非小细胞肺癌活检标本ALK表达及临床病理特征分析

张颖　林雯　邓建平

[摘要] 目的 分析非小细胞肺癌活检标本人类间变性淋巴瘤激酶（ALK）表达及临床病理特征。方法 方便选取接受治疗的非小细胞肺癌患者20例，选取时间为2017年7月—2018年6月，所有患者均接受免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）检测，分析患者的活检标本ALK表达和临床病理特征。 结果 在20例患者中，经CT和B超引导下穿刺的患者11例（55.00%），支气管镜的患者8例（40.00%），门诊手术切取标本的患者1例（5.00%）;在20例非小细胞肺癌患者中，有腺癌患者16例（80.00%），鳞癌患者1例（5.00%），非特指型非小细胞肺癌3例（15.00%）;患者年龄小于55岁的患者有8例（40.00%），大于55岁的患者有12例（60.00%）;其中吸烟患者有8例（40.00%），不吸烟患者有12例（60.00%）;免疫组织化学（IHC）检测的阳性患者2例（10.00%）。 结论 通过对非小细胞肺癌患者的活检标本ALK进行检测，可以对患者的病情进行协助诊断，并对患者的治疗具有指导作用。

[关键词] 非小细胞肺癌;活检标本;ALK;IHC

[中图分类号] R73          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742（2019）05（b）-0026-03

[Abstract] Objective To analyze the expression and clinicopathological features of human anaplastic lymphoma kinase （ALK） in non-small cell lung cancer biopsy specimens. Methods 20 patients with non-small cell lung cancer who underwent treatment were convenient selected and enrolled. The patients were enrolled in the study from July 2017 to June 2018. All patients underwent immunohistochemistry （IHC） analysis. The biopsy specimens of ALK and pathological features were clinically analyzed. Results Of the 20 patients， 11 cases （55.00%） underwent CT and B-guided puncture， 8 cases（40.00%） patients underwent bronchoscopy， and 1 cases（5.00%） patients who underwent surgical surgery. Among the 20 patients with non-small cell lung cancer， 16 patients （80.00%） had adenocarcinoma， 1 patient（5.00%） had squamous cell carcinoma， and 3 patients （15.00%） had non-specific non-small cell lung cancer. The patients were younger than 55 years old. There were 8 patients （40.00%）， and 12 patients （60.00%） were older than 55 years old; 8 cases（40.00%） were smokers and 12 cases（60.00%） were non-smokers; 2 cases（10.00%） cases of immunohistochemistry （IHC） positive patients were detected. Conclusion By detecting the biopsy specimen ALK in patients with non-small cell lung cancer， the patient's condition can be assisted and diagnosed， and the patient's treatment can be guided.

[Key words] Non-small cell lung cancer; Biopsy specimen; ALK; IHC

肺癌是臨床上较为常见的恶性肿瘤疾病，其具有较高的发病率和死亡率[1-2]。肺癌的产生与患者长期吸烟、职业、生存环境等因素有关，在肺癌疾病中，非小细胞肺癌是较为常见的类型，当患者在非小细胞肺癌的发病初期时，患者无明显的临床症状，随着患者病情的不断发展，患者会逐渐出现咳嗽、咳痰、痰中带血、咯血、胸部疼痛、胸闷、气急等临床症状，同时患者会出现发热、消瘦、贫血、血液系统疾病等严重病症，对患者的身体健康和生命安全造成严重的威胁[3-4]。当患者出现非小细胞肺癌后，需要接受及时的治疗，以改善患者的临床症状，促进患者病情的好转。目前临床治疗肺癌的传统方法包括手术治疗方法、化疗治疗方法、放疗治疗方法等，但上述治疗方法的效果较差，经治疗后，肺癌患者的五年生存率仅为15%[5]。而且，临床上在对肺癌患者实施治疗时，需要对患者进行全面的检查，以对患者的病情进行准确的判断，然后给予患者具有针对性的治疗[6-7]。ALK即人类间变性淋巴瘤激酶融合基因，是具有治疗肺癌疾病的预测作用分子标志物。该文特方便选取2017年7月—2018年6月接受治疗的20例非小细胞肺癌患者纳入研究，主要研究非小细胞肺癌活检标本ALK表达及临床病理特征，现报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便选取接受治疗的非小细胞肺癌患者20例，所有患者均接受免疫组织化学（IHC）检测。

在所有入选的非小细胞肺癌患者中，患者的年龄分布为，最小年龄54岁，最大年龄83岁，患者的平均年龄为（68.50±6.40）岁;其中有13例男性患者（占65.00%，13/20），7例女性患者（占35.00%，7/20）。

所有患者均经检查确诊为非小细胞肺癌;所有患者均符合2004年WHO肺癌分类、2011年国际肺癌研究学会、美国胸科学会和欧洲呼吸学会在胸部肿瘤杂志上公布的肺腺癌新分類[8-9]。所有患者均已排除合并严重心脏、肾脏、肝脏等重要脏器疾病者，均已排除合并严重恶性肿瘤疾病者;均已排除孕产妇者;均已排除不自愿或不配合该次研究工作者。

1.2  方法

免疫组织化学（IHC）检测ALK蛋白表达（以手工制作）：结果评定标准：使用二元判别法（即ALK阳性表达判断标准），ALK阳性：肿瘤细胞中存在强的颗粒状细胞质染色（任何百分比的阳性肿瘤细胞）;ALK阴性：患者的肿瘤细胞内不存在强颗粒状胞质染色。

1.3  观察指标

统计患者的临床特点、免疫组织化学（IHC）检测结果，并作分析。

1.4  统计方法

使用SPSS 20.0统计学软件对所有数据进行处理。计量资料（x±s）采用t检验，计数资料[n（%）]采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  非小细胞肺癌患者的临床特点

在20例患者中，经CT和B超引导下穿刺的患者11例（55.00%，11/20），支气管镜的患者8例（40.00%，8/20），门诊手术切取标本的患者1例（5.00%，1/20）;在20例非小细胞肺癌患者中，有腺癌患者16例（80.00%，16/20），鳞癌患者1例（5.00%，1/20），非特指型非小细胞肺癌3例（15.00%，3/20）;患者年龄≤55岁的患者8例（40.00%，8/20），>55岁的患者有12例（60.00%，12/20）;其中吸烟患者有8例（40.00%，8/20），不吸烟患者有12例（60.00%，12/20）。

2.2  免疫组织化学（IHC）检测结果分析

免疫组织化学（IHC）检测的阳性患者2例（10.00%，2/20）。见表1。

3  讨论

随着近年来我国空气污染的加重以及人们长期的吸烟，导致我国人们的肺癌发病率逐年上升。非小细胞肺癌是肺癌中最为常见的类型，其对患者的身体危害较为严重，若患者得不到及时的治疗，患者的生命安全会受到严重的威胁[10]。非小细胞肺癌患者需要接受及时的治疗，以挽救患者的生命。在治疗前，需要对患者实施科学的检测，以掌握患者疾病的具体病情。随着临床医学持续发展进步以及深入研究，实施分子靶向治疗方案治疗恶性肿瘤可以取得较明显疗效，而目前临床以运用影像学方式研究治疗效果[11]。随着血清肿瘤标志物深入研究，当肿瘤的恶性程度发生发展及变化时，其血清肿瘤标志分子也会随着发生变化，故此，对于恶性肿瘤的治疗效果研究，血清肿瘤标志分子可作为重要指标，有着重要参考价值[12-13]。该次研究，对患者的活检标本ALK进行检测，可以了解患者活检标本ALK的数值，这对患者的临床用药具有指导作用，进而起到良好的疾病治疗作用。

目前多个临床实验室已逐渐应用免疫组织化学（IHC）检测非小细胞肺癌活检标本ALK表达及分析。相关临床研究[14]运用D5F3手工IHC染色并筛选出25例ALK阳性，其中包括强阳性12.00%、中等阳性48.00%、弱阳性40.00%;而该检测结果与FISH检测方法的阳性一致率为100.00%，阴性一致率为96.20%。此研究结果说明，选择具有高敏感性抗体十分重要。随着临床新试剂的持续改进与提高，手工IHC染色检测非小细胞肺癌活检标本ALK表达及分析已越来越被广泛应用于临床中[15]。

该文研究得出，在20例患者中，经CT和B超引导下穿刺的患者11例（55.00%），支气管镜的患者8例（40.00%），门诊手术切取标本的患者1例（5.00%）;在20例非小细胞肺癌患者中，有腺癌患者16例（80.00%），鳞癌患者1例（5.00%），非特指型非小细胞肺癌3例（15.00%）;患者年龄≤55岁的患者8例（40.00%），>55岁的患者有12例（60.00%）;其中吸烟患者有8例（40.00%），不吸烟患者有12例（60.00%）;免疫组织化学（IHC）检测的阳性患者2例（10.00%）。

目前临床检测非小细胞肺癌活检标本ALK表达及分析方法包括荧光原位杂交（FISH）检测方法、RT-PCR方法、全自动免疫组化（IHC）检测。但是，由于上述检测方法的检测设备仪器较昂贵，而且操作要求严格，因此在临床推广应用中存有一定限制。免疫组织化学（IHC）检测方法不但操作简单、方便、快速，而且具有全面性观察检测情况，结果判读简单等优势。

综上所述，通过对非小细胞肺癌患者的活检标本ALK进行检测，可以对患者的病情进行协助诊断，并对患者的治疗具有指导作用。

[参考文献]

[1]  高宁， 郭江红， 白玮，等. 免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应检测非小细胞肺癌间变性淋巴瘤激酶融合基因的比较研究[J]. 中国医师进修杂志， 2016， 39（9）：842-845.

[2]  赵静， 赵金银， 陈志霞，等. 建立实时荧光定量逆转录PCR方法检测非小细胞肺癌棘皮动物微管相关蛋白4-间变淋巴瘤激酶融合基因[J].中国医学科学院学报， 2016， 38（6）：643-649.

[3]  唐艳萍， 谭晓玉， 蔡政民，等. 非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变和EML4-ALK融合基因表达的研究[J]. 检验医学与临床， 2016， 13（24）：3458-3460.

[4]  玛依拉·阿不都克力木， 阿迪拉·斯依提， 帕提古力·阿尔西丁. EML4-ALK融合基因在新疆维吾尔族非小细胞肺癌患者中的表达分析及其对预后的影响[J].湖南师范大学学报：医学版，2017，14（1）：58-61.

[5]  童永清， 顾剑， 郑红云，等.基于3'/5'端表达不平衡策略的荧光定量PCR法检测非小细胞肺癌患者血浆游离循环RNA中ALK融合基因[J].临床检验杂志，2017， 35（8）：587-589.

[6]  Shuai Liu，Peng Chen，Yan-Wei Liu，et al.Role of Recursive Partitioning Analysis and Graded Prognostic Assessment on Identifying Non-Small Cell Lung Cancer Patients with Brain Metastases Who May Benefit from Postradiation Systemic Therapy[J].中华医学杂志：英文版，2018，131（10）：1206-1213.

[7]  李玺，荣福.非小细胞肺癌经支气管针吸活检标本microRNA-126和microRNA-205的表达及意义[J].广东医学，2016，37（22）：3393-3397.

[8]  唐荣，郭蕾，刘秀云，等.非小细胞肺癌活检标本ALK表达及临床病理特征分析[J].中华病理学杂志，2016，45（9）：642-643.

[9]  王斯，李苗，王琳，等.非小细胞肺癌胸腔积液与配对肿瘤组织中EGFR基因突变检测的比较[J].现代肿瘤医学，2017， 25（11）：1729-1731.

[10]  张美玲，李春，叶茂松，等.改良Blocker PCR检测EGFR-TKI耐药后非小细胞肺癌血浆EGFR T790M突变的价值[J].复旦学报：医学版，2018，45（1）：45-51.

[11]  方平，王沣，江富来，等.非小细胞肺癌表皮生长因子受体突变的检测与分子靶向治疗[J].中华肺部疾病杂志：电子版，2017，10（5）：543-548.

[12]  李锐，葉胜兵，何燕等.微滴数字PCR和突变扩增阻滞系统法检测不同类型非小细胞肺癌标本及血浆标本表皮生长因子受体基因突变情况比较[J].中华病理学杂志，2017，46（11）：764-768.

[13]  方平，王沣.非小细胞肺癌患者功能性驱动基因突变的临床意义[J].中华诊断学电子杂志，2018，6（3）：189-193.

[14]  郭婷，王磊.非小细胞肺癌EGFR突变检测技术的研究进展[J].临床与病理杂志，2017，37（9）：1936-1942.

[15]  古丽那尔·阿布拉江，刘铭.肺癌活检标本的免疫组化检测在非小细胞肺癌鉴别诊断中的目的及意义[J].中外医疗，2018，37（10）：1-3.

（收稿日期：2019-02-21）