刘 涛 漆一鸣
(1. 延安大学医学院药理学教研室,陕西延安 716000;2. 贵州医科大学生物学教研室,贵州贵阳 550004)
蚤是重要的医学昆虫,是鼠疫、鼠源性斑疹伤寒等疾病的重要媒介(吴厚永等,1999)。印鼠客蚤Xenopsyllacheopis(Rothschild, 1903)属于蚤科,客蚤属。在我国滇粤闽黄胸鼠鼠疫疫源地,主要媒介为印鼠客蚤(贵州省卫生防疫站,2002)。因此,寻求一种杀灭印鼠客蚤的药物对防治鼠疫的流行有重要意义。苯醚威(又名双氧威,Fenoxycarb)化学名称为:乙基氨基甲酸酯,是第3代杀虫剂,属于非萜烯类昆虫生长调节剂,其杀虫作用是非神经性的,是具有保幼激素活性的昆虫生长调节剂。它具有安全性高、毒性低、选择性强、杀虫谱广、持效长、对环境无污染,可杀灭成虫的卵,但作用较缓慢(程暄生,1996; 姜志宽等,2001;张宏超等,2002)。氯氰菊酯毒力强、作用速度快,但蚤类对其可产生抗性(吴鹤松等,2005)。苯醚威与氯氰菊酯混配,其一、由于它们在结构上的特殊性(张友军,2003)不仅会弥补苯醚威药效较为迟缓的缺陷和蚤类对氯氰菊酯产生抗性的不足,而且有可能表现出增效作用。其二、对成虫和卵都有杀灭作用,增强杀虫效果。为此,本实验取长补短,将两种杀虫剂配伍,寻求最佳混配浓度,为蚤的防治提供重要的基础资料(李晓东,1999)。
印鼠客蚤大理株2002年从云南省地方病防治所引种,在贵州医科大学蚤类饲养室繁殖传代。将幼虫饲料过20目筛,筛出的蚤茧转入干净试管内,双层绸布封口,置于养蚤室内的玻璃缸内待其羽化。
氯氰菊酯原药从贵州省疾病预防控制中心获取,制备氯氰菊酯1 000 mg/L (丙酮为溶剂)储备液,再稀释储备液得到浓度为3.12、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 mg/L的测试液,苯醚威制备1 200 mg/L、1 400、1 600、1 800、2 000 mg/L的测试液,以空白和丙酮为对照(蒋志胜,1997;张宏超等,2002)。准确吸取300 μL测试液入500 mL三角烧瓶轻摇使均匀布满瓶底,自然通风4 h挥干丙酮得到药膜(赵善欢,1993;吴鹤松等,2005)。
按照不同浓度测试,取本室饲养印鼠客蚤新羽化未吸血成虫,一种浓度同时倒入500 mL三角烧瓶内(30只成虫、3瓶、10只/瓶),待30 min后将试蚤转到洁净的50 mL三角烧瓶内,观察并记录24 h死亡数,重复3次。死亡标准:中毒蚤侧卧、六足伸直,无活力、无任何反应或足虽有微弱抽动,但不能站立、复活,即为死亡(慕立义,1994)。
将每个浓度溶液制成药膜(制膜方法同1.2),取本室饲养印鼠客蚤未吸血新羽化成虫,同时倒入500 mL三角烧瓶内(10只/瓶),待30 min后将试蚤转到洁净的50 mL三角烧瓶内,观察24 h死亡率。实验条件:实验温度(21±2)℃、湿度(75±5)%,每次实验重复2次,间隔1周以上重复进行(每次实验均重新配制储备液和测试液)。如对照组死亡率<20%用Abbott公式校正,对照组死亡率>20%则实验重做(吴鹤松,2005)。
通过SPSS软件用直线回归法计算苯醚威、氯氰菊酯半数致死浓度和相关系数。
按不同比例混合法将苯醚威、氯氰菊酯混配,结果详见表1,表明:混配试剂3毒效最佳 (苯醚威6 mg、1000 mg/L氯氰菊酯溶液51 μL、丙酮9. 949 mL)。24 h死亡率70.0%,校正死亡率69.3%;混配试剂2、4、5: 24 h死亡率分别为58.9%、61.1%、53.3%,24 h校正死亡率分别为58.0%、60.2%、52.2%。均超过了苯醚威、氯氰菊酯单独使用的毒效,表现出明显的增效作用。
表1 苯醚威、氯氰菊酯混配剂对印鼠客蚤未吸血新羽化成虫的毒力Tab.1 Toxicity of combined insecticides of fenoxycard, cypermethrin to the newly emerged fleas X. cheopis
图1 苯醚威、氯氰菊酯混配剂对印鼠客蚤未吸血新羽化成虫的毒力Fig.1 Toxicity of combined insecticides of fenoxycard, cypermethrin to the newly emerged fleas X. cheopis
本次实验是用药膜法来研究苯醚威、氯氰菊酯及二者混配剂对印鼠客蚤的毒效,苯醚威、氯氰菊酯对未吸血新羽化成虫的LC50分别为1647.9752 mg/L、8.4861 mg/L。表明苯醚威需大剂量才对印鼠客蚤未吸血新羽化成虫有较明显直接致死作用。按比例混合法将二者混配,结果表明,混配试剂组的毒效均超过了苯醚威、氯氰菊酯单独使用的毒效,其中,混配试剂3毒效最佳 (苯醚威6 mg、1000 mg/L氯氰菊酯溶液51 μL、丙酮9. 949 mL);24小时死亡率70.0%,校正死亡率69.3%;表现出明显的增效作用。