N-BCA 医用胶在犬眼睑手术的应用研究

(中国农业大学动物医学院,北京海淀 100193)

犬的眼睑疾病为临床常见疾病之一,大多数眼睑疾病都需要进行手术治疗,共有约30 种不同类型的手术方法[1]。传统的眼睑手术使用缝线对切口进行闭合,该操作对术者手术熟练程度有一定要求,操作熟练程度对于手术效果影响较大。同时对于部分眼周的被毛较少或较短的犬种,眼睑手术切口部位瘢痕组织的形成大大影响了其美观程度。

而氰基丙烯酸正丁酯(N-Butyl Cyanoacrylate,NBCA)医用胶是一种氰基丙烯酸酯类粘合剂,可快速粘合切口,研究表明,其在临床使用中具有抗菌作用、快速止血功能、增加美观性[2-4]、缩短手术时间等优点。本研究主要通过讨论N-BCA 医用胶应用于试验犬眼睑手术切口的效果,分析其使用的安全性及应用效果。

1 材料与方法

1.1 试验动物 本试验选用试验犬12 只,杂种犬,年龄在1 -4 岁间,雌雄各半。试验前进行各项体格检查和眼科检查无明显异常。试验犬双眼分别为试验组和对照组,每只犬左眼为医用胶的试验组,右眼为传统缝合法的对照组。

1.2 手术

1.2.1 术前准备 禁食6 h,禁水2 h,基础检查准备术前用药。眼部常规检查,看犬双眼眼睑外形是否对称,眼睑皮肤是否有瘢痕组织、皮肤肿物、外伤。双眼进行泪液测试(Schirmer tear test,STT)。双眼检测泪膜破裂时间(tear film break-up time,TFBUT)。Tono-Pen®眼压计测量眼压(IOP)。

1.2.2 围手术期给药 麻醉前给药:舒泰®50 按1 mg/kg·bw 静脉给药,右美托咪定按50 μg/m2静脉给药。诱导麻醉给药:药物种类为丙泊酚,剂量是2～5 mg/kg·bw,给药方式是静脉给药。麻醉期给药:吸入性全身麻醉,麻醉药为异氟烷,灵活调节用量。术中:静脉恒速输注生理盐水,速度为5～20 mL/kg/h,灵活调节液量。术后:不使用任何含抗生素、激素类的药物,避免影响试验结果。

1.2.3 手术过程 试验犬侧卧位保定,在严格的无菌要求下进行眼睑切开术,上眼睑中间偏外侧距睑缘2 mm 处,手术刀皮肤切开15 mm。左眼使用医用粘合剂闭合创口,用镊子对合两侧创缘,用医用粘合剂沿着创口粘合两侧;右眼使用传统缝合法结节缝合闭合创口,用4/0 薇乔可吸收缝线缝合创口(见图1)。手术结束后,试验犬佩戴伊丽莎白脖圈,防犬自损。

图1 双眼创口分别使用传统缝合法结节缝合(左)和医用粘合剂粘合(右)

1.3 记录数据 分别记录两组试验闭合创口所用时间。术后0、6、12、24 h、4、7、14 d 对试验犬眼部常规检查,包括STT、TFBUT、IOP、局部创口情况(瘢痕化)以及动物表现。

1.3.1 组织采样方法 12 只试验犬,随机分为3组,分别于术后第7、14、28 天对试验切口眼睑皮肤及部分皮下结缔组织采样。试验犬围手术期给药方法同1.2.2,采样部位以切口为中心,大小为边长8 mm 的正方形,采样组织包含皮肤及皮下结缔组织,以40%甲醛固定液固定。采样后皮肤缺损部位,以推进式皮瓣法进行修复,采样后试验犬配戴伊丽莎白脖圈,防止自损。采样进行切片制作。

1.3.2 染色及组织切片的观察(略)

1.4 评估内容 闭合创口时间、眼部常规检查及试验犬术后恢复情况、创口愈合时间、泪液测试(STT)、泪膜破裂时间(TFBUT)、眼压(IOP)、瘢痕程度评分(温哥华瘢痕量表,见表1)、组织学染色结果观察。

表1 温哥华瘢痕量表[5]

2 结果

2.1 闭合创口时间 从开始对创口进行闭合操作到完成闭合所需时间。使用N-BCA 医用胶的试验组(左眼)平均闭合创口时间为(5.07 ±1.18)s,使用传统缝合法的对照组(右眼)平均闭合创口时间为(152.17 ±7.31)s。试验组和对照组闭合创口时间存在显著性差异(P<0.05)。

2.2 创口愈合时间 试验组和对照组创口表面皮肤愈合时间均在术后6 d 左右。试验组创口在术后5 -7 d 时表面粘附的医用胶薄膜逐渐脱落,暴露的皮肤切口愈合良好。对照组创口术后6 d 时皮肤表面愈合良好,但有1 只眼在术后第7 天取样时,原本愈合的创口开裂,对侧医用胶试验组的创口并未开裂(见封二彩版图2)。

图2 愈合时间与效果直观对照图

图3 H.E.染色结果对比

2.3 泪液测试(STT)与泪膜破裂时间(TFBUT)试验犬术前和术后泪液测试(STT)检查,术前试验组(左眼)STT 为(17.50 ±2.38)mm,对照组(右眼)STT 为(17.00 ±1.63)mm,均在正常范围内。术后0 h 均出现了STT 的降低,均在正常范围内。术后6 h,试验组和对照组STT 均一定程度升高且轻度高于术前STT 水平,试验组术后7 d STT 水平与术前相比有显著性差异(P<0.05),术后14 d 试验组STT 水平与术前相比差异不显著(P>0.05)。试验组和对照组STT 差异不显著(P>0.05)。

试验犬术前和术后泪膜破裂时间(TFBUT)检查,术前试验组TFBUT 为(15.50 ±1.73)s,对照组TFBUT 为(17.00±1.83)s,均在正常范围内。术后0 h,对照组TFBUT 水平轻度降低(TFBUT=(13.50 ±1.73)s),术后6 -12 h,对照组TFBUT 水平继续下降,术后12 h 与术前TFBUT 水平相比有显著性差异(P<0.05),术后7-14 d,对照组TFBUT 轻度回升但仍低于术前水平(TFBUT=(13.75 ±1.26)s)。试验组术后TFBUT 无明显变化。试验组和对照组TFBUT差异不显著(P>0.05)。

2.4 眼压(IOP) 试验犬术前和术后眼压(IOP)检查,术前试验组(左眼)IOP 为(15.08 ±2.48)mmHg,对照组(右眼)IOP 为(12.33±1.50)mmHg,均在正常范围内。术后0 h,对照组有一只眼出现IOP 升高(IOP=27>20 mmHg),未采取任何降眼压操作,术后6 h 时,IOP 恢复至正常范围(IOP=13 mmHg)。试验组术后0 h 时IOP 为(16.33 ±3.73)mmHg,与术前IOP 相比平均值轻度升高,但差异不显著(P>0.05)。对照组术后0 h 时IOP 为(20.83±4.06)mmHg,与术前IOP 水平相比有轻度升高,存在显著性差异(P<0.05)。术后6 h 时,试验组和对照组IOP 均下降,至术后14 d,IOP 水平稳定在正常范围内。试验组和对照组IOP 差异不显著(P>0.05)。

2.5 瘢痕程度评分 术后创口瘢痕程度根据温哥华瘢痕量表进行评分。使用N-BCA 医用胶的试验组(左眼),瘢痕色泽较浅,厚度小于1 mm,血管分布与周围皮肤相似或轻度偏粉红色,柔软度正常,平均瘢痕程度评分为2.50±0.55;使用传统缝合法的对照组(右眼),瘢痕色泽为混合色,厚度小于2 mm,血管分布与周围皮肤相似或轻度偏粉红色,柔软度正常,平均瘢痕程度评分为4.50 ±0.55。试验组和对照组瘢痕程度评分差异极显著(P<0.01)。

2.6 组织学染色结果观察 常规H.E.染色结果见封二彩版图3,术后7 d 采样组织,试验组创口周围少量炎性细胞浸润,成纤维细胞增生,腺体形态规则,皮肤角质层部分缺失。对照组创口及缝合材料周围炎性细胞浸润,大量成纤维细胞增生,有异物反应。对照组有一只眼取样时伤口开裂,裂开的创口周围炎性细胞浸润,成纤维细胞增生。术后14 d采样组织,试验组和对照组少量炎性细胞浸润,成纤维细胞数量减少,对照组成纤维细胞数多于试验组。术后28 d 采样组织,试验组几乎没有炎性细胞浸润,成纤维细胞排列整齐,对照组有少量炎性细胞浸润,成纤维细胞数多于试验组。

3 讨论

3.1 闭合创口情况 试验结果显示,使用N-BCA医用胶闭合创口所需时间明显少于传统缝合法。手术中,缩短手术时间便是缩短麻醉时间,降低麻醉风险。医用胶闭合创口时间短,对于一些眼见外急诊病例,可选择镇静后局部麻醉处理外伤。在一些需要闭合的切口较多且局部张力较大的复杂眼睑手术,可采取传统缝合法结合N-BCA 医用胶闭合创口,既保证了创口两侧的张力,也一定程度缩短手术时间,降低麻醉风险。因此,使用N-BCA 医用胶的术后创口愈合效果更好。

3.2 泪膜变化 试验结果显示,术后0 h,试验组和对照组均出现了STT 的降低,但STT 仍在正常范围之内。术后6 -14 d,试验组和对照组STT 均一定程度升高,并且轻度高于术前STT 水平,使用NBCA 医用胶的试验组术后7 d STT 水平与术前相比差异显著(P<0.05),术后14 d 时STT 水平与术前相比差异不显著(P>0.05)。术后0 h 时,试验组和对照组的STT 都有一定程度的降低,Higeyasu C等人的报道发现,术中眼部消毒液的使用对眼表的结膜杯状细胞和角膜上皮细胞造成损伤[6]。术后7 d 时,使用医用胶的试验组STT 出现升高,可能与皮肤愈合后,医用胶成分自然脱落刺激眼表有关。但是STT 仍在正常范围以内,且术后14 d 时也恢复至术前STT 正常水平。

术前和术后泪膜破裂时间(TFBUT)检查,术后0 -4 d 对照组出现了TFBUT 水平降低,术后7 d 至14 d,TFBUT 轻度回升但仍低于术前水平。试验组术后TFBUT 无明显变化。使用传统缝合法闭合创口,术后泪膜稳定性受到影响。Mathers 和Lane 发现,泪膜的稳定性主要指泪膜的蒸发速率,而泪膜中的脂质层是关键[7]。睑板腺产生的蜡质成分形成泪膜的脂质层,脂质层具有较强的表面张力,从而增加了泪膜水层的稳定性并防止泪膜水层的过度蒸发。Hosaka 等人的报道发现,眼部手术操作会影响泪膜的稳定性[8]。手术操作会引起眼睑及周围组织炎症反应,其产生的部分炎性物质会影响睑板腺和结膜杯状细胞的分泌,从而导致脂质成分和黏蛋白分泌不足,破坏泪膜稳定性。Moore 和Collier的报道发现,边缘性睑缘炎、睑板腺炎以及眼结膜炎会引起脂质分泌不足和异常脂质的产生[9-10]。使用医用胶的试验组术后TFBUT 无明显变化,而使用传统缝合技术的对照组术后TFBUT 水平降低,可能与缝合法比使用医用胶引起更多的炎症反应有关,缝合闭合创口时会产生新的创口,局部缝线和线结的存在更容易刺激局部组织产生炎症反应。这一结果与本试验组织学染色结果一致。

术后医用胶试验组和传统缝合对照组在STT和TFBUT 水平无显著性差异,说明医用胶在犬眼睑手术的应用无明显的局部毒性反应。同时,医用胶比传统缝合技术对术后泪膜稳定性的影响更小。

3.3 眼压变化 试验组和对照组术后0 h 时IOP的升高可能与麻醉苏醒有关,术后动物苏醒、拔气管插管刺激以及疼痛反应都有可能引起试验犬的心率、呼吸、血压的变化,而血压的升高也同时引起IOP 升高,术后6 h 时两组IOP 也恢复至术前正常水平。Cheng 等人的报道发现,在进行眼部手术时,合理的使用丙泊酚可有效的预防拔管所导致的眼压升高[11]。Sackel 等人的报道发现,眼睑手术对于眼压的影响无统计学意义[12]。

3.4 瘢痕化程度及组织学染色 试验结果显示,试验组和对照组瘢痕化程度有明显差异,使用N-BCA医用胶闭合创口所形成的的瘢痕小于传统缝合法的对照组,试验组瘢痕颜色与周围皮肤更加接近,瘢痕厚度更小。王涛等人的报道发现,在兔眼组织使用氰基丙烯酸酯粘合剂闭合创口,有抗瘢痕和减缓成纤维细胞中增生的作用[13]。

宏观评估瘢痕化程度和组织学染色观察结果相符。本身为液态的N-BCA 医用胶使用后形成固体薄膜,粘合创口两侧,并在创缘表面形成一层保护膜,具有一定抗感染能力。Wilkinson J N 等人的报道发现,在进行硬膜外导管固定术时,N-BCA 有一定抗菌作用,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌等革兰阳性菌有一定抑制作用,可以降低感染率,这种作用是使用缝线所不能达到的[14]。江志坚等人的报道发现,在兔皮肤结膜撕裂伤修复时,使用缝线会破坏正常皮肤结构,真皮层部分腺体结构损伤、萎缩,有严重的胶原纤维增生[15]。

3.5 结论 氰基丙烯酸正丁酯医用胶的使用是一种有效的闭合犬眼睑皮肤创口的方法,对眼睑皮肤组织和眼表无明显影响,可用于犬眼睑手术,且由于其方便快捷,较缝合而言低风险,因此值得推广使用。