MCHC和 RDW-SD及HbA2对地中海贫血和缺铁性贫血鉴别诊断价值

杨菊红 林列坤 王一娜

地中海贫血(thalassemia)又称海洋性贫血, 是一组遗传性溶血性贫血疾病。也是最常见的单基因遗传病［1］。在我国广东、广西、海南、云南等地为多, 由于常染色体遗传性缺陷, 引起珠蛋白合成障碍, 导致一种或几种珠蛋白数量不足或完全缺如, 因而红细胞被溶解破坏的溶血性贫血, 外周血红细胞呈小细胞低色素性改变。而缺铁性贫血(iron-deficiency anemia, IDA)由于铁摄入不足或丢失过多导致, 引起中晚幼红细胞出现“老核幼浆”现象, 而成熟红细胞为大小不均的小细胞低色素改变。目前我国开展的α-地中海贫血基因检测包括3种缺失型(--SEA, -α3.7和-α4.2), 3种突变型(CS、QS、WS), β-地中海贫血基因检测包括17个位点的19种突变型, α-地中海贫血和β-地中海贫血均表现为小细胞低色素性贫血, 但是HbA2增高对β地中海贫血有很好的辅助诊断意义, α-地中海贫血和缺铁性贫血也同样为小细胞低色素性贫血, 两者HbA2均减低, 致使在审核α-地中海贫血基因检测结果时, 需要排除缺铁性贫血的可能性。本研究经过随机筛选单纯性α-地中海贫血样本, 正常样本(已经排除地中海贫血和缺铁性贫血), 以及缺铁性贫血样本各60例, 通过分析三组MCHC、RDW-SD和HBA2的改变, 探讨其对α-地中海贫血及缺铁性贫血的鉴别诊断价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 于2017年1月～2018年3月本院收治的1900例地中海贫血基因筛查样本中随机抽取三组样本, 分别为正常组、α-地中海贫血组、缺铁性贫血组, 各60例。正常组中男26例, 女34例；年龄17～43岁, 经基因检测已排除α-地中海贫血和β地中海贫血, 受检者铁蛋白(ferritin, Fer)＞15 μg/ml。α-地中海贫血组中男23例, 女37例；年龄7～37岁, 经基因检测已确诊为α-地中海贫血, Fer＞15 μg/ml。缺铁性贫血组中男16例, 女44例；年龄3～47岁, 经基因检测已排除α-地中海贫血和β-地中海贫血, Fer＜15 μg/ml。三组的一般资料比较, 差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂 Sysmex XS-1000i血细胞计数仪及原装试剂；贝克曼DXI800全自动生化分析仪及原装试剂；SEBIA全自动毛细管电泳仪及原装试剂；Eppendorf 6333 PCR扩增仪；Hb-2012A医用核酸分子杂交仪；α-地中海贫血基因检测采用地中海贫血基因检测试剂盒(潮州凯普生物化学有限公司)。

1.2.2 标本采集与方法 血常规和地中海贫血基因检测均采用EDTA抗凝的真空采血管, Fer检测采用分离胶真空采血管。MCHC 和RDW-SD 用Sysmex XS-1000i血细胞计数仪检测, HbA2 用SEBIA全自动毛细管电泳仪检测。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

正常组MCHC水平为(335±14)g/L, α-地中海贫血组MCHC水平为(327±18)g/L, 缺铁性贫血组MCHC水平为(289±21)g/L；缺铁性贫血组MCHC水平明显低于正常组和α-地中海贫血组, α-地中海贫血组MCHC水平明显低于正常组, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。正常组RDW-SD水平为(41.7±3.8)%, α-地中海贫血组RDW-SD水平为(38.2±4.4)%, 缺铁性贫血组RDW-SD水平为(46.0±6.1)%；缺铁性贫血组RDW-SD水平明显高于正常组和α-地中海贫血组,正常组RDW-SD水平明显高于α-地中海贫血组, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。α-地中海贫血组和缺铁性贫血组HbA2水平均低于正常组, 缺铁性贫血组HbA2水平低于α-地中海贫血组, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 三组MCHC、RDW-SD、HbA2水平比较( x-±s)

3 讨论

目前检测的α-地中海贫血基因包括3种缺失型(--SEA,-α3.7和-α4.2), 3种突变型(CS、QS、WS), 不同基因型患者贫血程度也明显不同, 例如-α3.7/αα和-α4.2/αα型患者的外周血红细胞参数多为正常或略微偏低, --SEA/αα型患者红细胞参数多数明显减低, 这是因为遗传因素引起血红蛋白中的珠蛋白链一种或几种合成减少或缺如, 导致的血红蛋白组成改变, 临床症状的轻重不一。本研究发现, 不同基因型的α-地中海贫血患者血红蛋白(Hb)、平均红细胞体积(MCV)和平均红细胞血红蛋白含量(MCH)下降程度不同, 但MCHC较正常组略低, RDW-SD几乎不增高。可能的原因是α-地中海贫血以珠蛋白发生基因缺陷为最根本的致病因素,导致患者一定程度合成血红蛋白量明显减少, 减少量一般相对恒定, 因而红细胞的体积表现出较小的形态, 但红细胞的大小基本保持相对一致, 红细胞平均血红蛋白浓度也相对稳定。而缺铁性贫血由于体内储存铁消耗而缺乏, 不能得到足够的补充, 致使合成血红蛋白的铁元素不足引起的贫血, 多数缺铁性贫血患者的MCV、MCH、MCHC明显低于参考值,RDW-SD明显增高。也就是说缺铁性贫血患者外周血红细胞不仅呈现小细胞低色素, 而且大小不均, 这是由于铁元素长期处于一种不稳定的供应状态, 随着缺铁程度的不断变化,导致了红细胞充盈程度的相应改变, 最终形成了外周红细胞小细胞低色素, 明显大小不均的现象, MCHC也会因为缺铁程度的加重而明显减低［2］。

HbA2(α2δ2)在正常成人体内约占血红蛋白总量的2.5%～3.5%, 引起HbA2升高的主要原因有β-地中海贫血和巨幼红细胞性贫血等, 引起HbA2降低的主要原因有α-地中海贫血、缺铁性贫血、α链或δ链变异体等［3］, 作者的研究发现缺铁性贫血组HbA2水平降低比α-地中海贫血组更为显著。

地中海贫血基因检测过程包括核酸提取, 聚合酶链式反应(PCR)扩增, 分子杂交等一系列步骤才能完成, 最后通过观察膜条上的斑点显色的不同位置来确定基因类型, 由于影响因素较多, 显色结果会出现斑点显色太浅, 非特异性结合出现假阳性斑点, 甚至也可能由于DNA的纯度和浓度太低,造成实验失败等, 结合患者的红细胞参数和Hb电泳结果来审核地中海贫血基因检测结果尤为重要, 红细胞(RBC)、Hb、MCV、MCH这些指标对地中海贫血基因结果审核有一定的意义, 但是MCHC、RDW-SD和HbA2对α-地中海贫血更有鉴别诊断价值。

鉴于地中海贫血基因结果审核的重要性, 建议临床医生尽量完善血常规, 血红蛋白电泳, Fer 等检测项目, 从实验室的角度出发, 只有具备完善的资料, 严谨的实验流程, 细心的审核态度, 才能确保实验结果的准确性, 才能尽量避免漏检的发生和及时发现罕见型地中海贫血的可能。