MTSS1与SOX2在结肠癌中的表达及其对术后患者预后的影响

刘庆滨，陈艳昕，肖芳，周颖，张辉

随着我国人民生活水平不断提高、人口老龄化加剧，生活习惯和饮食结构的改变，导致临床结直肠癌发病率逐年升高，严重威胁人们身体健康，虽然手术治疗具有较好的临床疗效，但患者术后极易复发，仍是临床中严峻的挑战[1-2]。术后转移和复发是临床中导致结肠癌治疗失败主要原因之一，因而如何筛选出可有效评估结肠癌患者治疗预后质量的指标，并根据指标变化及时予以治疗，可有效提高治疗质量，并改善患者生存质量和生存率[3]。有学者采用mRNA差异性显示技术对膀胱癌细胞系中不同转移能力基因进行分析发现肿瘤转移抑制蛋白1(metastasis suppressor 1，MTSS1)，且其在诸多恶性肿瘤转移和复发中起到十分重要作用，日益成为当前肿瘤转移研究新热点和新机制[4-5]。SRY性别决定区Y Box2蛋白(sex determining region Y-box 2，SOX2)具有较高敏感性，常被用于鉴定干细胞亚群，近年来有研究发现，在乳腺癌、胃癌等多种肿瘤中可见明显的SOX2表达异常[6]。因而笔者对医院收治的结肠癌患者进行分析，探讨MTSS1与SOX2在结肠癌中的表达及其对术后患者预后的影响，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2015年1月—2016年7月秦皇岛市第一医院普外科收治的行结肠癌根治术治疗患者60例作为研究对象，均经术后病理学确诊。纳入标准：(1)手术前未接受化疗及其他药物治疗；(2)结肠癌TNM分期均为Ⅲ期；(3)术前未出现远处转移及多原发肿瘤；(4)病理及病历资料完整。排除标准：(1)术前辅助放化疗；(2)TNM分期为Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ期；(3)非肿瘤因素死亡；(4)结肠癌复发；(4)主动申请退出本研究。60例结肠癌根治术患者中男39例，女21例，年龄48～68(59.93±5.23)岁；参照WHO结直肠癌病理分型标准[7]，组织学分型均为腺癌；分化程度：高分化腺癌15例，中分化腺癌17例，低分化腺癌28例。本研究经医院伦理委员会批准，患者及家属知情同意并签署知情同意书。

1.2 免疫组化检测与判断 本研究中所用免疫组织化学二抗、DAB显色试剂盒均购买自中杉金桥(北京)生物技术有限公司。MTSS1及SOX2抗体均购买自南京福麦斯生物科技有限公司。60例肿瘤病灶标本及癌旁标本应用SP法检测MTSS1和SOX2表达，均参照试剂盒说明书进行操作。若细胞内出现棕褐色颗粒则判定MTSS1或SOX2阳性。在10倍显微镜下随机选取10个视野，然后在40倍高倍镜下检测阳性细胞百分比，取其均值，并依照阳性细胞百分比评分，其中阳性细胞数≤10%则判定为0分；阳性细胞数为10%～25%则判定为1分，26%～74%为2分，≥75%则判定为3分。对染色强度进行评估，无色记为0分，淡黄色记为1分，棕黄色记为2分，棕褐色记为3分。将两者积分相乘，0分记为阴性(-)、1～5分记为阳性(+)、6～9分记为强阳性(++)。

1.3 随访 随访患者2年，每3个月随访1次，采取医院复查、电话随访相结合的多种方式随访，计算患者生存率。

1.4 统计学方法 使用SPSS 19.0软件行统计学分析。计数资料用例或%表示，采用卡方检验；采用多因素Logistic回归分析病理因素与MTSS1和SOX2表达；绘制Kaplan-Meier生存曲线分析患者生存率。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 MTSS1及SOX2表达比较 结肠癌组织中MTSS1表达阳性率为86.67%(52/60)，低于癌旁组织的98.33%(59/60)，差异有统计学意义(χ2=9.799，P=0.002)；结肠癌组织中SOX2表达阳性率为70.00%(42/60)，低于癌旁组织的95.00%(57/60)，差异有统计学意义(χ2=21.645，P=0.000)。

2.2 MTSS1及SOX2表达与临床病理关系 不同性别、年龄患者MTSS1及SOX2阳性表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)；不同肿瘤分化程度、血管侵犯、淋巴结转移患者肿瘤组织中MTSS1及SOX2表达量比较差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。

2.3 临床病理因素与MTSS1和SOX2表达相关性 性别、年龄与MTSS1及SOX2阳性表达率无明显相关性(P>0.05)，肿瘤分化程度、血管侵犯及淋巴结转移与MTSS1及SOX2阳性表达显著相关(P<0.05)，见表2。

2.4 患者生存率调查结果 MTSS1阳性表达患者2年生存率为42.86%，高于阴性表达患者的12.50%，差异有统计学意义(χ2=23.022，P=0.000);SOX2阳性表达患者2年生存率为44.74%，高于阴性表达患者的27.27%，差异亦有统计学意义(χ2=6.623，P=0.010)，见图1、图2。

3 讨 论

结肠癌是现阶段临床中较为常见的肿瘤，其临床发病率及病死率均呈新发展趋势，其与患者饮食结构、环境气候因素密切相关。有学者研究结果显示，若能在临床中实现早期诊断并筛查出结肠癌，可有效改善手术治疗疗效，延长患者生存时间，但目前临床中仍缺乏特异性评估早期结直肠癌的临床指标，当患者表现出明显的临床症状时多已处于中晚期，预后质量较差[8]。因而临床中如何有效筛查并评估患者预后质量已成为目前研究热点。肿瘤转移、侵袭是多步骤、多基因参与、连续、复杂过程，减少肿瘤增殖细胞间黏附分子，增强肿瘤细胞运动能力，减弱黏附力，是肿瘤细胞侵袭转移发生基础，其在肿瘤转移侵袭过程中起到十分重要的作用[9]。为避免不同肿瘤患者的病情差异对本研究的影响，因而选择了TNM分期Ⅲ期患者作为研究对象。

表1 MTSS1及SOX2表达与临床病理关系

表2 患者临床病理因素与MTSS1和SOX2表达相关性

图1 MTSS1阳性及阴性患者生存曲线

MTSS1是近年来研究发现的新型转移抑制基因，在人体内许多正常组织中均可见明显表达，但在转移的膀胱癌或乳腺癌细胞系中均无表达，因而有学者认为MTSS1属一种肿瘤转移抑制型基因[10]。但有学者指出，在前列腺癌细胞系中若增加MTSS1表达则可能增加肿瘤转移潜力[11]。早期肝癌病变与MTSS1高水平表达密切相关，其可能是重要的诱导肝癌早期病变的强诱导剂。有学者采用免疫组化技术对结直肠癌患者病变组织进行检查，结果显示MTSS1缺失是十分常见的肿瘤晚期事件[12]。结肠癌中MTSS1可有效抑制肿瘤转移。但也有研究结果显示，胃癌组织中MTSS1阳性表达率明显高于正常组织，因而在胃癌组织中MTSS1可能在肿瘤侵袭转移过程中起到十分重要的促进作用。在不同恶性肿瘤病灶中MTSS1表达不同，存在组织特异性。

图2 SOX2阳性及阴性患者生存曲线

SOX2是重要的维持胚胎干细胞特征和早期胚胎发育的必需转录因子，在消化道器官发育及肿瘤发生发展过程中起到十分重要的作用。有研究结果表明，在食管鳞癌组织中SOX2表达情况与患者预后质量密切相关[13]。SOX2在胰腺侵袭性导管癌、胰腺上皮内瘤病变均可见明显高表达。有研究结果显示，在胃癌组织中SOX2表达量下调，抑制细胞生长，促进细胞凋亡和细胞周期阻滞[14]。SOX2在黏液腺癌、结肠息肉、印戒细胞癌中均可见明显高表达状态，可通过上调MUC4AC表达而起到作用。直肠癌手术后采用放化疗治疗，SOX2、CD133阳性表达可作为评估患者远处复发与预后不良预警指标。此外，有研究指出，在呼吸道、中枢神经系统、泌尿生殖系统等肿瘤中均可见SOX2表达[15]。

本组结肠癌患者病灶组织中MTSS1及SOX2阳性表达率显著低于正常癌旁组织；且对患者肿瘤分化程度分析显示，低分化组患者病灶组织中MTSS1及SOX2阳性表达率均明显低于高分化组。回归分析结果显示，MTSS1及SOX2阳性表达率与肿瘤分化程度、血管侵犯及淋巴结转移密切相关。随访结果显示，MTSS1及SOX2阳性表达组患者生存率均高于阴性组。笔者认为，在结肠癌中MTSS1及SOX2具有一定的抑制肿瘤作用，可作为评估患者预后质量的标志物，具有较高的临床应用价值。

综上所述，MTSS1及SOX2在结肠癌中阳性表达与患者预后质量密切相关，可用于评估患者预后质量。但本组研究中并未对MTSS1及SOX2的具体作用机制进行深入分析，有待后续深入研究。

利益冲突：无

作者贡献声明

刘庆滨，陈艳昕：设计研究方案，实施研究过程，论文撰写;肖芳：提出研究思路，分析试验数据，论文审核;周颖、张辉：实施研究过程，资料搜集整理，论文修改;黄江梅：进行统计学处理