， 高丽，等. 3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染诊断中的对比研究[J]. 检验医学与临床， 2017， 14（3）：392-395.

[3] 墙建军， 夏飞， 雷应军，等. 3种检测方法诊断结核性胸膜炎的对比分析[J]. 现代中西医结合杂志， 2018， 27（9）：1002-1005.

[4] 李晓非， 黄山， 梁桂亮，等. 6种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染诊断中的应用价值分析[J]. 检验医学与临床， 2017， 14（3）：378-380.

[5] 滕晓梅. 结核感染T细胞、结核抗体、抗酸染色3种方法的临床评价[J]. 国际检验医学杂志， 2016， 37（8）：1149-1150.