乳腺癌患者中转录因子特化蛋白1和血管内皮生长因子的表达及临床意义

王鲁英 王永红 叶 琼 王秋颖

乳腺癌患者中转录因子特化蛋白1和血管内皮生长因子的表达及临床意义

王鲁英 王永红 叶 琼 王秋颖

目的检测乳腺癌患者中转录因子特化蛋白-1(Sp-1)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达，分析其临床意义。方法选取乳腺癌患者60例作为实验组，乳腺良性肿瘤作为对照组，酶联免疫吸附法检测血液中VEGF、Sp1含量，免疫组织化学法检测组织VEGF、Sp1表达，分析二者水平变化与临床病理特征的关系。结果实验组血清中VEGF、Sp1水平较对照组升高，差异有统计学意义(P<0.05)；实验组癌组织中VEGF、Sp1阳性率较癌旁组织、对照组升高，差异有统计学意义(P<0.05)；VEGF、Sp1水平与肿瘤病理类型、分化程度、原发灶大小、淋巴结转移、其他脏器远处转移、放疗、化疗有关(P<0.05)，与年龄、PS评分无关(P>0.05)。结论在乳腺癌患者的血清及组织中均存在VEGF、Sp1的高度表达，二者的水平与乳腺癌病理类型、分化程度、原发灶大小、淋巴结转移、其他脏器远处转移、放疗、化疗有关。

乳腺癌；VEGF；Sp1

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1580～1583)

乳腺癌近年来发患者群逐渐年轻化，死亡率显著升高[1]。研究证实，转录因子特化蛋白-1(transcription specificity protein,Sp-1)可与DNA的GC-box区域结合，增强基因的转录，还可能与细胞内DNA损伤及染色体重构有关[2]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) 可由机体多种细胞分泌，作用于酪氨酸激酶受体，对新生血管的生成意义重大[3]。本研究通过选取在我院住院治疗的乳腺癌患者作为研究对象，采用酶联免疫吸附法检测血液中VEGF、Sp1的含量，免疫组织化学法检测组织中VEGF、Sp1的表达，分析其水平的变化与乳腺癌发生发展的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2011年1月至2016年1月在我院住院行手术治疗的乳腺癌患者60例，年龄30～70岁，平均年龄(52.5±4.8)岁，均经病理学诊断确诊。选取同期在我院行手术治疗的乳腺良性肿瘤患者标本30例作为对照组，年龄35～70岁，平均(52.6±4.2)岁。入组患者在年龄、分期等方面无显著差异，具有可比性(P>0.05)。

1.2 观察指标及检测方法

1.2.1 酶联免疫吸附法检测入组患者血液中VEGF、Sp1含量 入组患者抽取空腹静脉血，离心，取上清，于低温冰箱中保存。采用酶联免疫吸附法检测血液中VEGF、Sp1含量：计算板孔数；稀释标准品；加样；配液；洗涤；显色；终止； 450 nm波长测吸光值；计算样品浓度。

1.2.2 免疫组织化学法检测组织中VEGF、Sp1的表达 福尔马林固定；脱水、透明、浸蜡、包埋；切片、脱蜡、脱水；热修复、阻断；正常山羊血清封闭；滴加一抗50 μl静置1 h；滴加二抗静置10 min；DAB显色；终止；复染、分化；封片；计算机图像系统拍照，每张切片随机选取5个视野，并记录。

1.3 判断标准

VEGF、Sp1阳性[4]以细胞核不染色，胞膜或胞质内出现棕色或棕黄色颗粒为阳性，染色细胞数：阴性(-)≤10%；弱阳性(+)11%～25%；阳性(++)26%～50%；强阳性(+++)>50%。以(-)为阴性，(+)～(+++)阳性。

1.4 统计学处理

应用SPSS 17.0统计学软件进行数据处理，计数资料用χ2检验，计量资料用方差分析，以(均数±标准差)表示，多因素分析采用Logistic回归模型，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 入组患者血清中VEGF、Sp1含量

抽取入组患者外周静脉血，采用酶联免疫吸附法检测血清中VEGF、Sp1含量，结果发现，实验组VEGF为(1.25±0.14) ng/ml，Sp1为(1.07±0.12) ng/ml，较对照组升高，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 入组患者血液中VEGF、Sp1含量

注：*为与对照组比较，P<0.05。

2.2 免疫组织化学法检测VEGF、Sp1的表达

实验组癌组织中VEGF强阳性表达10例，阳性表达38例，阳性率高达80%；Sp1强阳性表达11例，阳性表达36例，阳性率高达78.3%，较癌旁组织、对照组升高，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 各组VEGF、Sp1的表达情况/例

注：*为与癌旁组织比较，P<0.05，#为与对照组比较，P<0.05。

2.3 实验组VEGF、Sp1水平与临床病理特征的关系

VEGF、Sp1水平与肿瘤病理类型、分化程度、原发灶大小、淋巴结转移、其他脏器远处转移、放疗、化疗有关(P<0.05)，与年龄、PS评分无关(P>0.05)；对于腺癌、分化程度低、原发灶大于3cm、出现淋巴结转移及器官远处转移、未行放疗、化疗的乳腺癌患者，其VEGF、Sp1水平升高越明显，见表3。

2.4 VEGF、Sp1表达与乳腺癌临床病理特征的多因素分析

对单因素分析中病理类型、分化程度、原发灶大小、淋巴结转移、其他脏器远处转移、放疗、化疗进行logistic多因素分析，结果发现，病理类型、分化程度、原发灶大小、淋巴结转移、器官远处转移、放疗、化疗均是独立危险因素，具体结果见表4。

3 讨论

恶性肿瘤细胞具有不可控制生长的特点，其侵袭、迁移的能力与新生血管形成密切相关，是恶性肿瘤得以不断生长及转移的基础，针对肿瘤新生血管进行治疗，已经成为临床上肿瘤治疗的热点[5-6]。Sp1是核转录激活因子，在癌细胞中，Sp1可通过与ATF7IP形成复合体，维持端粒酶的活性，Sp1的异常表达与肝癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌等肿瘤的发生发展有很大的关系[7]。本研究通过检测VEGF、Sp1在乳腺癌中的表达，分析其临床意义。

表3 乳腺癌VEGF、Sp1水平与临床病理特征的关系(例，%)

在本研究中，取患者外周静脉血检测血清VEGF、Sp1含量，实验组VEGF、Sp1水平均较对照组升高。取实验组癌组织、癌旁组织及对照组乳腺组织检测，实验组癌组织中VEGF、Sp1阳性率较癌旁组织、对照组显著升高。这提示，在乳腺癌患者的血清及组织中均存在VEGF、Sp1的高度表达。既往研究指出，VEGF在新生血管形成中意义重大，能够促进内皮细胞有丝分裂，增加血管通透性，在多种恶性肿瘤中高度表达[8]。Sp1参与多种恶性肿瘤的增殖、分化、侵袭、迁移过程，通过增强Sp1的DNA 结合活性，能够造成肿瘤细胞增殖、血管生成等恶性表型，最终导致恶性肿瘤的发生、发展[9-10]。

本研究对实验组VEGF、Sp1水平与乳腺癌患者的临床病理特征分析发现，VEGF、Sp1水平与乳腺癌的病理类型、分化程度、原发灶大小、淋巴结转移、其他脏器远处转移、放疗、化疗有关，与年龄、PS评分无关；对于腺癌、分化程度低、原发灶大于3 cm、出现淋巴结转移及器官远处转移、未行放疗、化疗的乳腺癌患者，其VEGF、Sp1水平升高越明显；多因素分析显示病理类型、分化程度、原发灶大小、淋巴结转移、器官远处转移、放疗、化疗均是独立危险因素。对乳腺癌的临床研究发现，检测乳腺癌组织VEGF发现，VEGF蛋白表达显著升高，并且与乳腺癌的新生血管生成、患者出现早期复发相关[11]。VEGF 促进微血管的生成，微血管为瘤细胞提供营养，促进瘤细胞生长，VEGF高表达与肿瘤的侵袭、复发、转移密切相关。

综上所述，在乳腺癌患者的血清及组织中均存在VEGF、Sp1的高度表达，二者的水平与乳腺癌的病理类型、分化程度、原发灶大小、淋巴结转移、其他脏器远处转移、放疗、化疗有关。临床上通过检测VEGF、Sp1水平的变化情况可能对乳腺癌患者的预后及治疗提供一定的指导，具有重要的临床意义。

表4 VEGF、Sp1表达与乳腺癌临床病理特征的多因素分析

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ExpressionofTranscriptionFactor-specificProtein1andVascularEndothelialGrowthFactorinBreastCancerPatientsandItsClinicalSignificance

WANGLuying,WANGYonghong,YEQiong,etal.

No92HospitalofPLA,Nanping,353000

ObjectiveTo study the expression of transcription factor-specific protein 1(Sp1) and vascular endothelial growth factor(VEGF) in breast cancer patients and its clinical significance.Methods60 patients with breast cancer was the experimental group,breast benign tumors was the control group,enzyme-linked immunosorbent method was used to detect the contents of VEGF in blood,Sp1,immune histochemical method to detect VEGF,Sp1 expression in the organization,analysis of the level of change and the clinical pathological characteristics of breast cancer.ResultsThe serum level of VEGF,Sp1 in the experimental group was higher than the control group,the difference was statistically significant(P<0.05);Experimental cancer tissue VEGF,Sp1 higher positive rate than tissue adjacent to carcinoma(P<0.05);Level of VEGF,Sp1 and pathological type,differentiation degree,primary focal size,lymph node metastasis,distant metastasis of other organs,radiotherapy,chemotherapy(P<0.05),were not related with age,PS score(P>0.05).ConclusionBreast cancer has high expression of VEGF,Sp1 in serum and tissues,they are related with the pathological type of breast cancer,the degree of differentiation,primary focal size,lymph node metastasis,distant metastasis of other organs,radiotherapy,and chemotherapy.

Breast cancer;VEGF;Sp1

353000 中国人民解放军第九二医院

王永红

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.10.005

R737.9

A

1001-5930(2017)10-1580-04

2016-09-07

2017-04-25)

(编辑吴小红)