产细菌素乳酸菌发酵棉籽粕饲喂蛋鸡效果研究

韩 雪，王雅冰，郝建雄*宫彬彬，李研东，赵丹丹， 白利琴， 顾梦茹， 郭旭茜， 王 雯

（1.河北科技大学，河北石家庄 050018；2.邢台学院，河北邢台 054001；3.河北省兽药监察所，河北石家庄 050035）

细菌素（Bacteriocin）是某些细菌产生的具有抗菌活性的多肽、蛋白质或蛋白质复合物，细菌素由核糖体合成，可杀死与产生菌种属相近的其他细菌（Perez等，2018）。乳酸菌细菌素不仅具有与抗生素相似的抗菌作用，而且不会在动物体内蓄积而引起不良反应，无副作用、无残留、无抗药性，不污染环境 ，它的使用可以降低饲料的杀菌温度，从而较好的保持饲料的营养价值和风味（付燕等，2009）。棉籽榨油后的副产物棉籽粕仍然具有一定的营养价值，其蛋白质含量通常为33%～35%。但是由于棉籽粕含有有毒成分棉酚，动物长期采食会引起慢性中毒，因而限制了棉籽粕在畜牧养殖业中的应用（刘建成等，2018）。

为了验证发酵棉籽粕的饲喂效果和功能性，本研究以海兰褐壳蛋鸡为试验对象，从病死率、产蛋能力、营养物质消化率、肠道pH、肠道微生物数量、免疫器官指数、骨骼肌ATP水平等方面进行分析评价，旨在提高棉籽粕的利用率，降低饲料原料成本。

1 材料与方法

1.1 试验材料 试验选取体重相近，生产性能良好均一的50周龄海兰褐壳蛋鸡240只，随机分为四组，每组 60只。分别置于立体笼的上、中、下 3层饲养，基础饲粮参照《鸡饲养标准》（NY/T33-2004）蛋鸡营养需要配制。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加20%、40%、60%乳酸菌发酵棉籽粕（表1），预试期 3 d，试验期为 45 d。

表1 日粮组成与营养水平%

1.2 试验方法

1.2.1 蛋鸡抗病效果分析 每天观察鸡群的精神、食欲、健康状况等情况，记录死亡数、病鸡数，计算发病率、死亡率。

发病率/%=组内已发病蛋鸡数量/组内总鸡数×100；

死亡率/%=整个试验期组内死亡鸡只数/组内总鸡数×100。

1.2.2 生产性能分析 日常观察记录产蛋数、蛋重、总采食量，用以计算各组鸡的平均日采食量、产蛋率、平均蛋重、料蛋比、日产蛋量、软破壳率（马晓婷等，2017）。

1.2.3 营养物质表观消化率测定 试验结束时，采集饲料样本和粪样测定以下指标：酸不溶灰分、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分，计算表观代谢能（李笑樱等，2011）。

1.2.4 肠道pH测定 试验结束时，每组选取6只蛋鸡取回肠和结肠内容物冷冻保存，用于测定肠道 pH（刘炎等，2014）。

1.2.5 肠道微生物 试验结束时，每组随机选取5只鸡称重、记录并屠宰取样。取回肠内容物，并迅速冷冻保存，采用平板计数法测定其中微生物菌群数量（大肠杆菌、乳酸菌、双歧杆菌）。

1.2.6 免疫器官指数 试验结束后，每组随机选取3只鸡，将选取的鸡称重后屠宰，摘取脾脏称重。

脾脏指数/%=脾脏鲜重/鸡活种×100。

1.2.7 血清中抗体效价 分别在试验的第30天和第45天，每个重复各选取 2只体重接近的健康蛋鸡，翅静脉采血，分离血清，-20℃保存，采用血凝抑制试验法分别测定新城疫和禽流感抗体效价。

1.2.8 ATP水平测定 利用ATP与荧光素+荧光素酶的荧光反应原理，采用ATP检测试剂盒制备ATP标准曲线和测定骨骼肌样品中ATP含量。

1.3 数据处理与统计分析 各项指标测试结果以“平均数±标准差”表示，用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析。用LSD方法对各组间数据进行多重比较，以 P ＜ 0.05（差异显著），P ＜ 0.01（差异极显著），P＞0.05（差异不显著）作为差异显著性判断标准。

图2中竖坐标表示子批量，纵坐标表示选择的工艺路线，横坐标表示工艺路线下的所有工序；式(25)中，数组O=[ot,r]4×r分别记录了工序加工所选择的机床、刀具、夹具、搬运设备，r表示工序个数；式(26)中，数组W=[we,r]w×r存储了调度过程中工序在机床上加工的顺序。

2 试验结果

2.1 发酵棉籽粕对蛋鸡抗病能力的影响 如图1所示，发酵棉籽粕添加量为40%时，蛋鸡的发病率为1.73%，死亡率为0.18%，与对照组相比，均具有显著性差异（P＜0.05）。该结果说明在相同的饲喂环境下，产细菌素乳酸菌发酵棉籽粕的适量添加，可提高蛋鸡的免疫能力，有效降低蛋鸡的发病率与死亡率。

图1 发酵棉籽粕对蛋鸡抗病能力的影响

2.2 发酵棉籽粕对蛋鸡生产性能的影响 由表2可知，试验组产蛋率、平均蛋重、料蛋比和软破壳率等指标与对照组相比均不存在显著性差异（P＞0.05）。但是，40%组蛋鸡的平均日采食量为165.17 g，与对照组相比差异显著（P ＜ 0.05），说明在基础饲料中添加40%发酵棉籽粕可以有效提高蛋鸡的采食量，对蛋鸡的健康维持具有一定意义。

表2 发酵棉籽粕对蛋鸡生产性能的影响

2.3 发酵棉籽粕对营养物质消化率的影响 由表3可知，发酵棉籽粕组能量、纤维、脂肪、钙消化利用率与对照组相比无显著差异 （P＞0.05），但是，饲喂添加40%、60%发酵棉籽粕的蛋鸡对蛋白质和磷的利用率明显提高，分别提高65.68%和65.25%、34.69%和 34.79%（P ＜0.05）。

表3 蛋鸡日粮营养物质消化率%

2.4 发酵棉籽粕对蛋鸡肠道pH的影响 肠道pH的稳定可保证肠道内环境的平衡与健康，更利于营养物质的吸收。由表4可知，与对照组相比，添加不同比例的发酵棉籽粕饲喂蛋鸡后，蛋鸡回肠与结肠内的pH并没有发生显著性变化，均维持在7.20～7.51。但是，随着发酵棉籽粕添加量的增加，回肠内pH有一定的下降趋势。

2.5 发酵棉籽粕对蛋鸡肠道微生物数量的影响与对照组相比，发酵棉籽粕组肠道内大肠杆菌群数量有降低的趋势，其中添加60%发酵棉籽粕组的大肠杆菌数量降到了5.72 lg cfu/g（mL），与对照组的6.73 lg cfu/g（mL）相比，存在显著性差异（P＜0.05）。同时，发酵棉籽粕组肠道内乳酸菌数量有提高的趋势，40%组乳酸菌的数量可达到9.72 lg cfu/g（mL）（P ＜ 0.05）。 结果如表 5所示。

2.6 发酵棉籽粕对蛋鸡免疫器官指数的影响由图2可以看出，添加发酵棉籽粕对蛋鸡的脾脏指数并未产生显著影响（P＞0.05）。

图2 发酵棉籽粕对蛋鸡脾脏指数的影响

图3 骨骼肌ATP水平

3 讨论

饲喂发酵棉籽粕后，试验组（40%）蛋鸡的发病率与对照组相比均显著降低，这说明采用产细菌素乳酸菌发酵的棉籽粕饲喂蛋鸡后其抗病能力有所提高，这与蛋鸡免疫力、身体素质的提高具有一定的相关性，在后续的脾脏指数测定试验结果中也得到证实。

益生菌是一类对宿主健康有益的活性微生物,定植于动物肠道或生殖系统内，具有提高消化酶活性、维持肠道微生态平衡及调节宿主黏膜与免疫系统等功能（谢强等，2017）。Abd El-Hack等（2017）研究表明，饲喂枯草芽孢杆菌后，蛋鸡的产蛋性能和抗病能力显著提高。本研究中，试验组蛋鸡肠道pH维持稳定，大肠杆菌数量下降1.01 lg cfu/g（mL）（60%组），乳酸菌数量提高 0.19 lg cfu/g（mL）（40%组）。日粮中添加40%发酵棉籽粕组的平均日采食量与对照组相比提高了10 g，产蛋率提高了一个百分点。结果说明乳酸菌发酵棉籽粕的添加对蛋鸡的肠道内环境和生产性能均有良好的稳定与提高作用。

有益微生物在体内产生的各种消化酶，可以将淀粉、纤维素、半纤维素、果胶等分解为葡萄糖、半乳糖酸，产生能量并提高饲料转化率。闫凤兰等（1996）研究表明，肉鸡日粮中添加枯草芽孢杆菌后空肠内容物中可消化淀粉酶活性显著提高 （P＜0.05）。赵新海等（2008）发现，微生态益生菌发酵饲料可代替部分豆粕、鱼粉和抗生素、复合酶的使用，降低饲料成本，并能改善饲养环境，提高肉蛋品质。本研究中，饲喂发酵棉籽粕后，蛋鸡对蛋白质和磷的利用率均有所提高。蛋白质与机体各个器官的功能密切相关，蛋白质利用率的提高对蛋鸡的身体素质、生长发育与生产能力都将产生有利影响。机体对磷的消化吸收增加可提高钙的吸收效率，促进生长发育，对其所产蛋品质有积极的影响。

4 结论

产细菌素乳酸菌发酵棉籽粕饲喂蛋鸡，在提高蛋鸡免疫力及抗病力的同时，能够较好的提高蛋鸡对营养物质的消化与利用能力。