肺小活检中应用免疫组化检验对腺癌及鳞状细胞癌的鉴别诊断价值

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(东莞东华医院病理科，广东东莞 523110)

据WHO公布的资料显示[1]，近50年来肺癌(lung cancer，LC)是全世界范围内发病率、死亡率增长最快的恶性肿瘤。在肺癌中非小细胞癌和小细胞癌的准确区分对患者临床治疗意义重大，非小细胞癌标准化疗方案为卡铂/紫杉醇加安瓦斯汀治疗，但是部分鳞状细胞癌(SCC)患者应用安瓦斯汀时会出现咳血现象[2]，所以在临床治疗前必须明确对患者进行病理分型以提升用药的安全性。鉴于此，肺癌患者病理分型的鉴别诊断成为治疗的关键，本文则主要分析免疫组化检验应用于肺小活检中对腺癌(AC)和SCC诊断鉴别的临床价值。

1 对象与方法

1.1对象 我院2014年3月至2018年3月间收治的经病理诊断确诊为77例肺癌患者作为研究对象，其中SCC患者26例，男性23例，女性3例；年龄43～78岁，平均年龄56.6岁；低分化者14例、中分化3例、高分化7例。AC患者51例，男性31例，女性20例，年龄32～75岁，平均年龄55.1岁；低分化者19例，中分化者15例、高分化者17例。

1.2方法 经支气管镜采集受检者的活检标本，均使用浓度为10 %的甲醛固定，石蜡包埋处理，制作5张4 um厚切片，分别进行HE、免疫组织化学染色。使用免疫组化EnVison法进行检测,切片先脱蜡处理，再使用酒精脱水后经高温抗原修复，严格遵照试剂盒说明书操作。检测使用的单克隆抗体均由基因科技公司提供的即用型抗体。甲状腺组织做TTFI阳性对照、乳腺组织做p63阳性对照，肺泡上皮组织做napsinA阳性对照。扁桃体组织做CK5/6阳性对照。

1.3观察指标和判断标准 CK5/6阳性多表达于细胞浆，TTFI、p63阳性均表达于细胞核，而napsinA则表达于细胞质。阴性判定标准：肿瘤细胞表达阴性，或<10 %细胞表达，则判定为阴性[4]；若肿瘤细胞阳性表达≥10 %且<25 %间为“+”；≥25 %且≤50 %间为“++”，若>50 %则为“+++”[5]。

2 结果

2.1鳞状细胞癌和腺癌中4种标记物的表达情况 鳞状细胞癌中CK5/6阳性率为96.15 %，p63阳性率为100.00 %，TTF1和napsinA的阳性率均为0.00 %；在腺癌中napsinA阳性率最高为100.00 %，依次为TTF1的98.04 %，CK5/6为3.92 %，而p63仅为1.96 %，差异有统计学意义(P<0.05)，详见表1所示。

表1 鳞状细胞癌和腺癌中4种标记物的表达情况

3 讨论

我国城市人口中肺癌发病率占所有恶性肿瘤的首位[3]。近年来，随着环境污染增加、生活方式改变，肺癌向年轻化发展，该病严重危害中老年人群的生命健康[6]。早期肺癌患者无特异性症状，绝大多数患者发现时为中晚期，失去手术治疗时机，因此早期发现一种准确度高的诊断手段成为近年来临床研究的热点[7]。随着分子生物学技术的发展，人们对肺癌的发病机制和临床治疗有了更为深刻的了解和认知。肺癌化疗需要依据其病理分型进行区别对待，以提升治疗的安全性，近年来国内外有很多研究者采用免疫组织化学法对肺癌病理分型进行鉴别从而指导临床用药。

国外有学者对23例肺癌患者进行临床研究，对手术的肺组织蜡块中提取标本进行免疫组织化学检测，结果显示有14例患者表达TTF1、而TTF1表达为阴性最终的病理分型为鳞状细胞癌，12例鳞癌患者中有9例有CK5/6和p63阳性表达，但腺癌中未发现有1例患者有CK5/6和p63共同表达，由此说明免疫组化标记物能够鉴别肺癌的病理分型[8]。p63是p53家族新成员，是鳞状细胞癌恶性进展的标记物之一，本实验对26例鳞状细胞癌和51例腺癌患者进行免疫组化检验，鳞状细胞癌患者中CK5/6阳性率为96.51 %，而p63的阳性率为100.00 %，由此也证实了CK5/6在鳞状细胞癌的表达也呈阳性，也是鳞状细胞癌恶性进展的标记物。但TTF1和napsinA的阳性率均为0.00 %；同时在腺癌患者中TTF1的阳性率为98.04 %，而naspinA阳性率高达100.00 %，与以往研究结果基本一致。TTF-1对于肺组织、甲状腺均有特异性分子标记物，与此同时该标记物还可以对胚胎时期的肺基因、甲状腺和脑组织基因表达进行控制。NapsinA可以在脾白髓、肾小管、肺Ⅱ型上皮细胞和巨噬细胞中表达，以上两种标记物在肺组织存在特异性表达，因此是临床上经常用于鉴别是否原发性肺癌的主要标记物之一。此外NapsinA在小细胞肺癌中的表达为阴性，而TTF-1的表达呈阳性，因此可以作为病理诊断的主要依据。

综上所述，p63和CK5/6在鳞状细胞癌检测中有较大优势，napsinA和TTF-1在腺癌诊断的阳性率较高，因此在腺癌和鳞状细胞癌的诊断鉴别中可联合该4项指标进行综合评判，提升诊断准确率。