TPFI-2、VEGF在EBUS-TBNA获取非小细胞肺癌患者转移淋巴结中的表达及相关性研究

刘振丽 张广宁 山凤莲 王全义 武薇 刘艳 李钊

TPFI-2、VEGF在EBUS-TBNA获取非小细胞肺癌患者转移淋巴结中的表达及相关性研究

刘振丽 张广宁 山凤莲 王全义 武薇 刘艳 李钊

目的 探讨TPFI-2、VEGF在EBUS-TBNA获取非小细胞肺癌患者转移淋巴结中的表达及相关性。方法 运用EBUS-TBNA技术获取非小细胞肺癌患者纵隔、肺门转移淋巴结组织标本40例及非转移肿大淋巴结组织标本10例，通过免疫组化检测其中的TFPI-2、VEGF表达，同时测定MVD，进行相关因素分析。结果 非小细胞肺癌转移淋巴结中：（1）TFPI-2、VEGF的表达水平与患者吸烟指数、肺癌临床分期、是否有淋巴结转移有关（P＜0.05）；（2）TFPI-2与VEGF表达呈负相关（P＜0.05）；（3）高、低MVD组中的TFPI-2、VEGF阳性表达率存在明显差异（P＜0.05）。结论 非小细胞肺癌转移淋巴结中TFPI-2、VEGF的表达与吸烟、TNM分期、淋巴结转移、MVD有关，且TFPI-2可能通过下调VEGF表达来抑制非小细胞肺癌肿瘤新生血管的形成。

TPFI-2；VEGF；EBUS-TBNA；非小细胞肺癌；转移淋巴结

经支气管超声引导针吸活检术（EBUS-TBNA）自21世纪初开始研发以来，目前已在肺癌诊断和分期、胸部良恶性疾病诊断中获得了广泛应用[1-2]。本研究运用EBUS-TBNA技术获取了非小细胞肺癌患者纵隔、肺门转移淋巴结，检测其中组织因子途径抑制物-2（TFPI-2）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达并探寻其意义，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2014年8月～2016年3月运用EBUS-TBNA技术获取非小细胞肺癌患者纵隔、肺门转移淋巴结组织标本40例（观察组），及非转移肿大淋巴结组织标本10例（对照组），均经病理检查证实。所有入选患者术前均未实施放化疗。观察组患者年龄35～75岁，平均年龄为（60.2±5.5）岁。对照组患者年龄36～76岁，平均年龄为（60.7±4.8）岁。两组患者一般资料对比差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性，详见表1。

1.2 方法

1.2.1 EBUS-TBNA 使用EBUS-TBNA内镜设备进行。患者仰卧位，头部略向后上方抬起，给予静脉麻醉后将内镜经口插入，探头固定在穿刺的部位，常规超声扫查以初步确定目标，再给予多普勒血流检查再次确认并锁定淋巴结组织，进行病灶大小和穿刺距离的计算，然后将穿刺针经内镜置入，调整内镜视野使其能看到穿刺针套管尖部，确保穿刺距离准确后，对穿刺路径进行检查，水囊紧紧贴住穿刺部位进行穿刺吸引。

1.2.2 TPFI-2和VEGF检测 采用免疫组织化学方法（二步法免疫组化染色[3]），胞浆内显现棕黄色颗粒且胞核无染色即为阳性表达，否则为阴性。

1.2.3 肿瘤微血管密度（MVD）测定 按Weidner方法进行[4]，以24.5个/视野为界值，低于界值划入低MVD组，高于界值（含界值）为高MVD组。

1.2.4 其他信息获取 搜集整理患者的临床资料，记录患者的性别、年龄、吸烟指数等。吸烟指数=每天吸烟支数×吸烟年数。

1.3 统计学方法

使用SPSS 17.0软件进行分析，对数据分别进行χ2检验、秩和检验和样本相关系数比较，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 TFPI-2 、VEGF表达与患者一般临床病理资料的关系

非小细胞肺癌转移淋巴结中TFPI-2、VEGF的表达水平与患者吸烟指数、肺癌临床分期、是否有淋巴结转移有关（P＜0.05），而与患者性别、年龄、组织学分型、组织分化程度等临床病理特征无关（P＞0.05），详见表1，表2。

2.2 非小细胞肺癌转移淋巴结组织中TFPI-2与VEGF表达的相关性

非小细胞肺癌转移淋巴结组织中的TFPI-2的表达与VEGF的

表达呈负相关（P＜0.05），详见表3。

表1 观察组淋巴结中TFPI-2、VEGF的表达与患者一般临床病理资料的关系（n）

表2 两组患者TFPI-2、VEGF的表达对比（n）

表3 非小细胞肺癌转移淋巴结组织中TFPI-2与VEGF表达的相关性（n）

2.3 非小细胞肺癌转移淋巴结组织中TFPI-2与VEGF的表达与MVD的相关性

高、低MVD组中的TFPI-2、VEGF阳性表达率均存在明显差异（P＜0.05），详见表4。

表4 非小细胞肺癌转移淋巴结组织中TFPI-2与VEGF的表达与MVD的相关性（n）

3 讨论

近年来，原发性肺癌发病率和死亡率逐年上升，严重威胁人类健康，发生淋巴结转移是预后不良的主要征兆。一些研究表明，TFPI-2基因编码的TFPI-2蛋白能抑制多种恶性肿瘤的生长、血管生成、浸润及转移；VEGF是目前已知的作用最强特异性最高的促血管生长因子，肺癌血管生成是其生长和转移的解剖和生理学基础，抑制肺癌血管生成是控制肺癌侵袭转移、改善患者预后和提高生存率的重要措施[5-8]。

本研究探讨了TPFI-2、VEGF在EBUS-TBNA获取非小细胞肺癌患者转移淋巴结中的表达及相关性，通过上述研究结果分析得出，非小细胞肺癌转移淋巴结中TFPI-2、VEGF的表达与吸烟、TNM分期、淋巴结转移、MVD有关，且TFPI-2可能通过下调VEGF表达来抑制非小细胞肺癌肿瘤新生血管的形成，从而阻断其营养供应来抑制肿瘤的生长，发挥一定的抑制肿瘤侵袭转移的作用，这为将来非小细胞肺癌治疗提供了一个新的值得探索的方向。

[1] 解桢，赵辉，周足力，等. 支气管内超声引导针吸活检术在纵隔病变诊断及鉴别诊断中的应用价值[J]. 中国微创外科杂志，2013，13（4）：295-299.

[2] 徐桂香. 常规经支气管镜针吸活检与实时超声引导下经支气管镜针吸活检对胸部疾病诊断价值的研究[D]. 济南：山东大学，2012：5-16.

[3] 闫振宇，杨新华. 细胞学涂片的免疫组化染色[J]. 实用诊断与治疗杂志，2005，19（10）：754-755.

[4] Weidner N. Intratumor microvessel density as a prognostic factor in cancer[J]. Am J Pathol.，1995，147（1）：9-19.

[5] 董永强，纪涛，吴建涛，等. 非小细胞肺癌中TFPI-2与Survivin表达关系的研究[J]. 临床肺科杂志，2012，17（2）：298-300.

[6] 董永强，梁江水，殷桂林，等. TFPI-2、VEGF在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究[J]. 临床肺科杂志，2013，18（9）：1625-1627.

[7] 梁江水，殷桂林，董永强，等. TFPI-2和MMP-9在非小细胞肺癌中的表达及临床意义[J]. 现代肿瘤医学，2013，21（11）：2458-2460.

[8] 吕艺华，李晓凤. 非小细胞肺癌中TFPI-2的表达及其研究进展[J]. 包头医学院学报，2013，29（1）：120-121.

Expression and Clinical Significance of TPFI-2 and VEGF in Metastatic Lymph Nodes of Non-small Cell Lung Cancer by EBUSTBNA

LIU Zhenli ZHANG Guangning SHAN Fenglian WANG Quanyi WU Wei LIU Yan LI Zhao Department of Respiratory Medicine, Affiliated Hospital of Ji’ning Medical University, Ji’ning Shandong 272100, China

Objective To explore the expression and clinical significance of TPFI-2 and VEGF in metastatic lymph nodes of Non-small cell lung cancer by EBUS-TBNA. Methods Obtained 40 specimen of mediastinal lymph nodes and hilar lymph node and 10 specimen of non-MLPN of Nonsmall cell lung cancer by EBUS-TBNA. Detected the TPFI-2, VEGF and MVD by immunohis-to -chemistry examine and taken correlation factor analysis. Results In metastatic lymph nodes of Non-small cell lung cancer: (1) The expression level of TPFI-2 and VEGF was related to smoking index, clinical staging of lung cancer and lymph node metastasis (P＜0.05). (2) Significant negative correlation was found between TPFI-2 and VEGF (P＜0.05). (3) There was significant difference of positive rate of TPFI-2 and VEGF between high MVD group and low MVD group (P＜0.05). Conclusion The expression level of TPFI-2 and VEGF in metastatic lymph nodes of Non-small cell lung cancer was related to smoking index, clinical staging, lymph node metastasis and MVD. TPFI-2 can inhibit the start of neovascularization in non-small cell lung cancer by the decrease of VEGF.

TPFI-2, VEGF, EBUS-TBNA, Non-small cell lung cancer, Metastatic lymph nodes

G643

A

1674-9308（2016）33-0069-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.33.038

济宁医学院附属医院呼吸内科，山东 济宁 272100