不同剂量阿托伐他汀对急性冠脉综合征患者HO-1/HbCO系统、血清sOX40L水平影响及其与炎性因子的相关性分析

张驰，王丽岳，任浩进，龚凡，朱晓刚，徐超

随着人们生活水平以及生活饮食习惯的改变，我国冠心病的发病率和病死率正逐年增加，其中急性冠状动脉综合征(ACS)是冠心病的一种急症，临床分为心肌梗死和不稳定型心绞痛，严重威胁患者的生命健康[1]。研究显示，动脉粥样硬化(AS)是引发ACS的重要病理基础，其斑块破裂导致血栓的形成，进而阻塞冠状动脉管腔，诱发ACS的发生[2]。炎性免疫反应在AS的形成、发展、不稳定性斑块破裂以及形成血栓等阶段起着重要的作用，又是引发斑块破裂的重要因素。而炎性免疫反应的发生与体内T细胞密切相关，同时机体内存在多种配体可以对T细胞信号通路进行激活，其中可溶性OX40L(sOX40L)是较为重要的一种，主要于巨噬细胞、淋巴细胞等活化的抗原呈递细胞表面进行表达[3]。另外，白细胞介素-6(IL-6)是一种由单核巨噬细胞合成的细胞因子，其与ACS的起始、发展存在较为密切关系。C反应蛋白(CRP)是一种炎性反应急性期反应蛋白，与ACS的发生关系密切，可以为ACS患者的病情以及预后提供重要的诊断信息[4]。HO-1是一种机体重要的可以分解血红素形成铁离子、胆绿素以及一氧化碳的诱导型抗氧化酶类物质。HO-1/HbCO系统是人体内部重要的内源性防御系统，具有较好的抗氧化、抗炎作用[5]。而阿托伐他汀除具有典型的降脂功效以外，还具有抗炎、抗氧化、改善内皮细胞以及增强HO-1表达的作用，对动脉粥样硬化具有一定的防治功效。现观察不同剂量阿托伐他汀对ACS患者HO-1/HbCO系统、sOX40L水平以及相关炎性细胞因子的影响，分析HO-1/HbCO系统、sOX40L水平与相关炎性细胞因子的相关性，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2016年5月—2018年5月武汉科技大学附属普仁医院心内科收治ACS患者96例作为研究对象，按照随机数字法分为观察组和对照组，各48例。对照组给予常规剂量阿托伐他汀，观察组给予大剂量阿托伐他汀，2组患者在性别、年龄、病程、BMI、疾病类型以及合并症等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者及家属知情同意并签署知情同议书。

1.2 选择标准 (1)诊断标准：① 急性心肌梗死诊断标准参考WHO制定的急性心肌梗死(AMI)诊断标准的相关规定[6]；②不稳定型心绞痛诊断标准参考心血管病中华医学会分会关于不稳定性心绞痛的诊断标准[7]。(2)纳入标准：①符合上述诊断标准者；②入院前2月内，未服用他汀类降脂药物者。(3)排除标准：①合并有严重的肝肾功能不全者；②合并有全身性免疫疾病、风湿性疾病、结缔组织病以及周围血管性疾病者；③近2周经过手术治疗或者严重感染患者；④对他汀类药物过敏者；⑤合并有严重的心包炎、主动脉夹层、心源性休克以及心力衰竭者；⑥合并有系统性红斑狼疮以及风湿性关节炎等系统性炎性疾病者；⑦依从性差，中途退出者。

表1 2组患者基线资料比较

1.3 治疗方法 2组患者均给予ACEI类、硝酸酯类、β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、溶栓剂以及抗凝剂等药物进行常规基础治疗。对照组患者另加阿托伐他汀20 mg/d，观察组患者另加用阿托伐他汀40 mg/d，均睡前口服， 1次/d，治疗周期均为1个月。

1.4 观察指标与方法 于治疗前以及治疗后5 d清晨抽取患者空腹肘静脉血5 ml，离心机[Ortho BioVue；强生(上海)医疗器材有限公司]3 000 r/min离心10 min取血清，冰箱-75℃条件下保存，待测。

1.4.1 血清HO-1/HbCO系统、sOX40L检测：(1)血清HO-1水平测定。采用酶联免疫吸附法进行测定，试剂盒购自上海江莱生物科技有限公司，操作方法严格按照说明书执行。(2)血清碳氧血红蛋白(HbCO)水平测定。选用具塞试管盛装0.02 mol/L Tris的稀释液15 ml，再向其中加入血清10 μl，充分混合，加入连二亚硫酸钠60 mg混匀，置于室温条件下10 min左右，选用紫外分光光度计(岛津，UV2450型)对其进行400～500 nm波长光谱扫描，记录420 nm、430 nm处吸光度，通过HbCO%=[0.94(A420/A430)-0.69]×100%进行血清样品碳氧血红蛋白浓度的计算[6]。(3)血清sOX40L测定。采用酶联免疫吸附法，试剂盒购自上海晶抗生物工程有限公司，操作方法严格按照说明书执行。

1.4.2 血清炎性因子测定：CRP、IL-6采用酶联免疫吸附法，试剂盒购于上海沪鼎生物科技有限公司。

1.4.3 血脂水平测定：血清三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)采用酶法测定，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平采用磷钨沉淀法测定，通过Friedwald公式对低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平进行计算。

2 结 果

2.1 2组患者HO-1/HbCO系统、血清sOX40L比较 治疗前2组患者HO-1、HbCO、sOX40L水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后，2组患者的HO-1、HbCO水平均明显升高，sOX40L水平均降低。且观察组患者上述指标改善较对照组更为显著(P<0.01)，见表2。

2.2 2组患者血清CRP、IL-6水平比较 治疗前2组患者 CRP以及IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后， 2组均较治疗前明显降低，且观察组降低较对照组更为显著(P<0.01)，见表3。

表3 2组患者治疗前后血清CRP、IL-6水平比较

2.3 2组患者血脂水平比较 治疗前，2组患者血脂水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，2组患者血清TC、LDL-C水平均明显降低，且观察组患者降低较对照组更为显著(P<0.01)。2组患者治疗前后TG、HDL-C水平比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表4。

2.4 相关性分析 HO-1、HbCO水平与CRP、IL-6水平呈负相关， sOX40L水平与CRP、IL-6水平呈正相关，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表5。

3 讨 论

目前临床上对于ACS的治疗应用阿托伐他汀剂量，较为常用的为10 mg/d、20 mg/d，有少数患者给予80 mg/d进行治疗[8]。本研究在20 mg/d常规治疗的基础上，研究40 mg/d剂量对于ACS患者的影响，并分析治疗后患者的HO-1/HbCO系统、血浆sOX40L水平与CRP、IL-6的相关性。CRP是一种半衰期为19 h，能与肺炎链球菌的荚膜C多糖结合的急性期炎性标志物，主要是通过IL-6等炎性因子的刺激，经由人体肝脏合成分泌。正常情况下，人体内其血清浓度相对较低，并与冠心病病情的严重程度呈正相关[9]。IL-6也是一种与冠心病发展密切相关的急性期反应蛋白，源起于经过活化的单核巨噬细胞，另外其还是一种具有凝血功能的促炎性细胞因子，对被激活的巨噬细胞具有一定的浸润分化促进作用，可以增强相关细胞因子以及黏附因子的表达，一定程度增强机体炎性反应，进而加剧ACS的病情恶化[10-12]。HO-1是一种广泛分布于组织中网状内皮细胞以及单个核细胞的诱导型蛋白，人体在受到重金属、缺氧、氧化应激状态以及细胞因子等的刺激下，可诱导细胞内的HO-1活性增强，从而起到炎性反应抑制以及抗氧化作用，对血管内皮细胞产生保护作用。另外，HO-1还可以通过对细胞生长进行调节，从而致使内皮细胞凋亡量减少，稳定机体的内皮系统，抑制血管平滑肌增殖，促进其凋亡，减轻血管的不良重构[13]。HO-1诱导产生的HbCO具有血管直接扩张作用。HbCO可以通过抑制血管、舒张血管进而降低血压和维持血液灌注，在ACS患者缺氧条件下，调节冠状动脉血流量。另外，HbCO作为一种重要的内皮依赖性血管舒张因子，可以对血管舒张功能进行调节，抑制血管平滑肌增殖，并对NO的心肌保护作用起到增强作用[14]。

表2 2组患者治疗前后血清HO-1、HbCO、sOX40L水平比较

表4 2组患者治疗前后血脂水平比较

表5 HO-1/HbCO系统、血清sOX40L水平与CRP、IL-6相关性分析

本研究结果提示，40 mg剂量的阿托伐他汀可以更有效地改善ACS患者的炎性反应，同时增强HO-1/HbCO系统能力。这是由于阿托伐他汀是一种HMG-CoA还原酶抑制剂，可增强LDL基因受体的表达，抑制体内胆固醇的合成，减少肝脏对于LDL-C的合成分泌[15-17]。多项研究显示,机体血脂水平升高,可以增加冠心病的发生率以及加重病情,是ACS的发病以及发展的重要危险因素之一[18]。其还可以加剧人体对于异戊二烯类物质的消耗，增加HbCO含量，一定程度抑制氧化应激反应的发生，可以对血管内皮功能产生有效改善[19]；阿托伐他汀还可以对OX40/OX40L信号通路表达产生抑制作用，从而达到降低血管细胞对于组织因子、金属基质蛋白以及黏附因子等炎性因子的表达，抑制机体炎性反应以及免疫反应的发生，达到动脉粥样硬化斑块稳定的效果，对ACS的病发起到预防作用[20]。由于IL-6促炎因子对于CRP的形成具有增强作用，两者相关性好，另外，sOX40L与机体炎性反应关系密切，CRP、IL-6等炎性因子可通过聚集浸润或者间接性地产生OX40L等细胞因子，激活信号通路，故而sOX40L与CRP、IL-6等炎性因子呈现正相关，其之间的这种协同性对于ACS疾病也具有一定的预测价值[21]。由于阿托伐他汀具有改善内皮细胞功能的作用，可以增强内皮细胞对于HO-1以及HbCO的分泌，起到扩张血管、抑制调节血流量、抑制氧化应激状态、减轻炎性反应的发生、保护心肌细胞的作用，故其治疗后血清HO-1、HbCO水平升高，与CRP、IL-6呈负相关。

综上所述，阿托伐他汀治疗的急性冠状动脉综合征患者，其血清CRP、IL-6水平与sOX40L水平呈正相关，与HO-1以及HbCO水平呈现负相关，具有一定的临床应用价值。

利益冲突：无

作者贡献声明

张驰：整理资料，分析资料、撰写论文；王丽岳：修改论文；任浩进：收集整理资料，分析数据，图表设计；龚凡：收集整理资料，参考书籍查找；朱晓刚、徐超：收集资料